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1、Sysmex XS-500i血液分析仪作业指导书 Sysmex Automated Hematology Analyzer (XS 500i)血细胞分析仪是用于检测血细胞(红细胞、白细胞和血小板)数量和白细胞分类的仪器。检测血液中血细胞数量的变化对临床有关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果具有重要参考价值。1、检验目的 Sysmex Automated Hematology Analyzer (XS 500i)血细胞分析仪是用于检测血细胞(红细胞、白细胞和血小板)数量和白细胞分类的仪器。检测血液中血细胞数量的变化对临床有关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果具有重要参考价值。 2、原理 2.
2、1 XS 500i采用一束半导体激光照射标本，并依据每个细胞产生的三种信号来相互区分，即前向散射光，侧向射散光和侧向光和侧向荧光。前向散射光反映细胞体积，侧向散射光反映细胞内涵物，如核和颗粒，侧向荧光反映细胞脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)含量。 2.2 DIFF通道：表面活性剂可完全溶解红细胞和血小板，部分溶解白细胞。第2种试剂使核酸染上荧光染料。XS 500i的DIFF通道可将白细胞分成5类。在STROMATOLYSER-4DL试剂中的表面活性剂可溶解或破坏红细胞和血小板，并在白细胞膜上打出小孔。在STROMATOLYSER-4DS试剂中的聚次甲基染料可进入破损白细胞，与核酸和细
3、胞器结合，经波长633nm的激光照射，所产生荧光强度与细胞核酸含量成一定比例。在STROMATOLYSER-4DL试剂中的有机酸能与嗜酸性颗粒特异结合，根据侧向散射光信号强度，能提高嗜酸性粒细胞从中性粒细胞区分出来能力。 3、仪器 SYSMEX XS-500i自动血液分析仪 4、试剂： 4.1 稀释液： CELLPACK(PK-30L) 氯化钠： 6.38g/L 硼酸： 1.0g/L 四硼酸钠 0.2g/L EDTA-2K： 0.2g/L 4.2 Hb溶血素： SULFOLYSER (SLS-210A) 月桂洗硫酸钠： 1.7g/L 4.3 STORMATOLYSER 4DL(FFD-200A
4、) ： 非离子表面活性剂：0.18% 有机季铵盐： 0.08% 4.4 WBC分类染液： STORMATOLYSER 4DS(FFS-800A) 聚次甲基染料： 0.002% 甲醇： 3.0% 1,2-亚乙基二醇： 96.9% 5.操作步骤： 5.1打开电脑 5.2双击“IPU”图标，出现IPU窗口和登陆对话框。输入用户名和密码。点击确认进入IPU。 5.3 检查废液是否已满，并倒空。打开主机电源，IPU与主机通信连接 5.4主机初始化，然后做本底。 5.5 本底通过后，主机指示灯变绿，表示仪器处于待机状态，可以开始检测质控标本了。 5.6质控检测：点击“手动”按钮，出现“手工样本号”对话框，
5、在“手工样本号”对话框再点击“质控”按钮，出现“选择质控文件”对话框，选择好质控文件后，点击确认打开所选质控文件，混匀质控标本，按“开始”键开始分析质控样本，分析完后跳出质控样本分析结果，观察结果是否在控，若在控按“接受”按钮退出，开始检测病人样本，若失控按“取消”退出，查找原因，继续检测质控样本，直到质控结果在控。 5.7样本分析：点击“手动”按钮，出现“手工样本号”对话框，在“手工样本号”对话框输入样本号，选择分析模式“CBC+DIFF”，样本预稀释模式“是”或“否”。点击确认，混匀样本，按“开始”键开始分析样本。分析结束后在“浏览器”下的“主屏”界面，观看结果、直方图和散点图，判断是否需
