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1、新柏氏 TCT 膜式液基超薄细胞学检测技术,宫颈癌现状,子宫颈癌的发病率仅次于乳腺癌全世界每年约有47万新发子宫颈癌，亚洲约38万，中国约15万例全世界每年约 23万妇女死于宫颈癌，亚洲约19万，中国约8万，美国约0.5万1子宫颈癌患者年轻化，腺癌的发生率上升2年轻人群中的HPV感染增加，其中20岁左右的子宫颈癌患者占所有患者的5%,1.美国肿瘤协会,Facts and Figures 1999 2.Peters et al.,JNCL V76-3;423-427,?做宫颈癌筛查,细胞学筛查是目前宫颈癌主要的筛查方法*以宫颈筛查为目的 减少宫颈癌筛查几率 宫颈癌发病率为女性恶性肿瘤第二位 我国
2、宫颈癌的发病率和死亡率约占世界1/3*为何宫颈癌适合做筛查 上皮细胞通常经过数年（510年）的恶性前改变，而细胞 学筛查可发现这个过程，尽早治疗,阴道镜检组织活检颈管诊刮,宫颈病变,细胞学,阴性,CIN I,CIN II,CIN III,重度非典型增生,原位癌,锥切或全子宫切除,LEEP,物理治疗（冷冻、电凝、激光）,定期细胞学复查,诊断结果,处理,筛查,规范化的诊治流程,来源：郎景和，2001年中华妇产科杂志第5期，子宫颈病变诊治的总结和建议,巴氏涂片,五十年代是过去50年来最有效的子宫颈癌的筛选方法 自从被发明以来，已经减少了70%的子宫颈癌在过去的50年内，几乎没有什么改进,细胞学之父：
3、巴巴尼古拉,巴氏涂片的局限,假阴性(1.5-55%)1子宫颈发生病变，但病变细胞未在玻片上被发现不确定性(5-20%)2不明确的结果，如ASCUS假阳性(SIL-鳞状上皮内瘤变)(5-10%)3 细胞学检查结果为异常，但子宫颈并未发生病变,1.Hutchinson et al.,AJCP,Vol 101-2;215-219 2.Schiffman et al.,JLGTD 1998 2:3;165-169 3.Fahey et al.,1995 AJE,Vol 141-7;680-684,误差的原因,取样及制备的原因取样器未取到细胞细胞未被转移到载玻片上固定不及时读片的原因炎细胞、杂质、血液和
4、细胞重叠而阻挡视线细胞形态和结构不清晰，影响正确诊断,传统取样器,传统方法取样,改善的取样器,*采用扫帚样取样器,改善取样方法,柔软的刷毛适合每种宫颈形状，避免可能的伤害，能够收集所有细胞,传统方法涂片,传统方法涂片的问题,棉签,颈管刷和刮板,新柏氏TCT取样器（扫帚状）,转移到玻片上的细胞,手工涂片后取样器上剩余的细胞,92%的细胞还留在取样器上,82%的细胞还留在取样器上,93%的细胞还留在取样器上,研究表明：*传统的方法涂片 只转移了取样器上不到20%的细胞而80%以上的细胞都被抛弃了,140120100806040200,上皮细胞数(单位：万),Source:Hutchinson ML
5、,et al.,Am J Clin Pathol 1994.,两种涂片方法效果对比,克服样本制备的问题更有效的特制取样器保留了几乎所有的细胞过滤膜及微电脑控制制片，标本具有代表性及时的湿固定处理克服了读片的问题超薄，一致的细胞层大幅度降低不满意标本数细胞形态和结构更加清晰1,1.Linder et al,Arch Pathol Lab Med 1998;122:139-144,传统涂片,新柏氏涂片,同一病人标本，均为显微镜下放大40倍,新柏氏2000制片仪,过滤膜核心技术,*直径20毫米*妇科：7万个8微米的小孔组成*非妇科：7万个5微米的小孔组成,*取样器：扫帚样取样器*玻片：特制TCT玻片
6、 带有极强的正电荷,专利型保存液,细胞学首选媒质甲醇为主的专利型保存液含独有的EDTA配方，能够100%保存细胞结构、DNA等相关信息样本保存液唯一获FDA认证可以直接做HPV、衣原体、淋病测试样本细胞可以在常温下保存3-4周保存液完全符合美国实验产品安全标准,新柏氏TCT制备原理,*应用机械、电化学、气动与流体动力学原理，通过高精度的专用过滤膜来均匀细胞样本、采集细胞、并转移细胞*全自动标本制备过程由微电脑全程控制、一体化完成*细胞学制备技术的创新和革命,说明,*整个制片均为电脑控制无需人工干预*制备出的标本一致性高，薄层清晰，易于诊断，并具有充分的代表性*制作时间为 11.5分钟*同一样本
