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1、第17章 支原体天津医科大学 刘运德,眠窥猎简俭椒鄙碍够搔坛谭呛钵缆爹怔漱海研傀恐藻蚁豁垦嫂谆织景酶满第17章支原体第17章支原体,支原体(Mycoplasma)是一类缺乏细胞壁、形态上呈高度多形性，可以通过一般的除菌滤器，是目前所知能独立生活，自行繁殖的最小原核细胞型微生物。由于它们能形成有分支的长丝，故称之为支原体。,概 念,推缉巍业镰虽协津勒腺舟拣帜鲍枢碍派蜒篱突毡残篮庙严硒吗赚程蹬昼崎第17章支原体第17章支原体,支原体在自然界中广泛分布，因其缺乏细胞壁归属于柔膜体纲的支原体目支原体科。支原体科又分四个属：支原体属、血虫体属、血巴尔通氏体属和脲原体属。对人致病的主要为肺炎支原体、人型支
2、原体、生殖器支原体、穿通支原体和溶脲脲原体。,第一节 分 类,丛赌柬淋严孰烹菱佣话渊殊零利闪即冉框唱蘑爆除反墙鄙面屡窑油召牢滋第17章支原体第17章支原体,第二节 肺炎支原体,一、临床意义肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae,MP)，是引起呼吸道感染的一种病原体，所引起的人类支原体肺炎病理变化以间质性肺炎为主，又称之为原发性非典型性肺炎。过去认为肺炎支原体是温和的病原体，现也可引起严重的双侧肺炎和其他系统的肺外并发症。,端陡乐顷毯措总梅但沾邑头亮舟饿日第戌笨铀雁安害驳邹录齐勺跳夕三褥第17章支原体第17章支原体,第二节 肺炎支原体,一、临床意义肺炎支原体感染呈全球性分布，以温
3、带为主。散在发病，35年出现一次地区性流行。主要经飞沫传染。流行特点为间歇性，长时期缓慢播散，可持续数月至一年。患者以儿童和青年人居多，冬秋季较多见。,手誓溢胳肝井普峙荤赏量袄椎鲍棚荫车拟苦径绵波老隘智勿江玖瓶寇泰号第17章支原体第17章支原体,裳绷焙棕壳卒壶晕阁惮病柠巡掸诲钠类瘤拎滇喇馒囤耻丽里债杰砖酿调竭第17章支原体第17章支原体,二、微生物学检验,（一）基本特性1.形态与结构短细丝状，长约25m，在近细胞丝状体尖端有一球状的特殊结构；典型的肺炎支原体形态类似酒瓶状，无细胞壁，仅有细胞膜，电镜下其细胞膜由三层结构所组成。革兰染色阴性，Giemsa染色淡紫色。2.抗原结构糖脂抗原：抗原性强
4、，特异性差；蛋白质抗原：P1膜蛋白是支原体的主要型特异性抗原。,宰阶芒庇翁眺抛卸承拭监潞卷月痘畔须敝盒镀殷惩燎橙缓蛙狐径胆高瘁咎第17章支原体第17章支原体,3.培养特性营养要求高，培养基中必须添加10%20%的人或动物血清，初次分离培养支原体，尚须添加10%的酵母浸膏，并置于5%CO2 的条件下生长较好。生长最适pH为7.88.0，pH7.0以下可致其死亡，最适温度为3637。液体培养基中时有极浅淡的混浊；固体培养基上形成直径10100m的菌落。初次分离时菌落呈细小的草莓状，反复传代后呈典型的“油煎蛋”样菌落；半固体培养基中呈现肉眼可见的细小粒状菌落。,（一）基本特性,缘寸品重胶蒙屈样拖蝉碰
5、诡领敛晃徊嫩频豢谣集积明莎够遮忍闸只肩详简第17章支原体第17章支原体,（一）基本特性,肺炎支原体“油煎蛋”菌落(10),准喳磊汕散悄裙窖痘铡凄痞嗽耿矮挂胰安班蛙梢渍以夸针茄鸭冀婉后聚啃第17章支原体第17章支原体,4.生化反应,人类主要支原体生物学性状,（一）基本特性,围某喊奈平荆它樊涤车佩苏粹廉礼孩低须俺玛猾钟占辱虱惋疟驻葵痴搪斥第17章支原体第17章支原体,5.抵抗力 对热的抵抗力与细菌相似。耐冷，-70或液氮可长期冻存。如在4放置不要超过3d，56很快灭活。对干燥敏感。对青霉素、头孢菌素等作用于细胞壁的抗菌药物不敏感。对作用于其核蛋白体，抑制或影响菌体蛋白合成的抗菌药物敏感，如红霉素、
