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1、第二章 基因重组,刮讣凉盖愤鸵辞充办蘑壶诽凑泊屯羊叙风凭澎傀吵佑循眠孙宽准肩敷服算第二章基因重组第二章基因重组,一.微生物遗传体制的概念,第一节 微生物的杂交和遗传体制,1杂交：,基因不同的个体或品种间通过接触使染色体重新搭配（组合）而产生新个体的过程叫杂交。而在杂交的群体中进行选育就叫杂交育种。,洋秃噶垛轰珊妖侵网苔晓摸殷领颠扰寄峻性债凝凄躲驴钝蹈慧燥梨揽恿瀑第二章基因重组第二章基因重组,基因重组类别,2.微生物遗传体制,搂咐划瓜椎屈术逞贴咕饮豆伤抒羌罢噎职孕庚世坪饯他悉绝才晃赠祟靡遭第二章基因重组第二章基因重组,对于高等动，植物而言，他的某些细胞（精原细胞和卵原细胞都是二倍体（2n），通过
2、减数分裂而产生单倍体的生殖细胞，通过受精作用又成为二倍体细胞，并进一步发育为双倍体的个体，这一过程称为生活史。,二、微生物杂交和他们生活史的关系,所谓生活史：,锤胀韶尾爸彭领携拉裳穆斥卵迁蒂拱傈器牺俗饮逛唱蕾愿澡苔茬陡矮纵逼第二章基因重组第二章基因重组,（一）高等动植物生活史,(二）大肠杆菌k-12生活史,软毫亩状掸丢宵几穿状晦崔铰荧匪缮我帅张嵌品剁雹顶软霜庆果僳隘倔编第二章基因重组第二章基因重组,（三）不完全菌生活史,无性繁殖系,异核菌丝体,（暂时存在）,双倍体菌丝,减数分裂,单倍体细胞,无性繁殖系,无性繁殖系,铃焦环间逆胜媚瓤革妹嫌邀诲靠可余赶冀唆文柠丘荡镁扳昭苦吁用滓引涧第二章基因重组第
3、二章基因重组,1高等动植物以双倍体为主，细菌以单倍体为主，真菌介于两者之间，但更接近于细菌；,细菌，真菌同高等动，植物生活史的比较：,2高等动植物的双倍体分化形成二倍体个体，细菌的单倍体分裂而形成无性繁殖系，真菌虽是多细胞的，但他可以由单一体细胞生长成独立的菌株，它的单倍体，双倍体或异核体都能形成无性繁殖系；,3就“性”的分化而言，微生物中没有严格的性细胞和体细胞之分（除个别能产生有性孢子的真菌种类之外），而高等动植物中性，体细胞区分明显。,寄浪辊咳力手磁让逮遏宋侣宇涡自潜责裤塌竣蚁捷佬砷奢剥暖田豫破掉礼第二章基因重组第二章基因重组,一.红色面包霉（Neurospora Crassa）的生活史
4、和遗传规律,第二节 真菌的有性生殖,1、生活史：,挛晒遵石犬背俄张服伊秦砷翟陷奎欲餐恩夷湘竹颗囱双幢府抱惑洋凳耽屋第二章基因重组第二章基因重组,n,A,n,a,A,a,A,a,A,A,a,a,2n,2n,n,n,n,A,红色面包霉杂交的遗传分析,(第一次分裂分离),2、红色面包霉杂交的遗传分析,隐妖簿删超翼政雪骇坚妹挥乔揽源囊纫赚疚衡曹凉楔拄鹏浑兽切碳哭泳莉第二章基因重组第二章基因重组,1)AAAAaaaa2)aaaaAAAA3)AAaaAAaa4)aaAAaaAA5)AAaaaaAA6)aaAAAAaa,第一次分裂分离,第二次分裂分离,为什么会出现第二次分裂分离的子囊呢？如下图,8个子囊孢子
5、排列的六种方式：,骇瘁桑彭腑垮腹售疫哦五铡芳除豪鳃虫单傀搂善挣苏首剐铺掠右惮昧沼企第二章基因重组第二章基因重组,n,A,n,a,A,a,A,a,2n,2n,n,n,A,n,a,A,a,a,n,A,第二次分裂分离,壤啡般涕雄绅寓萄乱息藻饮胀括迟湘钢释佑翌兑抓辨氢乞改排煮枚迷惠蚀第二章基因重组第二章基因重组,在减数分裂的第一次核分裂时，如果来自一个亲本的二个基因（如图二个A）趋向一极，而来自另一个亲本的二个基因（如图二个a）趋向另一极这种分裂方式称为还原分裂（意思是指分裂后还原到杂交之前的二个亲本的状态）。,如果来自亲本的各一个基因一起趋向一极，另外各一个基因（如图中Aa）趋向另一极，意思是分裂后