7、可最多制片10张,新柏氏的制备步骤,全自动化微电脑处理精确过滤膜有效的去除血液、黏液及非诊断性杂质,一个重要的转变,1.细胞分散2.细胞采集3.细胞转移,在诊所 在实验室,将细胞涮到保存液中,1 2 3,2 cm,新柏氏 2000,制备过程,细胞分散：将过滤器的过滤膜端置入保存液中，另一端置于机器上，由微电脑控制机轴带动过滤器在样本瓶内以3000转/分钟的速度旋转促使液体流动，流动足以分离杂质、粘液、彻底混匀细胞，使每部分的细胞样本都能代表整个细胞样本，此转速是经过科学测试，可以有效的使细胞混匀，但很柔和不会损伤细胞膜及细胞组织结构，并足以保持成团的细胞如宫颈管细胞或化生细胞不被打散细胞采集：
8、机器内部软件通过监视过滤器内的流速控制细胞采集过程。细胞混匀后，负压管开始抽吸，此时过滤器内部产生一个柔和的真空，炎细胞、血液碎片、液体透过过滤膜进入过滤器，病变细胞及粘滞在一起的霉菌疱子贴附在过滤膜的外表面细胞转移：当过滤膜的微孔全部被细胞覆盖后，过滤器自动提起并翻转180。，轻轻压在上方预置的特制玻片，依靠过滤器内微弱的正气压和玻片与细胞间正、负电荷的作用，使滤膜上的细胞附着在玻片上，在界定位置内形成一个直径2厘米的细胞薄层，并将玻片自动置入95%的酒精中固定,涂片效果对比,传统涂片,新柏氏TCT,具有代表性的随机样本,转移的细胞不具代表性细胞堆积并有重叠阻碍视线的成分,转移的细胞具有代表
9、性细胞分布均匀无阻碍视线的成分,传统涂片,新柏氏TCT,Hutchinson et al.,AJCP 1994;101:215-219,异常细胞,正常细胞,国际规范的诊断标准,传统巴氏五级分类主要以癌或非癌来区分检查结果无标本质量要求无微生物检查项目,TBS诊断标准诊断具体到严格定义的癌及各种癌前病变标本质量不合格的需重新测试报告微生物项目结果,TBS替代巴氏法,长时间应用 诊断标准差异悬殊核异质细胞 与组织学术语不一致分级过于简单 不适应现代细胞学发展无标本评估 缺乏与临床沟通感染炎症反应性细胞改变和癌前病变描述不详细 未提供给临床治疗和追随的参考依据,FDA临床试验,方法6,747 例分割
10、样本多检测点（常规3,957例+高危 2,790例）,结果LSIL+65%（常规人群）HSIL 59.7%（注）不满意标本 54%,Lee et al.,Obstet Gynecol 1997;90:278-284,注：对HSIL的检出率的统计来自于对10,226例的新柏氏和20,917例的传统涂片的回顾性研究。,新柏氏TCT 2000 系统可以被用来替代传统巴氏涂片方法，对子宫颈癌及各种癌前病变进行筛查。新柏氏TCT能够非常显著的提高对低度及以上病变(LSIL+)的检出率。在十个著名医学机构的多中心回顾性研究中，新柏氏TCT能够提高对高度及以上病变（HSIL+）的检出率达59.7%。新柏氏T
11、CT能够非常显著的提高标本质量。新柏氏TCT的样本细胞能够直接进行进一步的HC 2 HPV DNA测试，及衣原体、淋病测试。,FDA 认证,美国国家癌症研究所（NCI）,方法8,636 例分割样本实验实验人群包括子宫颈癌高发人群（每10万人30例）,Hutchinson et al.,Cancer 1999;V87-2,48-55,结果“经最后的组织活检确认,新柏氏 TCT 检出了100%的癌和92.9%的高度病变（HSIL）。相比之下，传统涂片检出了90.9%的癌和77.8%的HSIL。”,美国Quest 病理诊断中心,方法166,619 例TCT1,985,350 例传统涂片的历史控制数据
12、常规人群结果经活检确认,结果ASCUS/SIL 52%LSIL 140%HSIL 233%,Anjali Limaye,et al.,Feb.2003 in Archives of Pathology and Laboratory Medicine,中国医学科学院肿瘤医院,方法实验人群：中国山西省镶桓县宫颈癌高发区高发人群共有1997例受检者 所有检查均双盲进行,结果“经最后的组织活检确认,新柏氏 TCT 检出了100%（12/12）鳞状细胞癌和93.2%的高度病变（HSIL）。”12,1.中华肿瘤杂志2001年7月第23卷第4期2.Acta Cytol 2003 Jan-Feb;47(1):
