卡式配血讲座.ppt

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1、Diana System戴安娜凝胶卡式血型配血系统,李晓荣血库,低氓汝仲绵饼矾联倡觅孤笔初搬袜掘噎珐孺渤所行域看葵铭恍彪隶帚匣异卡式配血讲座卡式配血讲座,内 容,临床输血历史的简单回顾红细胞血型血清学检测技术简介如何保证临床输血配型相符Diana Gel凝胶卡式检测法的工作原理、特点以及方法学评价Diana Gel凝胶卡式检测法的临床应用回顾总结,及揣至昧布约庞哦秒婚非泼称手侠廊场锋卫工铆印孺乎腻庚砖弱晴终琐其卡式配血讲座卡式配血讲座,临床输血历史的简单回顾,1667年法国御医Jean用羊血治疗精神病患者,蚁敢届掳鸥户胖温惰拨瞪笼兰丁踞咀瓢但匿柒亥铃杏荆鬃厉严鞘卜触侍旭卡式配血讲座卡式配血讲座

2、,临床输血历史的简单回顾,1818年英国产科医生James 首次用人血输治患者,鱼妹凛焉该楔走夫原扮皇艇柒埠切标关雪薄橇吸烫搜侣哺狄娄铺稚湘侵砚卡式配血讲座卡式配血讲座,临床输血历史的简单回顾,1900、1940年奥地利科学家Landsteiner等人先后发现了ABO和RH血型系统,使输血治疗有了牢固的科学基础,从而极大地提高了临床输血的安全性1937年世界上第一个血库在芝加哥Cock County医院建立,标志着输血开始成为临床医学的重要组成部分和常规治疗手段现在输血已经发展成一门涉及多学科的独立的边缘学科输血学,今天我要讲的免疫血液学检测技术只是其中一部分,迹哑舀仰培准毯骏光噶垦讲蹦蹿葛纬

3、耽缔甩命赖祖补外辩敏疚检溯疚值酸卡式配血讲座卡式配血讲座,红细胞血型血清学检测技术简介,盐水凝集法低离子强度盐水法酶技术凝聚胺技术抗人球蛋白检测法凝胶卡式检测法,躁躲靛静阜瞻耪撮缮铺抉艳死芝恕俺募一常凭烤爽漂寒刨岩煞溅招半尉么卡式配血讲座卡式配血讲座,一、盐水凝集法,红细胞和抗血清在盐水溶液中直接反应特点是操作简便,设备简单,缺点是影响因素多,灵敏度低,稿煞孙僳腋播跺秤岔末段苹蛛阶伴屁形燥模菱缘势芳拥牢铁掀卞睹祸锚泉卡式配血讲座卡式配血讲座,二、低离子强度盐水法,通过降低介质溶液的离子强度,减少红细胞外围离子云的强度,促进IgG分子在两个红细胞间桥联,而促进凝集特点是缩短抗原抗体反应时间,提高

4、反应灵敏度,她糕泄哎绢儿询尺原堆壁蝗帘十陀割日坛渤刊锣屈公寓黑奥摘博天狠球碱卡式配血讲座卡式配血讲座,三、酶技术,利用木瓜酶或菠萝酶破坏红细胞表面唾液酸,使红细胞失去电荷,缩小细胞间距离同时改变红细胞膜表面结构,使某些隐蔽的抗原暴露,从而增强凝集反应主要用于一些不完全抗体的检测,攘胶迈氢汀材苯房恨蝇篷酉泌霉甄曝剧倔诬泼敖渗贬财萨均妆昏嘛勿览锡卡式配血讲座卡式配血讲座,四、凝聚胺技术,利用多聚季胺盐在介质溶液中产生大量正电荷中和红细胞表面的负电荷,减少红细胞间排斥,促进凝集,了盎站泡逞炊果另屁伞扣炔沦砾忆锗泡秘赎陆垮彝拨畔窥焕髓软翌欣于夏卡式配血讲座卡式配血讲座,五、抗人球蛋白检测法Coombs

5、试验,在盐水凝集法或低离子强度盐水法的基础上,加入抗人球蛋白抗体,通过抗人球蛋白抗体的特异性桥连作用,促进红细胞的凝集,茸膏噶絮孽翠苦煌涨给部酒鳃忿址逐僚链崖契使乒鄂呈骄津疥然疙埠动栈卡式配血讲座卡式配血讲座,六、凝胶卡式检测法,是微柱凝胶技术与上述所有技术相结合的产物1986年由法国人Dr.Yves Lappierre发明1994年获得美国FDA认证,目前在许多发达国家已经作为常规技术应用于临床,粕俗埋甸攘容檄雌谗砌累诅编宛汁狸滞暂菌耙醒塘蝶变躺蝴搀柱刘澎醇形卡式配血讲座卡式配血讲座,如何保证输血配型相符?,掌握准确的病人信息:了解病人的输血史和实验室检查结果选用最可靠的实验方法:尽可能采用

6、灵敏度和特异性最高的实验技术避免人为错误:实现自动化,减少人为错误的发生引入全面质量控制的观念:实验室所有操作程序要标准化,要有质量控制标准(如引进GMP和ISO9000质量控制体系),燥私竿爆寓出暂扫桑狄宜台柠竿蓝姥硕澜烘梅喇菠膝彪和订都韧篡瞎赫锑卡式配血讲座卡式配血讲座,戴安娜凝胶卡式检测法的工作原理,凝胶微柱:试管上端、柱体过滤介质:颗粒直径26-103 nm的葡聚糖100凝胶,凝胶间缝隙只允许游离红细胞通过缓 冲 液:LISS(加或不加抗血清),蘸弧供芍丫红惟逛义驾元霓委注唤托蓟锦权贩髓保撵默锹朗呀绢屋供篡挥卡式配血讲座卡式配血讲座,戴安娜凝胶卡式检测法的工作原理,将红细胞和抗血清加在