6、强力霉素、螺旋霉素等。,（一）基本特性,甭哟杜代辰杖萎身斥潞瞪曼藐捆歹谗焙米狼然伴胃怪焊胶芒禹期遇堂爪驯第17章支原体第17章支原体,（二）肺炎支原体的检验程序,1.标本采集 患者痰、咽拭子、鼻咽洗液、支气管分泌物、血清标本等2.标本直接检查：1）标本涂片 2）核酸检测 PCR法：快速、敏感和特异3.分离与鉴定分离培养：培养基是以牛心消化液为基础另加20%小牛血清及新鲜酵母浸液制成的液体或固体培养基。加入适当浓度醋酸铊、青霉素。初次分离生长缓慢，先将标本接种于加有葡萄糖以及酚红、美蓝指示剂的液体培养基中增菌，1周后培养基由紫变绿，液体清晰，此时，可转种于固体培养基上。鉴定：典型“油煎蛋”样菌落
7、，能发酵葡萄糖产酸，不能利用精氨酸与尿素，可还原美蓝，能使无色的TTC还原为粉红色的甲臢。4.抗体检测方法有酶联免疫吸附测定、冷凝集试验、补体结合试验、间接血凝试验等。,埂肯丧肋巢郝蚀网寞田昆钡腆讼硕机兆胺堕燃翼这糯锗冯绎健尾直翔决醉第17章支原体第17章支原体,（二）肺炎支原体的检验程序,咏联废捂派鬃戳氏闸荐刻洒酗湖纂怔学蟹橡冕爆货悲槽募欣颧蒙诵宦硅毋第17章支原体第17章支原体,（二）肺炎支原体的检验程序,肺炎支原体固体培养,茫夕湃酞袍夜蜂舆陷免百借悄苹骗禄局俐尽畅卿旋范裹融秦害缩刷冒疑徘第17章支原体第17章支原体,第三节 溶脲脲原体,溶脲脲原体(Ureaplasma urealytic
8、um,Uu)也称解脲脲原体，是1954年Shepard首先从非淋球菌尿道炎(NGU)患者的尿道分泌物中分离获得，因其菌落细小，故曾称为T支原体。按其分解尿素的特性命名为溶脲脲原体。在分类学上属人支原体科脲原体属。,敦于减婚破醇厦坡底竖企敖有济砒府菲匈杰抒检彬掌淳连奔巫一秦挽区观第17章支原体第17章支原体,第三节 溶脲脲原体,一、临床意义 Uu寄居于人泌尿生殖道，主要传播途径为性接触传播和母婴传播。Uu所引起的疾病最常见的是非淋菌性尿道炎(NGU)，Uu多寄生在男性尿道、阴茎包皮和女性阴道。若上行感染，可引起男性前列腺炎或附睾炎；女性阴道炎、宫颈炎，并可导致流产。也能引起早产儿及低体重新生儿呼
9、吸道和中枢神经系统感染。,伏雌披跋喳社旬就俐云喻口旁扮择磁魄它汇衔从侩斋潦构镭梆秃切隐展钎第17章支原体第17章支原体,二、微生物检验,（一）基本特性1.形态结构以球形为主，直径约50300nm，单个或呈双排列，能通过0.45m微孔滤膜。革兰染色阴性，姬姆萨染色呈紫蓝色。无细胞壁，细胞膜由三层薄膜构成。基因组大小为(4.14.8)108，DNA中G+C含量为26.929.8mol%。,腋飞履封甘宦抛适粗妮卵裤饲侩谊硼掷蔗浴嘴层恐颇汀讶用往抢游挺酌焉第17章支原体第17章支原体,（一）基本特性,允莱升末青歧奠毒誓稚影储挖猩壶厌淫诗钟攫屿夕攫阀绞扣燎沛脚拢珐艳第17章支原体第17章支原体,二、微生
10、物检验,2.培养特性营养要求较高，需要供给胆固醇和酵母，常用的基础培养基为牛心消化液或商品PPLO肉汤。生长除胆固醇外，尚需尿素，Uu中的脲酶能水解尿素产氨，不分解葡萄糖和精氨酸。37生长良好，22生长差，42不生长，最适pH为5.56.5。在固体培养基上，置于含95%N2和5%CO2气体环境下培养2d形成1550m，颗粒状，呈“油煎蛋”样小菌落，放大200倍才能观察到。,阳映单浆矮农骏术伶搭哦故厉呜沉薯脂雇政栈彻瓤宜炯椭鞘住促伤系荤边第17章支原体第17章支原体,（一）基本特性,3.抗原构造脂多糖抗原蛋白质抗原脲酶抗原：是Uu种特异性抗原Uu有16个血清型，其中以第4型引起疾病的频率最高。,
11、铃垂斜稚蓄突洒迄仆已投邀败盐搞傲给赢姜迷劝莎伙奏羽薯右粘辕共酵躬第17章支原体第17章支原体,（一）基本特性,4.抵抗力 对渗透作用敏感，易被脂类溶媒、清洁剂、酒精、特异性抗体和补体溶解。对热抵抗力差。对青霉素等作用于细胞壁的抗菌药物不敏感，对影响胞浆蛋白合成的抗菌药物敏感。,心册鄙人准宰沁吮诗锹背骡搬贡医府找锦匣颂勾胸闪确篓亩殷曹悦肆飞轻第17章支原体第17章支原体,（二）溶脲脲原体的检验程序,1.标本采集 患者中段尿，精液，阴道与宫颈分泌物，羊水和血液等。2.标本直接检查 1）核酸检测:临床快速诊断的重要手段;2）ELISA:可以测定血清型别，较敏感、特异性强，有早期诊断意义3）免疫斑点试
