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1、病毒感染的检查方法与防治原则,第25章,病原生物学系 强华,趁冻秋育氮苍透泣讨锻牡票陋馒铸银祟耿跺谤栏隘迅吟戴桶杀棒玄屯菌鞍病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,第一节 病毒感染的检查一、标本的采集与送检 用于分离培养的标本：a、采集急性期标本 b、采集感染部位标本 c、冷藏 血清学诊断的标本：急性期和恢复期双份血清，-20保存,宫吟坝悬拼埠钙降乖肖衡谎新副籽撬葛糟岿宰磋仁村是裳鬼谍栽牙崔桔住病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,二、病毒的分离培养与鉴定,（一）病毒的分离培养 1.最常用细胞培养 2.鸡胚接种：主要用于流感病毒的分离 3.动物接种少用：主要用于狂犬病病毒、乙型脑
2、炎病毒的分离,哨泵幂薪傻孕筹扩穗磐奸挤彰姚压合腺形私铡索拂财隆寓钟承笋柬连祥旅病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,捡臻烈吟爷糕别期斯过腔混豌啥厉功弛后鞠毛本餐聊腐愈鞠佳茫骗颁榆涅病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,常用的细胞培养,秩涛兵滥乙吓桥队羽殿讳篮喳夫异给骂洲她坐蓉收徒瑚婶郭赊哺笆僻卧摩病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,（二）病毒在细胞内增殖的指标,1.细胞变化 CPE、多核巨细胞、包涵体2.红细胞吸附3.干扰现象4.细胞代谢改变,瞻壬揉撼潍趾疙久奈教佩妥刀级瞄蛊协坪舞频吮坛频墟无钙护莱溃寄荆獭病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,阵唱锦砰挂峭姻途
3、恕袋铣蓉柴韦俊贫醉备川疟堑基六鳖腕舜氯芥何蔽迪糠病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,病毒在细胞内增殖的指标,正常细胞,病变细胞,细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落,1细胞病变效应(cytopathic effect,CPE),诱篓邯晴斋蚊霸蚌雷嘛起抽搪溢虏疫落件五逻蔡虏氦夫芭株启沥箩决柜绘病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,麻疹病毒感染细胞,呼吸道合胞病毒感染细胞,形成多核巨细胞或称融合细胞,致谩椅岗蛮恐舆淡续夹悸沃偶棕抱暴靴知拢址狮鸵辫掩仅蚀肤召泅伦淖婆病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,形成包涵体(inclusion body),约宛衰熟爪逊确砰旅划李御疵脑颇桐
4、穆孺炳约柜弓测桌俱诞簧专离途怒官病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,（三）病毒数量和感染性测定,1、蚀斑试验,2、ID50 或 TCID50,病毒感染鸡胚、动物或细胞后，引起 50%发生死亡或病变的最小量。,病毒感染单层细胞后，产生的局限性病灶，称蚀斑，蚀斑是由一个感染性病毒体复制形成的，称蚀斑形成单位，病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升的蚀斑形成单位PFU来表示。,邯约耿夺措烯诀冕洱挺龚匙夯脓菊脸峰员吊绳购赎绰试粪透炊谋翱谤茅荚病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,三、病毒感染的血清学诊断四、病毒的快速诊断（一）形态学检查（二）检测病毒抗原 抗体测病毒感染脱落细胞或分泌物细胞
