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1、液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍,资料收集：,窄肯搂拭狄席辕藩警菏裁卞控陕迂梅柠磅溪刁檬援儒倚铁乳凳分崔打辆掠液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍,生化 多肽-5988-6316EN升温对于反相 HPLC分离强疏水肽的影响(B27)Polypeptide,流动相:A:含0.05%三氟乙酸的水B:含0.05%三氟乙酸的乙腈2%B/min进样量:100L(50g的6M脲/5%乙酸)UV:210 nm流速:1 mL/min室温,液相色谱柱:ZORBAX StableBond-C18色谱柱尺寸:4.6 x 250 mm 5m,室温300C400C500C600C700C,提
2、高柱温，可增加柱效（提高灵敏度）,裁衍妨婴刁蔽庸对耶欠箍淘扑锋桐硷肩驳风户返疙邻皖际湖号替苫叉懂激液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍,环保,样品:除草剂流动相:52/48 0.1 M乙酸钠/甲醇,pH 6流速:0.45 mL/min温度:40,90检测:UV,除草剂:柱温的影响Herbicides:Effect of Column Temperature,1.西玛津2.敌草隆3.扑灭津4.扑灭净5.异丙甲草胺,1.Simazine2.Diuron3.Propazine4.Prometryn5.etolachlor,液相色谱柱:Zorbax StableBond-C
3、18色谱柱尺寸:4.6 x 150 mm,5m,40,90,提高柱温，可增加柱效（提高灵敏度）,撇翻给粳乙菠傣贷搪良芯气本泅嗽预园构邻饶朝垫洁儒藩表挞阜雀臭咎辆液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍,生物制药,液相色谱柱:Zorbax 300 StableBond-C3色谱柱尺寸:4.6 x 150 mm,5m,肽类/蛋白质:升温对分离的影响Peptides/Proteins:Effect of Elevated Temperature,样品:多肽 流动相:A=5:95,乙腈:水,0.10%三氟乙酸(V/V%)B=95:5,乙腈:水,0.085%三氟乙酸(V/V%)梯
4、度:在 20 min内 15-53%,后运行时间 12 min流速:l.0 mL/min 温度:室温-60检测:UV 215 nm,1.亮氨酸脑啡呔 2.血管紧张素II 3.核糖核酸酶A 4.牛胰岛素 5.细胞色素C 6.溶菌酶 7.肌红蛋白 8.碳酸酐酶,1.Leucine Enkephalin2.Angiotensin II3.Rnase A4.Insulin(BOV)5.Cytochrome C6.Lysozyme7.Myoglobin8.Carbonic anhydrase,提高柱温，可增加柱效（提高灵敏度）,娶代署弄挺高额让损拓莫紧铡刹佩佰田唇七怖气侈姓搽射费惋涎朔斑噶啤液相增加柱效
5、、提高灵敏度的小诀窍液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍,生物制药,液相色谱柱:Zorbax StableBond-C8色谱柱尺寸:150 mm,5m,减小毛细管内径来提高低浓度样品的检测灵敏度Reducing Capillary ID to Improve Sensitivityfor Concentration-Limited Samples,流动相:60%乙腈/40%水流速:内径 0.3 mm-4 uL/min内径 0.5 mm-10 uL/min内径 1.0 mm-50 uL/min内径 4.6 mm-1.0 uL/min温度:室温检测器:UV 254 nm样品:200 ng联二苯(100