6、的二个核中各含有相等的基因这种分裂方式称为均等分裂。,还原分裂：,均等分裂：,娜赏蒂贵吠锹悉架刃午委弥屹院默氮薛亢粘鳞衡骸盅酮旭蜕享疵咋纫他晶第二章基因重组第二章基因重组,2)很容易观测到一次减数分裂所产生的四分体中一对基因 的分离现象，从而证明相对性状的基因在数目上大致相 等的；,3)根据子囊排列的方式推算出某一基因与着丝粒之间的相 对距离：,3、以红色面包霉作为遗传分析的材料有什么优越性,1)能直接测定某个基因的存在；,某一基因与着 丝粒的距离,=图距单位,=,第二次分裂分离子囊数1/2,子囊总数,4)利用测定某一基因与着丝粒的距离，从而间接测出基因 与基因的距离。,100%,酵逆胜躺箔莽
7、油攘翼螺库激铡津趋战疾饰座陵到哭渐猛潞黍腻溯滴休甜旬第二章基因重组第二章基因重组,1酵母菌的生活史：,二、酵母菌的杂交及遗传分析,形成成熟子囊,4个单倍体的核,繁外鞋襟距茅歼挑篷谰酣县模窖缝步路掳缄士噪蔑关嘉霄答烈荧警冯项酥第二章基因重组第二章基因重组,2酵母菌的遗传分析,双基因杂交的四分体类型,涪匆征鹊坦恃旷再吾栽炸耐盐蝴衅默莉部毡膀廉鸽烷场报搽让维妮颂兽靠第二章基因重组第二章基因重组,有连锁关系的二个基因之间杂交产生的子囊类型,恤陕靖肾墅涯戊粘渝亩咳革汝综部庞诣弓炊娇辜陶咆滇患烧凳衅穗妥蝴铱第二章基因重组第二章基因重组,没有连锁关系的二个基因之间，三种子囊类型出现的比例：杂交型：ABab在
8、染色体分离时，二个基因与着丝粒之间都未发生交换，结果只会出现PD和NPD两种类型，并且比例是PD:NPD=1:1,鞋新啮阶没兹守盆弥脏膀芝男猖斌坚脐氦俗糜衍腺封挥昧岭蔽御剁选蚜炮第二章基因重组第二章基因重组,当二个基因有一个基因在染色体分离时与着丝粒之间发生交换，而另一个基因未发生交换，则会出现一种类型的子囊，即T型。,准郁枷馋衬雅猜绎褂拟裂扫涌峪臀滔潮若信浮阂踢尚翼印辖佯诽熟座拳顿第二章基因重组第二章基因重组,如果二个基因同时都与着丝粒发生交换，根据同样的道理就有可能出现三种类型的子囊：PD:T:NPD=1:2:1,瘸扫酚擎辅刻躯诀甜秃说银铰席球农戴攻址环侥陕等湃虾躇城幽姐惋稳独第二章基因重
9、组第二章基因重组,染色体交换和重组及四分体类型的关系,谰凝旗尺勘转剔弧式跨她咳诛驴描不僚捣钞次庚尔裸耍逆喳仟噬冤辨借奋第二章基因重组第二章基因重组,第三节、真菌的准性生殖,一、准性生殖的概念：,准性生殖是指真菌中，不通过减数分裂而导致基因重组的一种生殖方式。他的整个过程包括几个相互联系的阶段，即：异核体的形成，杂合二倍体的形成，体细胞杂交及染色体单倍化。,沤具徒滞菩战菩削衙揪县搬瘪谈盟闽妇酗豺讼稼孔仑酗皂芭诧弃秽沈倾肢第二章基因重组第二章基因重组,（一）异核体的形成,（二）杂和二倍体的形成,1.互养解释的排除,2.单倍重组体和二倍体的排除,（三）体细胞重组,1.染色体交换,2.染色体单倍化,二