6、要复片。 5.8关机：双击“菜单”下的“关机”按钮，跳出“关机”对话框，点击“执行”按钮，主机自动冲洗2分钟，之后提示关闭主机电源，然后关IPU窗口退出程序，最后关闭电脑。 5.9仪器维护： 5.9.1.每日维护：每天关机自动清洗，如24小时待机，则执行一次“菜单”下的“自动清洗”。 5.9.2每周维护：在“控制器”“保养”下执行排空废液，堵孔去除，去除气泡。 5.9.3每月维护：每月或1200次分析之后开展一次每月维护，在“控制器”“保养”“每月清洗”下执行，同时执行清洗废液瓶。 6.参考范围： 6.1.1.白细胞(WBC)计数： 成人(4 10)109/L 儿童(5 -12) 109/L
7、新生儿(15-20) 109/L 6.1.2.白细胞分类(成人)： 中性粒细胞（50-70）% 淋巴细胞（20-40）% 嗜酸性粒细胞（0.5-5）% 嗜碱性粒细胞（0-1）% 单核细胞（3-8）% 6.2红细胞(RBC)： 男(4-5.5)1012/L 女(3.5-5)1012/L 新生儿(6-7)1012/L 6.3 血红蛋白(HGB)： 男（120-160）g/L 女（110-150）g/L 新生儿（170-200）g/L 6.4血小板(PLT)： (100-300)109/L 6.5血球压积(HCT)： 男 0.42-0.49 女 0.37-0.43 6.6平均红细胞体积 (MCV)：
8、 （86-100）fl 6.7平均红细胞血红蛋白含量(MCH)： （26-31 ）pg 6.8平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)： （310-370）g/L 6.9红细胞体积分布宽度变异系数（RDW-CV）： （11.6-14.0）%； 6.10红细胞体积分布宽度标准差（RDW-SD）： （39.0-46.0）fL。 6.11血小板体积分布宽度（PDW）： （15.5-18.1）% 6.12平均血小板体积（MPV）： (9.4-12.5)fl； 6.13大血小板比率（P-LCR）： (13-43)。 7.临床意义： 7.1白细胞 7.1.1. 白细胞计数 7.1.1.1 生理性增加 新生儿、运
9、动、饭后、冷水浴后、疼痛、月经期、受寒、妊娠、分娩、阵发性心动过速、阳光或紫外光照射、抽搐、恶心、呕吐、麻醉等。 7.1.1.2. 病理性增加 类白血病、白血病、急性化脓性细菌感染、急性溶血、急性失血、单核细胞增多症、淋巴细胞增多症、真性红细胞增多症、腮腺炎、病毒性肝炎、淋巴瘤、组织坏死、手术后、肿瘤转移、药物中毒、代谢性酸中毒、过敏等。 7.1.1.3. 减少 伤寒、副伤寒、斑疹伤寒、兔热病、布鲁杆菌热、流感、麻疹、风疹、革登热、传染性肝炎（亦可增多）、疟疾、过敏性休克、系统性红斑狼疮、粟粒性结核、败学症、重症细菌感染、恶液质、放射治疗、肿瘤化疗。恶性贫血、非白细胞性贫血、再生障碍性贫血、脾
10、功能亢进、戈谢病、Felty综合症、Chediak-Higashi综合症、阵发性睡眠性血红蛋白尿症等。 7.1.2白细胞分类计数：见下述各种白细胞增多、减少的临床意义 中性粒细胞（N） 1）生理性N增多：饱餐、激动、剧烈运动、高温、严寒可使N暂时性增高、新生儿、月经期、妊娠5个月以上可增高，生理性增多都是过性的，不伴有白细胞质量变化2）病理性中性粒细胞增高： 原因很多，大致归为反应性增多和异常增生性增多两大类：反应性增多是机体对各种病因刺激的应激反应，动员骨髓贮存池中的粒C释放或边缘池粒C进入血循环。因此，增多的粒C大多为成熟的分叶核粒C或较成熟的杆状核粒C，而异常增生性增多为造血组织中原始或
