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1、自身免疫性溶血性贫血 输血前试验 若干疑难问题,一.输血科:对AIHA的输血试验深感棘手二,第一难题 ABO正,反定型不合,怎么办?三,第二难题 抗体筛查 受干扰,怎么办?四,第三难题 总是配不上血,怎么办?五,AIHA的学术研讨与自 我保护,一.输血科对 AIHA 的输血试验 深感棘手,自免贫(自身免疫性溶血性贫血,AIHA)发病率:2.6/10 万人.年 病程:AIHA 46-64%2年 AIHA住院期间一般都需要反复多次输血,二,AIHA输血试验第一个难题 ABO正,反定型不合,(一)AIHA的特点 1.体内有自身抗体 2.自身抗体不但凝集自身红细胞 而且 凝集所有人的红细胞 3.自身抗
2、体分三种:(1)温抗体(IgG,37C最活跃)(2)冷抗体(IgM,20C以下最活跃)(3)冷-热抗体(D-L抗体)4.自身抗体存在形式有二种(1)粘在红细胞上:直抗+(2)游离在血清中:间抗+,(二)AIHA为什么会发生ABO正,反定型不合?1.自身抗体会干扰ABO正定型(1)病人的红细胞包被了 自身抗体 在非盐水介质中可能发生非特异性凝集,(2)如果病人血清中有冷自身抗 体 温度降低,凝集病人自身红细胞 导致ABO正定型错误,2.自身抗体会干扰ABO反定型 如果病人间抗(+)冷自身抗体,在盐水介质中 可以非特异性凝集ABO 反定型红细胞 导致ABO反定型错误,(三)ABO正,反定型不合,怎
3、么办?1.常规输血:采用特殊技术,排除自身抗体干扰 法(1)ABO正定型 三种办法,先去除病人红细胞上自身抗体,再定型 保温法 洗涤法,放散法 5%二磷酸氯奎法，甘氨酸法,45C热放散法，.放散至病人红细胞直抗(-),再作正定型,ABO反定型 间抗(-)者 反定型不受干扰 间抗(+)者 用随机OC吸收病人血清中自身抗体,至间抗(-);再作反定型,三,AIHA输血试验第二难题 抗体筛查 受干扰,(一)AIHA,如果间抗(-)病人血清中无游离的自身抗体,按常规方法作抗筛(二)AIHA,如果间抗(+)病人血清中有游离的自身抗体,不管血清中有没有不规则抗体:抗筛细胞都会凝集;,间抗(+)病人的血清:必
4、须经过处理,先去除自身抗体以后,才能作抗筛,(三)间抗(+)病人血清,抗筛前除去自身抗体的四个办法 1.病人自身红细胞吸收法 放散 血清 不规则抗体 直抗+直抗-自身抗体 放散 直抗+直抗-反复 直抗-,2.同种红细胞 吸收法(1)采用献血员红细胞 吸收,方法同自身红细胞吸收(2)优点:吸收材料丰富,3.稀释法(1)把病人血清稀释,直到自身抗体消失(效价0),血清中留下不规则抗体,作抗筛(2)优点:操作容易(3)局限性:只适用于不规则抗体比自身抗体效价高的样本,4.保温法(1)实验全部过程在37C 进行(2)优点:理论上操作简单(3)局限性:冷抗体有一定效果,温抗体无效,四,AIHA输血试验第
5、三个难题 总是配不上血,(一)首先明确两个概念 1.AIHA用常规方法永远配不上血(1)次侧配血:用常规方法是永远配不上血的!(2)主侧配血:AIHA病人中,间抗(+)者大约占50%用常规方法,大约占50%病人永远配不上血的!,2.主侧 配血和抗筛,在理论上是一回 事;自身抗体对主侧配血干扰,与对抗筛干扰原理一样 因此,从理论上说,解决主侧配血的办法和抗筛一样,(二)AIHA,直抗(+),间抗(-)者,怎么配血?1.病人血清中没有游离的自身抗体(1)不干扰主侧配血(2)但因病人直抗(+),次侧配血总是不合!2.次侧配血总是不合,输血怎么办?选择规范规定不作次侧配血的血成份,(三)AIHA,直抗
6、(+),间抗(+)者(占50%),怎么配血?1.次侧配血:只有选择规范规定不作次侧配血的血成份 2.主侧配血:主侧配血总会凝集,3.间抗(+)AIHA:必须先去除病人血中的自身抗体,再作主侧配血 有六种方法去除病人血中的自身抗体(1)自身红细胞吸收法(AABB技术手册)(2)献血员红细胞吸收法(AABB技术手册)(3)病人血清稀释法(AABB技术手册),(4)与自身对照比较法 病人血清+自身RBC 2+病人血清+张三RBC 3+病人血清+李四RBC 3+病人血清+王五RBC 2+选王五血输,AABB.Technical Manual.16ed,2008 CHAPTER 17 Positive