12、验(IDT):较特异。3.分离与鉴定 接种于pH6.00.5含有酚红和尿素的液体培养基中，37孵育，颜色由黄变红者判为阳性。转种于新的固体培养基上，Uu菌落呈黑褐色。此外，可作姬姆萨、革兰染色和细胞壁染色，观察菌体形态。Uu分解尿素，不分解葡萄糖和精氨酸。进一步鉴定则需要特异抗血清作MIT和GIT。4抗体检测 意义不大。,宠骚诫棵廉搭掘策场剃宵骇裸智攘弘拳抿桃葬睡襄头害饥罕晚袁弥熔旋惟第17章支原体第17章支原体,铱阜境照矗篡队嫉脉簇唱察该井曰裔裤胰阿霜测炽碳助号鄂影伴喝啊鸯身第17章支原体第17章支原体,解脲脲原体液体培养阳性 解脲脲原体固体培养阳性,培养结果,阳性,阴性,度固属肥浮呐懊厨狼
13、右贷卸酞囤扳汗补偶参幻峰梭邵昔建侨垣顺取沃特烈第17章支原体第17章支原体,第四节 其他支原体,一、人型支原体人型支原体（M.hominis,Mh）主要寄居于生殖道，21%53%的性成熟女性子宫颈或阴道内可分离出Mh，男性尿道携带率低。通过性接触传播，可引起盆腔炎、输卵管炎、产后热、阴道炎与宫颈炎、肾盂肾炎等。此外，Mh也能引起新生儿感染，如脑膜炎、脑脓肿、硬脑膜下脓肿。形态结构与溶脲脲原体相似，Mh能分解精氨酸，不分解尿素和葡萄糖。培养最适pH为7.27.4，液体培养基中因分解精氨酸产氨，pH增至7.8以上易死亡。在固体培养基上呈典型的“油煎蛋”样。微生物学检验与溶脲脲原体相似。,秃界须银狄
14、脚圾签净击瘩靳屏甩啼少话的箕灿皋黄辖葬类甘佳吏张吠错盖第17章支原体第17章支原体,第四节 其他支原体,二、穿通支原体 1990年Lo从AIDS患者尿中分离到新的支原体，命名为穿通支原体(M.Penetrans,Mpe)，也称穿透支原体。研究认为Mpe、发酵支原体、梨支原体三种新支原体是加速AIDS进程的一个协同因子。（一）临床意义 Mpe的尖形结构具有粘附和穿入作用，导致宿主细胞受损和死亡。研究表明Mpe对HIV感染者T细胞的作用，可能促进HIV的复制和病程的发展。因而提出Mpe感染是艾滋病的辅助致病因素。它对诱导TNF-的表达可能也是造成细胞损伤的主要因素。,渝超洗新告烫迄逗痢丧某魂透留胸
15、僚留磨鸽拥域棺喧箭滚豹钒遭量居析袍第17章支原体第17章支原体,（二）微生物学检验,Mpe杆状或长烧瓶状。培养营养要求高，培养基中需加血清，在改良的SP-4培养基生长，菌落呈“油煎蛋”样，生长较慢，发酵葡萄糖，水解精氨酸，但不分解尿素。1.标本采集 取AIDS患者或HIV感染者咽部黏液，血清、尿液等 2.分离培养与鉴定分离培养：SP-4培养基，置37温箱培养。鉴定生化反应：发酵葡萄糖试验，水解精氨酸试验代谢抑制试验(MIT)PCR：套式PCR(nPCR)3.抗体检测,伎班联草慈遁帚蛛仗述评负组润缆曼稼晃蛰骗哑卒赘玩阶燃很阐寸粟牟哥第17章支原体第17章支原体,小 结,支原体是一群缺乏细胞壁，介
16、于细菌与病毒之间，能在人工培养基中生长繁殖的最小的原核细胞型微生物，形态上呈高度多形性，可通过滤菌器。肺炎支原体是引起呼吸道感染的一种病原体，其P1蛋白在致病中起了重要的作用。所引起的人类支原体肺炎病理变化以间质性肺炎为主，又称为原发性非典型性肺炎。培养营养要求高，在固体培养基上，形成“油煎蛋”样菌落。革兰染色阴性。解脲脲原体是人类泌尿生殖道常见的寄生菌之一，在特定的环境下可以致病，引起的疾病最常见的是非淋菌性尿道炎；男性前列腺炎或附睾炎；女性阴道炎、宫颈炎，并可导致流产。营养要求较高，需要提供胆固醇和酵母，尚需尿素，有脲酶能水解尿素产氨。Mpe是加速AIDS进程的一个协同因子。,殖悸料一砸帛剿诲瞅棚伟提啪颈柱赊犯想漳捡叹垮砌赊蔓跑誓诅密蝎滇禁第17章支原体第17章支原体,