11、幼稚粒C大量增生，释放至外周血中的主要是病理性粒C。急性失血，可能与大出血所致的缺氧和机体的应激反应，动员骨髓贮存池中的血细胞释放有关。急性中毒恶性肿瘤 非造血系统恶性肿瘤有时可出现持续性WBC增高，以N为主，可能的机制为：a. 肿瘤组织坏死的分解产物刺激骨髓中的粒细胞释放b. 某些肿瘤如肝Ca、肾Ca等肿瘤细胞可产生促粒细胞生成因子c. 恶性肿瘤骨髓转移破坏骨髓对粒细胞释放的调控作用。 异常增生性增多：见于粒C白血病如AML、CML ，骨髓增殖性疾病。中性粒细胞减少：感染性疾病病毒感染：流感、麻诊、风诊、肝炎；细菌：伤寒，严重的细菌感染年老：慢性消耗疾病或晚期恶性肿瘤伴感染预后差血液系统疾病
12、 非白血性白血病 恶性贫血物理 化学因素、放射线、核素、毒物、药物单核-巨噬C系统功能亢进，脾亢其它 过敏性休克淋巴细胞增高： 生理性增高：儿童，出生4-6天的可达50%，4-6岁后逐渐减低病理性增高：百日咳、传染性单核细胞增多症、淋巴细胞性白血病、传染淋巴细胞增多症、病毒性肝炎、弓形虫病 减低： 急性感染、粟粒性结核、晚期肿瘤、艾滋病、伴T淋巴细胞减少的免性缺陷 单核细胞 增高： 单核细胞性白血病、系统性红斑狼疮、亚急性细菌性心内膜炎、活动性结核、急性感染恢复期、原虫感染 减低： 使用皮质类固醇激素、再生障碍性 贫血、多毛细胞白血病 嗜碱性粒细胞 增高：慢粒、何杰金病、癌转移、铅和铋中毒等；
13、减低无意义。嗜酸性粒细胞 增高：变态反应性疾病 哮喘 荨麻诊 药物过敏寄生虫病 血吸虫、丝虫、囊虫皮肤病：湿诊 剥脱性皮、银屑病血液病：CML、Lyphoma E白血病某些急性肿瘤：肿瘤转移或有坏死灶的恶性肿瘤某些传染病，传染病感染期，E常减低，唯有猩红热急性期E增加其它，风湿性疾病，垂体前叶功能减退，肾上腺皮质功能减退高E综合征，少见，这组疾病包括肺浸润和E增高，过敏性肉芽肿，E心内膜炎减低：临床意义较小，长期应用皮质激素后7.2红细胞(RBC)： 7.2.1. 生理性减少：见于妊娠中后期、6个月至2岁的婴儿等。 7.2.2. 病理性减少：造血原料不足、造血功能障碍、红细胞破坏过多 或失血所
14、引起的各种贫血。 7.2.3. 相对性增多：主要因血浆容量减少所致，见于脱水、呕吐、腹泻、多尿、多汗、大面积烧伤、吸烟、高血压、肥胖等。 7.2.4. 代偿性增多 主要见于缺氧、新生儿、高原环境、CO中毒、严重肺气肿、肺源性心脏病、先天性心脏病、心衰等。 7.2.5. 绝对性增多 克隆性真性红细胞增多；非隆性红细胞增多，与促红细胞生成素产生过多有关，见于肾癌、肝细胞癌、雄激素分泌细胞肿瘤、肾囊肿、肾盂积水、肾移植、小脑血管瘤、子宫肌瘤。 7.3 血红蛋白(HCG)： 生理性增加：新生儿、高原居住者。 病理性增加：真性红细胞增多症、代偿性红细胞增多症（如先天性青紫性心脏病、慢性肺性疾病、脱水）。
15、 减少：各种贫血、白血病、产后、手术后、大量失血。 7.4 红细胞比积(HCT) ： 与红细胞计数、血红蛋白测定的意义类同7.5 。 7.5 血小板(PLT)： 7.5.1. 生理性 正常人血小板在一天内可有6%-10%变化；表现为早晨低，午后较高；春季低，冬季略高；平原较低，高原较高；静脉血比毛细血管血高10%；月经前低，后升高；妊娠中晚期升高，分娩后减低；运动后升高，休息后恢复。 7.5.2 病理性 减少：除创伤之外，血小板减少是引起出血的常见原因。常见疾病有：、血小板生成障碍，如急性白血病、再生障碍性贫血；、血小板破坏过多，如ITP、脾功能亢进，系统性红斑狼疮；、血小板消耗过多，如DIC
16、、血栓性血小板减少性紫癜。 增多（血小板大于400109/L）：、骨髓增生性疾病：慢性粒细胞白血病，真性红细胞增多症；、原发性血小板增多症；、急性大出血，急性溶血，急性化脓性感染；、脾切除手术后。 7.6MCV、MCH、MCHC 主要用于贫血的形态学分类，见下表 贫血的形态学分类贫血的形态学分类 MCV（fL） MCH（pg） MCHC（g/L） 大红细胞性贫血 100-160 35-50 310-370 正红细胞性贫血 80-100 27-35 310-370 单纯小细胞性贫血 72-80 21-26 300-370 小细胞低色素性贫血 50-80 12-30 240-300 7.7RDW-