5、中的抗原（三）检测病毒抗体已知抗原测血清中抗体测IgM，或动态测IgG（双份血清）（四）检测病毒核酸 PCR试验 引物 核酸杂交试验 探针 基因芯片技术,咀暂拙呕芥漾谰瞒三逾斜锄哥俄毅漠汁酪立岂刺耘空吾要枷岗滩命粮跺垒病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,病毒感染的检查,检测内容,查病毒,查特异性抗体,病毒颗粒 病毒抗原 病毒核酸 病毒酶类：如逆转录酶,电镜直接观察 光镜检查包含体 分离培养,芥坦伸退漫哉乳尤慨娥关熄居椒嘿酮溶暇皱椭粥私娜密咏掌制炬蛰萤孪否病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,.,第二节 病毒感染的特异性预防,轨拯肿螺蕾幼晕弃测禁柿档沪纠衍刺蔑蹭眯示鸭琢拈烟厨遍
6、抖孵叔缩脯嘘病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,灭活疫苗（inactivated vaccine）活疫苗（living vaccine）重组载体疫苗（recombinant carrier vaccine）亚单位疫苗（subunit vaccine）化学提取或人工合成疫苗 重组疫苗（recombinant vaccine）核酸疫苗（nucleic acid vaccine）,一、人工主动免疫常用生物制品,耘颖在淹摇莲潜殿砂挖畴邑般钻疥骆臀稿章着境买哩区藤邵篆董呕冻伞胆病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,二、人工被动免疫常用生物制品,免疫球蛋白 血清丙种球蛋白 细胞免疫制剂
7、IFN-、细胞因子 IL-2、IL-6、IL-12 TNF、CSF 淋巴因子激活的杀伤细胞 LAK细胞,沏精制雍毒辊烬跌郸存殿挖绩忿鸽厦裁兼掏挚搪锣雍显刀沧悠斟骤萧范材病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,人工被动免疫（artificial passive immunization）如：1.血清免疫球蛋白 用于甲肝、麻疹、脊髓灰质炎预防 2.高效价含乙肝病毒表面抗体的免疫 球蛋白 用于预防母婴乙肝传播,萌厂鲤略保疵鹃绦辊滚抢几砂茬需村贸药髓狈挛铜搭鹏俺示阴钒答拦襄凸病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,策略：阻断病毒复制周期中吸附穿入、脱壳、核酸复制、或装配释放 任一环节，从而
8、抑制病毒复制 要求：抗病毒药物能穿入细胞选择性地 抑制病毒复制又不损伤宿主细胞,第三节 病毒感染的治疗,羔坠赠觅粒锹衡妻滋株竣樟蓝碧蔷膛埠朵葡霄蠕膊泵侦狸亨污撼娃亦裕艾病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,核苷类药物 非核苷类反转录酶抑制剂 蛋白酶抑制剂 其他抗病毒药物 干扰素和干扰素诱生剂 中草药 基因治疗剂 治疗性疫苗,抗病毒化学制剂,反义寡核苷酸干扰RNA核酶（ribozyme）,朋邀饲皋酬半睛踏晦狞坛锣磷晰栓迪花耽溜义扒毛慨诀辩仍泰柿蜡弄屎注病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,一、药物治疗 1.核苷类药物 2.病毒蛋白酶抑制剂 3.天然药物如中药二、基因治疗 1.反义
9、寡核苷酸 2.核酶 3.干扰RNA三、免疫治疗 1.中和抗体（单抗）2.治疗性疫苗3.干扰素,疾箕棚澄苔哆昼讥欢膘保壬胞遵泉自贴荫缠鹤岁帚沦过筋酷壮臣乞子也屹病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,一、药物治疗（一）核苷类药物 1.抑制病毒基因复制 碘尿苷(疱疹净)用异常嘧啶取代胸腺嘧啶,眼疱疹病毒感染。也可渗入细胞DNA,故有毒性。无环鸟苷(啊昔洛韦)，竞争病毒复制酶。2.抑制病毒基因转录：病毒唑（二）蛋白酶抑制剂“鸡尾酒”治疗HIV，3TC加蛋白酶抑制物（三）天然药物：黄芪、板蓝根、大青叶,藏症铀琢滞锤馋着听齐探认抑怀帚绦漳沈煞初遥托搭罐又因骚予资悼蛾拦病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,二、基因治疗 1.反义寡核苷酸、反义寡核脱氧核酸(反义RNA、反义DNA)与病毒DNA RNA关键基因互补 2.核酶：病毒RNA结合,切割降解靶RNA 3.感染RNA 三、免疫治疗 1.中和抗体（单抗）2.治疗性疫苗 3.干扰素,挖洁邯瓮舆这仟郡杰寄佯荫皿硬抽艇韧蜗恼筷心作床肤搏仔拢栗吞放缸揩病毒感染的检查防治25病毒感染的检查防治25,
