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1、思考：通过课题背景分析，你有何体会？,优点：催化效率高，低耗能，低污染问题：对环境敏感，易失活；难收回，提高了生产成本；反应后酶混在产物中，影响产品的品质设想：将酶固定在不容于水的载体上,优点：酶既能与反应物接触，又容易与反应物分离，可以反复利用问题：一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成是通过一系列的酶促反应才能完成设想：酶是细胞合成的，能否将合成酶的细胞直接固定？,固定化细胞：成本低，操作更容易,酶：,固定化酶：,一、课题目标 1说出固定化酶和固定化细胞的作用和原理。2尝试制备固定化酵母细胞，并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。,思考：1、如何利用固定化酶生产高果糖浆的？
2、,2、有哪些优点？,（一）固定化酶,含淀粉的浆液,糊精,葡萄糖,42%45%转化成果糖,葡萄糖再次异构化,果糖含量70%90%,固定化酶技术生产高果糖浆生产流程,固定化酶的应用实例,3、固定化酶的方式有哪些？,固定化技术的定义固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，方法：包括包埋法、化学结合法(将酶分子或细胞相互结合，或将其结合到载体上)和物理吸附法。,一般来说，酶更适合采用化学结合和物理吸附法固定化，而细胞多采用包埋法固定化。这是因为细胞个大，而酶分子很小；个大的细胞难以被吸附或结合，而个小的酶容易从包埋材料中漏出。,固定酶和细胞各适合采用什么方法？为什么？
3、,（二）固定化细胞技术,直接使用酶、固定化酶与固定化细胞各有什么优缺点？,课堂讨论：,1从操作角度来考虑，你认为固定化酶技术与固定化细胞技术哪一种方法更容易？哪一种方法对酶活性的影响更小？2固定化细胞固定的是一种酶还是一系列酶？3如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶反应，应该选择哪种方法？4如果反应物是大分子物质，又应该选择哪种方法？,固定化细胞技术,固定化细胞固定的是一系列酶,固定化细胞技术,固定化酶技术,实验操作,（一）制备固定化酵母细胞,阅读P5051思考下列问题：（1）、制备过程包括哪几个步骤？（2）、你认为哪个步骤的操作是最重要的一环？（3）、各步骤应当分别注意什么问题？,1酵母细胞
4、的活化2配制物质的量浓度为0.05 molL的CaCl2溶液 3配制海藻酸钠溶液 4海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 5固定化酵母细胞,在缺水的状态下，微生物会处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态。酵母细胞所需要的活化时间较短，一般需要0.51 h，教师需要提前做好准备。此外，酵母细胞活化时体积会变大，因此活化前应该选择体积足够大的容器，以避免酵母细胞的活化液溢出容器外。,思考：CaCl2溶液有什么作用？,酵母细胞的活化,3配制海藻酸钠溶液,思考：配制的海藻酸钠溶液具体作用是什么？在加热的过程中，为什么要用小火，或者间断加热？,包埋酶或细胞,防止焦糊,4海藻酸钠溶液与酵
5、母细胞混合5固定化酵母细胞,思考：为什么刚形成的凝胶珠要在CaCl2溶液中浸泡30min左右？如何检验凝胶珠的质量是否合格？,形成稳定的凝胶珠,说明：刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以便形成稳定的结构。检验凝胶珠的质量是否合格，可以使用下列方法。一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠的制作成功。二是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果凝胶珠很容易弹起，也能表明制备的凝胶珠是成功的。,（二）用固定化酵母细胞发酵问题思考：发酵时为什么要将温度控制在25？,四实验操作结果分析与评价,1观察凝胶珠的颜色和形状问题思考：如果制作的凝胶珠颜
6、色过浅、呈白色，则说明什么？如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明什么？,如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。,2观察发酵的葡萄糖溶液问题思考：当观察到哪些现象时，可说明实验获得成功？为什么？,利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可以看到产生了很多气泡，同时会闻到酒味。,3、固定化酶和固定化细胞技术有哪些？各有什么优缺点？固定化细胞常用的载体有哪些？,有包埋法、化学结合法和物理吸附法。固定化酶分子小更适合采用化学结合法和物理吸附法，用包埋法却容易从包埋材料中漏出。固定
7、化细胞因细胞大不易被吸附或结合适宜采用包埋法。常用载体：明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等。,4、固定化酶和固定化细胞的原理是什么？,就是将酶固定在不溶于水的载体上，或者将微生物细胞均匀地包埋于不溶于水的多孔性载体上，使酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以被反复利用的技术。,巩固练习,1、酶固定化技术与细胞固定化技术的关系是A 酶固定化技术是细胞固定化技术的基础B 细胞固定化技术是酶固定化技术的基础C 酶固定化技术与细胞固定化技术是同时发展起来的D 固定化细胞技术先于酶固定化技术,2、固定化酶技术常采用A 包埋法 B 化学结合和物理吸附法C 活化法 D 微囊化法3、海藻酸钠在水中溶解的速度较慢，需要经过加热促进其溶解，采用的最好加热方法是A 快速加热 B 持续高温加热C 小火间断加热 D 灼烧加热,4、酵母菌的活化是指A 让酵母细胞恢复运动状态B 让酵母细胞在缺水状态下更容易休眠C 让酵母细胞内酶活性加倍D 让处于休眠状态的酵母细胞重新恢复正常的生活状态,5、细胞固定化技术与酶固定化技术相比，所具备的特点是A 成本更低、操作更容易、不能连续性生产B 成本更高、操作更难、不能连续性生产C 成本更低、操作更容易、能连续性生产D 成本更低、操作更难、能连续性生产,