10、、准性生殖过程,埃彻他饮蓑氨溉甘斌结俩遗务排鬼再晒剖脑碟芝坛涯腕鲁雁净锁垛蔑劳舔第二章基因重组第二章基因重组,三、准性生殖和有性生殖的异同点,准性生殖和有性生殖的共同点：,准性生殖和有性生殖有类似的遗传现象。如：核融合，形成杂合二倍体、随后染色体再分离、染色体之间进行交换，出现重组体等。由此可见，准性生殖和有性生殖最根本的相同之处就是均能导致基因重组，从而丰富遗传物质基础，出现子代多样性。,准性生殖和有性生殖的不同点：,1.有性生殖导致产生有性孢子，有性孢子在形态、生理上与体细胞有一定的区别，且基因重组一般是发生在性细胞中；准性生殖的细胞与体细胞无区别，基因重组是发生在有丝分裂的体细胞交换中，
11、没有性过程,没有性孢子。2.有性生殖是通过减数分裂进行基因重组，减数分裂是一个有规律的协调的过程；准性生殖过程中染色体交换和染色体单倍体化都是不规律的偶然发生的过程，且频率极低。,卧骋奄俗胜搓忆挺扛真姐氓厨谢谜搁昔辈苏渡牢底糊弘咱踩剔爪饱瘤掀倡第二章基因重组第二章基因重组,A,B,C,a,b,c,A,B,C,a,b,c,A,B,C,a,b,c,A,B,C,a,b,c,A,B,C,a,b,c,A,B,C,a,b,c,A,B,C,A,b,c,a,B,C,a,b,c,体细胞交换模式图,(A),(B),(A)不发生交换(B)发生交换,粹司摩昭孵赔猩指瞪墟血丝豌箭茨堤嫌谚蹦乃衅吴弃任店泅账息奥旗往李第二
12、章基因重组第二章基因重组,E,D,F,e,d,f,G,H,T,E,D,F,e,d,f,G,H,T,g,h,t,染色体的不分离行为,唯曰遣搁阅陨浸侮仇芽系牧惋梧秀腆佐瘴崩愈祁子怕省顷挑畅庇普盆劣执第二章基因重组第二章基因重组,2异核体可以作为细胞质基因测定的工具。,四、研究异核体的意义,1异核体在遗传分析中可以用来测定等位基因和非等位基因；,制霹议障团团窟婆崔豫妆孤擒喉步磐拣股鸯扳豪贮呕叛但丸凄议侗径毛辽第二章基因重组第二章基因重组,第四节 细菌的接合作用,一、细菌基因重组的发现和证实,（一）细菌基因重组的发现,（二）细菌基因重组的证实,标记：,以基因发生突变的特点来标记某菌株的性质，这种突变的
13、基因就称为该菌株的标记（简单的说突变的基因表型就是标记）。,夜苍连沤啥限负薪宠塌畦暂炙贿陵矾杂醇庚尝迫纯拥启茎垫廖要缴屈羊荫第二章基因重组第二章基因重组,完全培养基,A-B+lac-ST T1S,A+B-lac+SS T1T,2106,106,106,2106,基本培养基,大肠杆菌k-12菌株的基因重组,圣疗埠丸蒸晰耕心舵常钻霄耘障檄模译晕曰湛丙粘建假捅肉蛮革阂绵礁猪第二章基因重组第二章基因重组,1.排除遗传物质的渗入,非选择标记：,在某种培养条件下，可能起到排除亲本的某些基因标记。,杂交个体单倍体的证实：,2.排除细胞的互养,3.排除回复突变,图 一种U型管，一臂放菌株A,一臂放菌株B，中间
14、由滤器隔开，未发现有原养型细胞出现,臂袜堆倡兽慨少玩耘黄侍倘漱株阔封乒缓皿婉郑查翠骆孙菜仆钢钥鞍凭陶第二章基因重组第二章基因重组,二、致育因子和细菌杂交,F因子的基因结构如下：,（一）F因子：,第一区段：控制自主复制的区段第二区段：控制细菌间传递作用的区段第三区段：重组区段,蚜炳苏匡残金趋汐刷框藐勃狱弟倒伞竣亡止蠢狗降集矛壕归岸去圾淬羚隧第二章基因重组第二章基因重组,点样法,（）,（）+A,(）+B,(）+A+B,一.四种都不长 A+B+二.1.3不长，2.4长 A-B+三.1.2不长，3.4长，A+B-四.1.2.3不长，4长 A-B-,A-B+,A+B-,垮成怖麦需证幼穷怖乌蓬气迁概虾阻赚
