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1、生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室,1.实验目的,熟悉显微镜的工作原理及使用方法。了解显微镜下细胞和细胞器形态结构。初步掌握临时制片的方法。,生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室,2.实验原理,细胞的一般结构显微镜的工作原理及使用方法光学显微镜标本的制备光学显微镜标本染色,生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室,2.1 细胞的基本形态,动 物 细 胞,生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室,通常把在光镜下所见到的结构称为显微结构(microscopic structure)，电镜下所见到的微细结构则被称为亚显微结构(submicroscopic structure)或超微结构(u
2、ltramicroscopic structure)。,生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室,2.2 显微镜的工作原理及使用方法,显微镜的构造,1.镜座 2.镜柱 3.倾斜关节 4.镜臂 5.粗调节轮 6.细调节轮 7 镜筒 8.接目镜,9.转换盘 10.油接物镜 11.低倍接物镜 12.高倍接物镜 13.载物台 14.光圈盘 15.压夹 16.反光镜,生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室,显微镜的成像的一般原理,显微镜的放大作用是由物镜和目镜共同完成的。标本经物镜放大后，在目镜的焦平面上形成一个倒立的实像，再经目镜的进一步放大形成一个虚像，被人的眼睛所观察到。一般光学显微镜最大分辨率
3、为0.2m。,生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室,显微镜的类型,生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室,1）观察前的准备：调节光亮度调节钮、调节虹彩光圈的大小，使视野内的光线均匀、亮度适宜。2）显微观察：低倍镜观察：调焦时只应降载物台，以免一时的误操作而损坏镜头；双眼同时睁开观察。高倍镜观察 油浸镜观察 3）显微镜的维护：用擦镜纸蘸少许二甲苯擦去镜头上残留的油迹，最后再用干净的擦镜纸擦去残留的二甲苯。将各部分还原，将物镜转成“八”字形，同时把聚光镜降下，以免物镜和聚光镜发生碰撞危险。,光学显微镜的使用方法,生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室,2.3 光学显微镜标本的制备,临时装片
4、法：涂片法 铺片法 压片法 整装片法等徒手切片法：,生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室,加盖破片的正确方法1.载破片 2.盖玻片 3.镊子 4.切片 5.水滴,切片制标本示意图,徒手切片时最重要的是切下一小片平而薄的组织，而并不要求切下一个完整的切片。,生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室,2.4 光学显微镜标本染色,苏木精(hematoxylin)是染细胞核的优秀染料。伊红(eosin)是细胞质染料。Giemsa是一种复合染料，含有天青、伊红等，适用于多种细胞的染色质（体）染色。,生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室,3.实验材料、用品,实验材料：马铃薯块茎、番茄、芹菜茎、菠菜
5、及一些生物标本的永久涂片、切片等。用品：仪器：光学显微镜。试剂：碘液。其他 载玻片、盖玻片、吸管、镊子，吸水纸，培养皿，擦镜纸、双面刀片。,生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室,4.实验步骤,通过观察一些生物标本的永久涂片、切片等熟悉显微镜的使用。利用徒手切片、临时装片等方法制作马铃薯块茎、番茄果肉及表皮、菠菜叶片细胞及芹菜茎横切的标本。可滴加碘液观察马铃薯块茎细胞。观察与绘图。绘制芹菜茎横切及自制的任一植物细胞标本的形态结构。,生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室,5.实验结果,除了观察细胞的一般结构，还应注意：马铃薯块茎细胞：注意淀粉粒观察；番茄注意有色体的观察；菠菜注意叶绿体、气孔的观察；芹菜横切可观察到维管束等结构。,生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室,注意教师强调的显微镜使用中的注意事项，保护仪器。观察中除了对细胞基本形态结构的观察外，还要注重这些新鲜材料的制作标本的各自不同特点。样品制备时，应防止产生气泡。,6.注意事项,生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室,7.思考题,制作切片标本及显微镜观察时的注意事项有哪些？,