17、CV、RDW-SD： 7.7.1. 用于缺铁性贫血的诊断和疗效观察，缺铁性贫血时RDW增大，经治疗后可恢复正常。 7.7.2. 用于小细胞低色素性贫血的鉴别，缺铁性贫血时RDW增大，而轻型珠蛋白生成障碍性贫血时RDW正常。 7.7.3. RDW与MCV结合可将贫血分为6种。小细胞均一性：MCV下降，RDW正常，如轻型珠蛋白生成障碍性贫血。小细胞不均一性：MCV下降，RDW增大，如缺铁性贫血。正常细胞均一性：MCV、RDW均正常，如某些慢性疾病。MCV正常，RDW增大，如早期缺铁性贫血。大细胞均一性：MCV增大，RDW正常，如再生障碍性贫血。大细胞不均一性：MCV、RDW均增大，如巨幼细胞性贫血
18、。 7.8MPV、PDW、P-LCR 7.8.1. MPV 其临床意义要结合PLT的变化才二价值。、鉴别血小板减少的原因：当骨髓造血功能损伤致血小板减少时，MPV减少；当血小板在周围血液中破坏增多时，导致血小板减少，MPV增大；血小板分布异常致血小板减少时，MPC正常。、MPV增大可作为骨髓造血功能恢复的较早期指征：骨髓造血功能衰竭时，MPV与PLT同时持续下降；造血功能抑制越严重，MPV越小；当造血功能恢复时，MPV增大常先于PLT升高。、其它：MPV增大见于骨髓纤维化、ITP、血栓性疾病及血栓前状态、脾切除、慢粒、巨大血小板综合症、镰刀细胞性贫血；MPV减小见于脾亢、化疗后、AA、巨幼细胞
19、性贫血等。 7.8.2. PDW 是反映血小板体积大小的异质性参数，增大见于急淋化疗后、巨幼细胞性贫血、脾切除、慢粒、巨大血小板综合症、血栓性疾病等；可用于鉴别原发性血小板增多症和反应性血小板增多症，前者PDW增加，后者PDW正常。 7.8.3. P-LCR 代表血小板计数中体积 12fL的血小板的比值或数量，有助于识别堆集血小板、大血小板和细胞碎片，并可监测骨髓的造血功能 8. 标本采集： 随机采取病人静脉血或末梢血数滴，用100g/L EDTA-K2 抗凝(20ul抗凝1ml血，相当于2mgEDTAK2/1ml血)。 9. 注意事项： 9.1. 血细胞计数应用EDTA-K2为抗凝剂，用量为
20、EDTA-K2*2H2O1.52.0mg 可抗凝1ml血不能用肝素或枸橼酸钠等抗凝剂。 9.2. 采集后在室温中贮存不应超出6h；如需制用血涂片应在2h内完成。 9.3. 测定前抗凝血应充混匀，任何小凝块或血小板聚集均会影响血细胞计数。 9.4. 注意病理因素对血液分析仪使用的影响，特别是各系统的报警提示。如是否有大血小板对血小板计数的影响；有无有核红细胞对白细胞计数的影响等等。 9.5. 如有冷凝集现象，将血置37水浴箱10min后立即测试。 10. 质量控制： 10.1. 每日工作开始应先做上海市临床检验中心的全血质控品，。 10.2. 出现失控，应校正后并重做质控，直至符合质控要求。 1
21、0.3. 按要求做好仪器校正和仪器对比工作。 10.4. 做好质控、失控和校正登记。 11. 报告复查： 对以下情况的样本进行复查(仪器及手工) (1)白细胞不分类或者分类不完全(初检、复检)；(2)白细胞计数不出结果:(初检、复检)；(3)单核细胞15%(初检)(4)淋巴细胞50%(初检)(5)Blast?报警信息(初检、复检),Immature Gran? (初检、复检)(6)血液科标本(初检、复检)及临床要求手工镜检标本（7）MCHC380g/L（初检、复检）协商后设定（经临床检验科讨论后）（8）WBC总数（WBC30109/L）(初检)（9）PLT计数（PLT600109/L）(初检)NRBC（有核红细胞）？与Atypical Lympho?（异淋？）,PLT Clumps