13、45-50,首都医科大学附属北京妇产医院,方法妇科检查常规人群，回顾性研究新柏氏14058例，传统13210例420例相关组织活检确认,结果“与组织学符合率：新柏氏 TCT 检出了100%（17/17）鳞状细胞癌、98.86%（87/88）的高度病变（HSIL）和97.44%（228/234）的低度病变（LSIL）。与传统涂片相比：样本不满意率降低了81%，LSIL检出率提高了117%；HSIL提高了25%。”,中华医学会第一次全国宫颈病变学术会议论文汇编,临床应用,全球每年5000万个新柏氏TCT测试美国每年新柏氏测试超过细胞学总测试量的71%，占液基细胞学的96%,已成为妇女保健的新标准美
14、国陆军、海军唯一选用的液基细胞学技术英国卫生部于2003年3月唯一选用的液基细胞学新技术全球3000多家新柏氏TCT诊断中心，遍布美国、加拿大、欧洲及亚洲各国在欧洲：英国、爱尔兰、挪威、瑞典、丹麦、荷兰、比利时、德国、法国、瑞士、希腊、意大利、葡萄牙、西班牙等在澳大利亚、新西兰等国家已全部采用此项技术，做为妇女的防癌筛查工具,全球应用范围最广的液基细胞学技术,临床应用,截至2005年11月底在中国拥有新柏氏TCT的用户为212家,全国已经使用此技术的达到了1000多家.香港政府家计会（FPA）、卫生署（Dept.of Health）病理中心唯一选用的液基细胞学技术中国医科院肿瘤医院与北京协和医
15、院于2000年率先引进，中心覆盖北京近200家医院。广州医学院临床检验中心为广东省700多家医院提供TCT服务上海卫生局2003年3月最先获准临床应用的液基细胞学新技术2004年6月TCT项目已纳入卫生部“十年百项”宫颈癌预防与宫颈病变规范化诊治推广项目,谢谢！,临床取材注意事项,正确填写细胞学申请单(妇科和非妇科）填写应尽量完全，字迹工整 尽可能提供相关的临床信息 细胞学报告应视为医学会诊单,临床取材注意事项,尽量避免短期内（小于三个月）重复取材，以免出现假阴性结果直接观察下进行，保证扫帚状宫颈刷对所取部位有一定的压力，扫帚状宫颈刷的尖端放入颈管内，两边紧贴颈管的外口，以取得足够的细胞成份,
16、取材注意事项,白带过多：先轻轻拭去分泌物，再取上皮细胞 否则，取到大量白带，影响标本质量宫颈重度糜烂：更仍照常取材宫颈口有出血：先做处理等出血量小后，再取材 否则，取到过多的血细胞 取样过程中宫颈出血明显时，应立即停止,取材指南1,采样使用扫帚状采样器从子宫颈上采取 足够数量的样本将扫帚状采样器的中央刷毛部分轻 轻的深插入子宫颈的通道内,以便 较短的刷毛能够完全接触到子宫颈柔和的向前抵住采样器，并按同一 个时针方向转动扫帚状采样器5周整切勿来回转动,取材指南2,漂洗在装有PreservCyt保存液的小瓶内 漂洗扫帚状采样器反复将扫帚状采样器推入保存液瓶 底，使刷毛全部散开，共10次在溶液中快速
17、地转动扫帚状采样器 以进一步的将细胞样本漂洗下来将采样器扔掉不要将采样器的扫帚头遗留在样本保存瓶内,取材指南3,拧紧拧紧瓶盖使瓶盖上的扭短标志线 越过瓶上的扭短标志线,取材指南4,记录将患者的名字和样本号码写在 瓶上空白标签处 将患者的个人资料和病历填写 在细胞学检验申请单上注：申请单填写应尽量完全，字迹工整，尽可能提 供相关的临床信息,取材指南5,存放 将样本保存瓶和检验申请 表装入同一样品袋内以便 送往实验室,TBS报告结果的临床处理,非典型鳞状上皮细胞 ASC,*ASCUS：三至六个月复查*与刺激有关：三至六个月复查*与宫内节育器有关：三至六个月复查*与抹片采取固定不好有关：三至六个月复
18、查*可能有癌前病变，即ASC-H：阴道镜检查、活检或追随*可能有癌存在，但所收取涂片中细胞的异常不够确切诊断：立即阴道镜活检,低度鳞状上皮内病变 LSIL,*LSIL与CIN1术语也与轻度非典型增生含意相一致*LSIL（CIN1）阴道镜活检后由临床处置*如果阴道镜检查结果满意，可随访不予治疗或采取表面破坏术（冷冻、电凝和激光）或切除术（冷刀、激光或LEEP)*可随访不予治疗：第和个月时重复细胞学涂片*如细胞学涂片结果，或高危阳性行阴道镜检查*如两次细胞学涂片结果阴性，或次高危阴性，每年筛查,高度鳞状上皮内病变 HSIL,*HSIL与CIN2和CIN3的含意义一致，亦与中度和重度非典型增生和原位癌含义一致。均需阴道镜活检后临床处置*阴道镜检查结果满意可行宫颈病变表面破坏或切除术，不满意应行病变切除术*治疗后的随访：1.可采用细胞学或细胞学与阴道镜相结合的方法，间隔个月，细胞学涂片的结果，阴道镜检查 2.连续次结果阴性后，每年随访,