7、DAT and Immune-Mediated Hemolysis-507If the patient who has warm-reactive autoantibodies in the serum needs transfusion,it is important to determine if alloantibodies are also present.Some alloantibodies may make their presence known by reacting more strongly or at different phases than the autoanti
8、body,but,quite often,studies may not suggest the existence of masked alloantibodies,(5)单采血浆法(6)保温法,4.到目前,直抗(+),间抗(+)AIHA:(1)次侧配血:没法!(2)主侧配血:只有上面6种方法,(四)AIHA 输血前试,DNA技术有用吗?1.DNA只对血型鉴定:有一定“辅助作用”,或“参考价值”2.DNA技术,只查基因,”推导”抗原,不检查抗体 抗筛和配血是抗体问题,(五)AIHA配血中应该注意的其它问题 1.AIHA,1/3病人有不规则抗体,不要漏检!A A B B Technical M
9、anual，16ed.2008,510There are multiple reports in the literature demonstrating that patients who have warm autoantibodies in their sera have a higher rate of alloimmunization(eg,12%to 40%,with a mean of 32%),2.自身抗体血型特异性不要漏检 部分AIHA血清中的自身抗体,具有血型特异性，如果输具有“某种Rh 抗原的红细胞”容易发生 无效输血,(六)AIHA,直抗(+),间抗(+),配血有意义吗
10、?AABB.Technical Manual.16ed.2008,510 Other laboratories do not perform a crossmatch with the adsorbed serum because all units will be incompatible in vivo due to the autoantibody,间抗(+)的AIHA:常规 配血肯定不合 要么发出配血无凝集的假报告，要么发出配血有凝集的真报告，,采用吸收方法,去除病人血中的自身抗体干扰以后,主侧配血,不是就可以相合了吗?把试管血样中的自身抗体吸收后配血相合并没有吸收掉病人体内的自身抗体
11、 供者的红细胞输进病人体内,仍然不合,(七)如果间抗(+),主侧配血不合，能输血吗?1.理论上:主侧配血不相合,不能输血!2,学术上分析:(1)单纯自身抗体导致配血不相合，可以输血,(2)如果被自身抗体掩盖的同种抗体漏检，则可能发生严重输血反应，AIHA病人,抗筛比配血更重要!一般病人:配 血第一,血型第二,抗筛第三 AIHA则是:抗筛第一,血型第二,配血第三,五,AIHA的学术研讨 与自我保护,(一)今天对AIHA输血试验若干疑难问题,是纯粹作学术研讨 如果某个说法与某个政府文件矛盾,临床输血实践中,完全按政府文件操作,不要问为什么!,(二)输血科遇到AIHA,血型鉴定,抗筛,配血困难重重
12、1.政策不明确 2.专家无统一意见,(三)输血前试验中,下面这些棘手问题1.AIHA ABO 正,反定型不合 采用什么规范化程序鉴定?抢救输血,如果血型一时定不出来,可不可以先不报告病人是什么血型,先按“配合性输血”的原则抢救?,2.输某些红细胞要作交叉配血,AIHA,直抗(+)者,次测肯定配不上血;怎么办?AIHA 间抗(+)者,用特殊技术作主侧配血,;如果耽误了抢救,怎么办?如果选择配血凝集比自身对照弱的血输,有没有风险?,(五)AIHA输血前试验需要研究的问题 1,快速、可靠的ABO血型鉴定技术或工具。例如,研制从病房采血至血样送到实验室完成ABO定型全过程的控温系统或设备;降低IgG自
13、身抗体致敏的红细胞在ABO定型血清中非特异性凝集的技术;几种放散方法的改良以进一步减少红细胞的丢失和缩短操作时间,等等。2,研究一种只吸收自身抗体,不吸收不规则抗体或血型抗体的生物材料或技术,或封闭献血员红细胞主要血型抗原(如Rh-D、C、c、E、e,Fya,Jka)而不封闭自身抗原的生物材料或技术。,3,AIHA输血前试验的规范化流程,例如,AIHA患者紧急抢救输血时,ABO正、反定型不 一致,怎么办?必须作抗体筛查吗?没有条件作自身抗体吸收怎么办?间抗(+)者,主侧配血 到底采用那种方法才是规范操作?,谢谢 兰炯采 南方医科大学,南方医院 510515广州大道北 020-61641342 洛阳市中心血站 0379-63563932,