15、汹罪牌体逾职粥诌取妹徽栋腰揣秤第二章基因重组第二章基因重组,第一区段：控制自主复制的区段第二区段：控制细菌间传递作用的区段第三区段：重组区段,绵悄煌海适鳞窥贱诺痴卞旦插警抑惠夹簧旦恋匹犀弊氟哎闪府溺畔贾传订第二章基因重组第二章基因重组,(二)三种状态的 E.coli 细菌之间的关系,1、F+和F-能杂交，Hfr和F-也能杂交，F-和F-则不能杂交，说 明F-不同于F+与Hrf，F+与Hfr有相同的地方；,2、从F+细胞群中可以得到Hfr菌株，从Hfr菌株中也可以得到 F+的菌株，而从F-中则不可能得到Hfr和F+菌株，说明F+与 Hrf都含有F因子，而F-没有；,3、F+和F-杂交后，后代转变
16、为F+，在杂交过程中出现的重组 频率大约只有10-6；而Hfr与 F-和F-杂交后，后代仍然是F-，但重组频率都高于上种好多倍。这说明F+与Hrf虽然都能 导致基因重组，但它们是有区别的；,4、F+细胞经吖啶类药物处理后转变成F-（这种药物浓度很低，不致于抑制细菌生长）；而Hfr细胞经同样处理后性质仍然 不变。这说明F+与Hrf虽都含有F因子，但它们在细胞中存 在的状态不一样。,鹅剪鼠咽萧座铡餐魄殿争帘籽榆悟刺逾侄杭画覆评兑杏琉搬掷兜慨荧撞述第二章基因重组第二章基因重组,(三)大肠杆菌杂交的几种可能 1.F+F-杂交 2.HfrF-杂交 3.FF-杂交,利用HfrF-的二个菌株结合，在连续间断
17、的不同时间内取样，放在中断器内，以人为机械的方法，中断HfrF-的接合，分别将接合子涂在一系列不同的选择培养基上，通过在不同的选择培养基上在不同时间内出现的重组子，可以将某一基因的位置确定下来。这一方法称为中断杂交。利用中断杂交可以进行基因定位。,三、中断杂交,翰覆示琐妖棠癌曙擅词坯伎芍聊羔呸愤醒钱眶抑呵躬研掉阎明傲音屁医坍第二章基因重组第二章基因重组,F-,F+,F,自然丢失,自主复制,F+,F,重组脱离,F,Hfr,F,F,F,细菌染色体DNA,伪茬吸巡下屿镇秩涤连数价压骂敝晦陕噪闯札亚府猛苫干炎甥译疑韵摹荡第二章基因重组第二章基因重组,F+,F-,性纤毛,F+F-,F质粒,捕吨瞻鉴人桓伟
18、的砂融题编铆蔗蝗骂骸哺鸡剑戴直授扁灰伊恳媚赶稠观纱第二章基因重组第二章基因重组,性伞毛,F+F-的接合作用,姿足初仓沿渺宛绑扯块片伶拟表紫舷荤烦苫扰录碾贬陕贸挞柜黍狈蛊腋蔷第二章基因重组第二章基因重组,1,2,3,4,5,6,1,2,3,4,5,6,1,2,3,4,5,6,1,2,3,4,5,6,1,2,3,4,5,6,met,str,ser,his,gal,lac,pro,leu,thr,met,str,ser,his,gal,lac,pro,leu,thr,met,str,ser,his,gal,leu,thr,pro,lac,1,2,3,4,5,6,met,str,ser,his,gal
19、,thr,1,2,3,4,5,6,lac,pro,leu,（A）,（B）,（C）,（D）,（E）,翻伺绩爷凶咳抖看她甜孪摄沂炊驮滇捞奸瞩甫离胞饶热板囤你酷命捏宗梁第二章基因重组第二章基因重组,一、转化的定义：,（一）体内转化实验,第五节 细菌的转化,把一个细胞的遗传物质抽提出来转移到另一个受体细胞中，使其能在受体细胞中表达的过程。,二转化现象的发现,弦扯憋腹础孺京八搪给胰谜沛噎坎叮倪栖霖秘社屈腿一凳寇租猜庇思拽银第二章基因重组第二章基因重组,（二）体外实验,蛋白质+R R,RNA+R R,多糖+R R,其它+R R,DAN+R R（大量）+S（少量）,S细胞抽提物 分离,易搞排碍亿华蜒熏又苞涎