6、 nl),减小柱径，可增加柱效（提高灵敏度）,必樟碳校吓弊班撑震彭判郁辟染是档晶榷儒沉影屠械芒钝吐需糜甩吉诵棵液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍,色谱柱技术 5988-6454EN使用小体积色谱柱对于检测器响应时间的重要性(TE32),液相色谱柱:ZORBAX StableBond-C18色谱柱尺寸:4.6 x 15 mm 3.5m,流动相:乙腈:1%甲酸=32:68UV:254 nm流速:1.0 mL/min.30C进样量:5 L,响应时间:4.0秒响应时间:2.0秒响应时间:1.0秒响应时间:0.5秒响应时间:0.1秒,1.尿嘧啶2.乙酰水杨酸3.N-乙酰苯胺
7、,1.Uracil2.Acetylsalicylic acid3.Acetanilide,缩短检测器响应时间，可增加柱效（提高灵敏度）,红国柴洗尾月卧岔簇叮岁镭千脑俐逝厦场籽纸岩熔熏委滋专搅送寇君蕉翔液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍,色谱柱技术：不同硅胶类型比较(TE1),流动相:含0.05%甲醇的二氯甲烷,液相色谱柱,toluenebenzanilidephenolbenzyl alcohol,Zorbax SilSpherisorbZorbax Rx-Sil,甲苯N-苯甲酰苯胺苯酚苯甲醇,使用高纯硅胶，可增加柱效（提高灵敏度）,囊破娄阎神矾逢瓮寄器白笔速攘伏
8、舟宛唇颇锁嗜孪队悔郁塌黍矽矛恬挛哭液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍,有机化学 5988-6366ENpH对苯胺取代物分析的影响(ORCH1),流动相25mM磷酸:甲醇=58:42 流速:1 mL/min 22C,液相色谱柱:ZORBAX StableBond-C18色谱柱尺寸:4.6 x 150 mm 5m,对位甲氧基苯胺间位苯甲胺3-氨基-苯甲腈对位氯苯胺间位氯苯胺邻位氯苯胺,pH:2.5pH:7.0,改变流动相pH，可增加柱效（提高灵敏度）,诱晾耸曾僳贺翟寒件陆虎镇嘲惺暑帽彪融贷丈昼亥劝轩炎扑癌掘日貉晌或液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍液相增加柱效、提高灵敏
9、度的小诀窍,生化 肽 5988-6293EN三氟乙酸浓度对于反相肽的分离的影响(B10)Peptide,流动相:A:水和三氟乙酸B:乙腈和三氟乙酸0-30%B（30 min.内）流速:1 mL/minUV:254 nm进样量:6uL十肽菌素标样S1-S5（疏水性有略微差异）40C,液相色谱柱:ZORBAX 300 SB-C8色谱柱尺寸:4.6 x 150 mm 5m,1.0%三氟乙酸,0.05%三氟乙酸,0.25%三氟乙酸,改变流动相pH，可增加柱效（提高灵敏度）,旦瓶者绷玻接王瑚倔千海耳伶籽倘形缕匝任妆糯魁晤翠伎剁哟乾召猿饰奢液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍,
10、食品分析 5988-6360EN流动相强度对单糖和二糖分离的影响(FD4),流动相:乙腈/水如图流速:1 mL/min示差折光检测器,液相色谱柱:ZORBAX NH2 色谱柱尺寸:4.6 x 250 mm 5m,果糖葡糖蔗糖Palatinose海藻糖异麦芽糖,乙腈/水70/30乙腈/水75/25,改变有机相%，可增加柱效（提高灵敏度）,葛擦足简忧魔杀焚苫鼓害呛虚洽庆摩奇析伍陶敖彝艘描澜婆构堪闺诺都花液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍,色谱柱技术 5988-6468EN有机改性剂和pH对于选择性的影响(TE5),流动相:25 mM磷酸缓冲液流速:1.0 mL/min
11、.22C,液相色谱柱:ZORBAX StableBond-CN色谱柱尺寸:4.6 x 150 mm 5m,anisidinem-toluidine4-cl-aniline3-aminobenzonitrile3-cl-aniline2-cl-aniline,甲氧基苯胺间位苯甲胺4-氯-苯胺3-氨基苯甲腈3-氯-苯胺2-氯-苯胺,42%甲醇：58%缓冲液 30%甲醇：70%缓冲液,pH 2.6,pH 3.0,改变有机相%，可增加柱效（提高灵敏度）,犹聂阑疡漆菌番腔伙然弓屑劫墅瓜梨瓣堑百浆落性允脂父湛塔议纱彭闰圈液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍,色谱柱技术 5988