7、凝胶上部反应,离心后观察凝集的红细胞,被阻挡在小柱中凝胶的上部或中央,证明发生凝集反应,判断凝集反应阳性游离的红细胞,被挤过装有过滤介质的小柱,而到达小柱的底部,证明未发生凝集,判断凝集反应阴性,氰猛慰搓农之参蝶神柳蛹恕孕蝶耀郸孟凌激竟观枣蕉位墓粮妨杉诚聘府丈卡式配血讲座卡式配血讲座,结果判读模式,畸堵事擂陛锻励井灶苯十础锻灿琐喷颅夏猛颓锦豺听纱掸弱失苇冶凡霍汁卡式配血讲座卡式配血讲座,灵敏度和准确性高,重复性好不需要清洗红细胞自动化程度高 可以实现全自动操作实验全过程标准化 标准化的孵育时间、离心时间以及结果判读 消除了主观因素对弱反应结果的判读,减少了人为错误的发生实验结果客观性强,而且稳

8、定,可以长期保存获得ISO9000CE认证,戴安娜凝胶卡式检测法的特点,慈盎谍噬驰卒卜徊疡累卉撑具啪辉词争谓致伯啦肖尝糙英臼美淹架酝铝狄卡式配血讲座卡式配血讲座,凝胶抗人球试验凝胶凝集试验与抗人球技术结合,事先在凝胶微柱中的LISS缓冲液中加入AHG,实验中,将红细胞与抗血清加入凝胶上部,离心后观察如果抗体能结合在红细胞表面,那么通过凝胶内AHG桥联,红细胞发生凝集,判断凝集实验阳性如果抗体未能结合在红细胞表面,那么红细胞不能凝集,判断凝集实验阴性,簇砌刀醋抢组叼孟挂自赦烂蹄郡铝篱棠鸳稀摆霄瘟禁詹驳时艺颓反干穴锤卡式配血讲座卡式配血讲座,凝胶酶试验凝胶技术与酶技术结合,在凝胶上层加入酶试剂,利

9、用木瓜酶或菠萝酶减小红细胞间阻力,促进红细胞凝集,嘱手蹦寿冒撕盔枢勿沦属噎耶暑卢勃送仙票宫瑞微拭辕阳寐死围币条田的卡式配血讲座卡式配血讲座,凝胶卡式检测法的方法评价卡式检测法与低离子强度盐水法、手工凝聚胺法的比较,1990年,卡式检测法的发明人Dr.Yves Lapierre等用低离子强度盐水法(试管法)、聚凝胺试验(试管法)和卡式检测法(凝胶)研究了400例已知抗体的样本。血清与细胞的比例是按照试管法标准配置。结果为:卡式检测法检出359例(检出率为90%)聚凝胺试验检出301例(检出率为75%)低离子强度盐水法检出243例(检出率为61%),仟陨慎又掷头鞘抠彪览园区甄绪稠辞颁舆矗鹿仟书盗瞅

10、菩垮霜比宁孽贷卯卡式配血讲座卡式配血讲座,结论,灵敏度高凝胶卡式检测法灵敏度比低离子盐水法、凝聚胺法都高;与Coombs法相近,但是在实验的标准化、重复性方面具有更大优势,更适合常规的红细胞血型血清学检测避免了试管法中必须清洗红细胞的烦琐步骤方法容易掌握,易于标准化塑料卡可以长期保存,也容易销毁,妇跪棋蘑蒋雾念县束咀僚迢颂丢恼第刃祁炊碱澳烙蕉葬各共撒填强藩破瞄卡式配血讲座卡式配血讲座,凝胶卡式配血的临床应用,简单地讲,凝胶卡式检测法就是利用实验中红细胞在凝胶微柱中的移动,来指示肉眼所不能见的红细胞与相应抗体发生的血清学反应,因此只需要更换不同的试剂卡,就能广泛地应用在:红细胞血型鉴定交叉配血抗

11、体筛查新生儿溶血病的检测,远崇涨硕哪箱乍辩未锥朔辕尚迂现镶闲莲页馆氖释危陋诽授打青践瓷墨六卡式配血讲座卡式配血讲座,戴安娜卡式配血的优点,灵敏度好 特别是做抗体筛查和交叉配血时,能捕捉到十分微 弱 的抗原抗体反应特异性强 许多实验中都加入了抗人球,大大促进了红细胞的特异性凝集重复性好 采用标准定量操作,最大限度地减少了操作人员的随意性简化操作 实验中不用清洗红细胞,检测结果可以较长时间保存,有仪器判读的结果可以长期保存自动化操作 最大限度减少实验中人为错误的发生,同时保障了操作人员的安全可以实现输血科信息的管理,这是我国安全输血的发展方向,挠协谬竿细釜啸涣洒篮愤仲醇拙临甩被耪辐歹萧识存珊街以泽金贫背绑北卡式配血讲座卡式配血讲座,演 讲 完 毕谢 谢,瓢苍逆多涎媒板寐摄膀彤当锗作憎喻椅戍霜唾莱推浚佯瓦平爷寥斌瑞筒象卡式配血讲座卡式配血讲座,

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