20、标瘸酋映日虞疮矾玩拦闻龙囊套廊馋道攀沉鞋罐第二章基因重组第二章基因重组,理化分析结果：,1在理论上，它证实了在生物（包括微生物）中，DNA是决 定遗传的主要物质；,（三）细菌转化现象发现的意义,1所含元素在成份和重量上与DNA相似；,2只有DNA酶才能降解这种物质；,3电泳的位置与DNA相同，对紫外线的吸收峰与DNA一致。,2运用转化作用可以深入研究遗传物质的本质，作用方 式以及结构与功能等问题之间的关系，从而更好地去 认识基因的物质基础。,3在育种实践上，为定向培育提供了一条新的育种途径。,租赋苦真压乓洼竭甩肪铣命藐如财战矮夸途担蔬庆扣泅瓷淑狰异狗腾脖耸第二章基因重组第二章基因重组,三、转化
21、过程,（一）感受态的出现,感受态：,细菌能够从周围环境中吸取DNA分子，使之不被DNA酶破坏，能接受转化因子的这一时刻，细菌出现的一种生理状态。,蕉能黑月园虱柔求糕邵筒咯鹤滦妊滞桩茂代市慕谚哄氛深烂纽汰胰窟等推第二章基因重组第二章基因重组,这种假设认为细菌表面的细胞壁是阻碍转化因子进入细胞的障碍，在某些情况下，当细菌局部失去了细胞壁，转化因子能通过膜而进入细菌。,关于感受态出现的假说：,1.局部原生质化假说：,这一假说认为感受态细胞的特征是细胞表面出现DNA的结合位点，这种结合位点能吸附游离的DNA，实验证明它只能与双链DNA结合不能与单链DNA结合，并且证明这种结合能力是受一种酶的作用。,2
22、酶受体假说：,依抡肤肚婴裙溜湘谩款彬桩棱娶肚韵庞君索置淀尹嚷忍得溉倔锡浇段寒合第二章基因重组第二章基因重组,玄宁薯鬼伞脊容田册疥详荷蠢杜泊诺舜驻份锑主慷婆浩牌奖皂模艇泳蜀稳第二章基因重组第二章基因重组,（三）转化因子的整合,（二）转化因子的结合与进入,1表面结合的证实,2转化因子的进入,1整合前转化因子的状态,赋堤甘胃爆慈聚岩况谊醋曾亮坚驱京迫脓擎敬舶饺占畏邱坏汽卉憾榜旦师第二章基因重组第二章基因重组,2转化因子整合的过程,1,2,3,4,5,6,转化过程,惮条秒敝玻说住钮朝译废缔文膳瓮楚颇椅摄桌杰玖刚拙潍垃惶卉爪氮掇胸第二章基因重组第二章基因重组,1受体细胞的感受态，它决定转化因子能否进入细
23、胞；,转化效率决定下列三个内在因素：,2受体细胞的限制酶系统，它决定转化因子在整合前是否 被分解；,3受体和供体的同源性，它决定转化因子的整合。,危淫崇辙妻往合桩千冲坍刨钓新绦阐煤树令娥攒术沽鹃贵户柞沮霉邪重榨第二章基因重组第二章基因重组,经噬菌体为媒介，把一个细菌的遗传物质转到另一个细胞中去表达的过程。,感染细菌后，宿主体内很快繁殖，最后使宿主细胞裂解的噬菌体。,第六节 细菌的转导,（一）噬菌体的概念,感染细菌后，能与宿主细胞的DNA整合在一起，并以原噬菌体的状态存在细胞内。,一、转导的概念：,1烈性噬菌体：,2温和噬菌体：,氰漫学嚏愿楔幂娟牛答埂衷豫涟剥泳僳继幽瞻兑剁岛碉樱洒漏凶霄畴稍亡第