12、-6453ENZORBAX Eclipse系列色谱柱的选择性(TE31),液相色谱柱:ZORBAX Eclipse XDB-Phenyl色谱柱尺寸:4.6 x 150 mm 5m,流动相:甲醇:水=70:30UV:254 nm流速:1.0 mL/min.室温,Zorbax Eclipse XDB-苯基Zorbax Eclipse XDB-C8Zorbax Eclipse XDB-C18,1.尿嘧啶2.苯酚3.4-氯-硝基苯4.甲苯5.萘,1.Uracil2.Phenol3.4-Cl-nitrobenzene4.Toluene5.Naphthalene,改变键合相，可增加柱效（提高灵敏度）,悔杖
13、琶横孟行己况稍锡屁并皂庆灿秘磋杭恼起追驯读旅演法窜么器面咸生液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍,生物制药,液相色谱柱:Zorbax Extend-C18色谱柱尺寸:2.1 x 150 mm,5um,三氟乙酸和氢氧化铵用于肽类RP-HPLCESI-MS分离的选择性比较Selectivity Comparison of TFA and NH4OH for Peptide RP-HPLCESI-MS Analysis,流速:0.25 mL/min.温度:25 梯度:5-60%B in 20 min.LC/MS:正离子,ESI-Vf 70V,Vcap 4.5 kV,N2-
14、35 psi,12 L/min.,300样品:4L(各50 ng),三氟乙酸条件:A-0.1%三氟乙酸水溶液B-0.085%三氟乙酸 80%的乙腈溶液,NH4OH条件:A-20 mM NH4OH水溶液B-20 mM NH4OH 80%的乙腈溶液,改变有机添加剂，可增加柱效（提高灵敏度）,胺涝癌困主准贵阎镜着角峦害妥诧惨若辐睁惧公闯刹粥谗恐玫蓉硒基绢碍液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍,生化 肽 十肽菌素 5988-6299EN酸对于反相肽的分离的影响(B16)decapeptide,液相色谱柱:ZORBAX 300 SB-C8 色谱柱尺寸:4.6 x 150 mm
15、 5m,十肽菌素 S1十肽菌素 S2十肽菌素 S3十肽菌素 S4十肽菌素 S5,decapeptide S1 decapeptide S2 decapeptide S3 decapeptide S4 decapeptide S5,0.1%三氟乙酸,0.025 M H3PO4,改变有机添加剂可增加柱效（提高灵敏度）,流动相:A:含相应的酸的水相 B:含相应的酸的乙腈 0%-30%B（30 min.内）进样量:6L肽标样UV:254 nm流速:1 mL/min40C,姨肆迢仁腋范己穴厂沫廖财回盯扇壳袋桨密织践潭蹦晃炒一俭四兰搏唾惺液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍,色
16、谱柱技术 流动相对色谱的影响(TE40),液相色谱柱:ZORBAX Eclipse XDB-C8色谱柱尺寸:4.6 x 50 mm 3.5m,UV:254 nm流速:1 mL/min.室温,UracilButylparabenNaphthaleneDipropylphthalateAcenaphthene,尿嘧啶尼帕尔金丁酯萘二丙基邻苯二甲酸酯苊,刻度混合:Dial-a-Mix A:水 B:甲醇,用泵抽取50%B,体积比混合:Vol/Vol250 mL水+250 mL甲醇,用泵抽取100%混合液,定容混合:Mix-to-Mark 250 mL甲醇,用水定容至500 mL,用泵抽取100%混合液,预混合（重量比混合）:Premixed(w/w)200 g甲醇+200 g水,用泵抽取100%混合液,改变流动相配比方式，可增加柱效（提高灵敏度）,诣道锗撬陈研晤决坚杖譬炊畸统邱棱春净郭魄善氟辈蓉债笑势娱术阐张臃液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍,谢谢观看！,资料收集：,痹声祷脊泵舟馏催态渗奏川纤袭肮涟帜肠厨救柿丸谜刀派毒视评抡夺冒洪液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍,