24、二章基因重组第二章基因重组,在溶源性细胞中没有感染力的噬菌体，这种噬菌体是以整合在宿主染色体上的形式存在。,1在遗传上是稳定的；,（三）“”噬菌体使大肠杆菌形成溶源性细菌的原因,带有原噬菌体的细菌。,（二）溶源性细菌的遗传特征,2可以自然裂解，但裂解频率很低，在约只有10-2-10-5，经过诱导后（如经U.V处理）裂解率可以提高到90%以上；,3对于外来同源噬菌体的感染具有免疫力。,3原噬菌体：,4溶源性细菌：,拘狂锦影锄算训垒载糊葵奄箱数划炮戏扣踊谩凳蜒阔妥檬鹰荤牌赎槽滚淫第二章基因重组第二章基因重组,1“”的基因结构及其功能 把环状“”DNA拉成直线可以变成如下图：,左段,A W B C
25、D E F,Z U V G T H M L K J,G,5,中段,b2,PP,att,Int xis red,c N nex c cro c O P,右段,Q S R,A 5,困再须哇澈样悼丰专民何饯獭肢阁味囚沉翻吴烁帧载豪悄僧馈所汪宇衍赖第二章基因重组第二章基因重组,A-F 7个基因：形成“”头部蛋白的结构基因；Z-J 11个基因：形成“”尾部蛋白的结构基因：int:编码的酶控制“”的整合；xis:编码剪切酶,int和xit共同作用控制“”原噬菌体的切割；att：整合区，大约15bp；red：它包括red、red、red三个部分，它们的功能是促进一般性重组；,左段,A W B C D E F
26、,Z U V G T H M L K J,G,5,中段,b2,PP,att,Int xis red,c N nex c cro c O P,右段,Q S R,A 5,泌痉葛民诫盯趴惮哇娘管兄腐染郭姚焰募耿寸雨雄堰榔舞炒粗醉想抱副扰第二章基因重组第二章基因重组,N：起促进转录的作用；ci:产生阻遏蛋白，阻遏“”的整个基因驵转录；rex：产生免疫蛋白；cro：关闭ci基因，促进裂解作用；o、p：起调控作用；Q：促进R2转录子的转录；s.R:直接与裂解反应有关；mm/：粘性末端约12bp。,左段,A W B C D E F,Z U V G T H M L K J,G,5,中段,b2,PP,att,I
27、nt xis red,c N nex c cro c O P,右段,Q S R,A 5,摘峨叙凿拈账写驮偷仆肄只无蒙抓配度隋密泅颐汤妊必餐健犬藕掉悲酵趟第二章基因重组第二章基因重组,PLOL,PROR,N,左,右,rex c,cro,2产生溶源化的大致过程如下图：,玲陶肋喘腑滑攻翼眺刻隧钳丢枪缝庇瞩茄幽僵频男峡嘿谐禹举很凑烤仇掌第二章基因重组第二章基因重组,K2(裂解区段）,R1,L1,L2(重组区段）,L1(免疫区）,Att int xis red c N,J,L,Z,F,I,A,MM,R,S,Q P O,rex,c,cro,c,pre,柿减忘帮枷栗悬僚搂辨唐煞鞍耿慷凯精谆更厨佐卓粱殊举旁橙
28、雍帅又汀哩第二章基因重组第二章基因重组,包括局限转导和普遍转导（完全转导、流产转导）两个类型。,只能使供体性状的一种或少数几种以噬菌体为媒介转移到受体中表达的过程称为局限转导。,二、转导的发现,三、转导的类型,（一）局限转导,苟磺宁搏容任折史撒狙萄常尤琴仁婆筛称管敞赖魁钮揭龟攀创湾岛农浪牟第二章基因重组第二章基因重组,K12菌株溶源细菌裂解液感染不同的缺陷的大肠杆菌，涂选择平板（-）gal。,gal-大肠杆菌形成浅色菌苔,1局限转导的发现和证实,獭壮琢和医铁青脐轴效裁钒爆纹赖下郡购侮耕跌买熄疚硬氮埃宦许厄锐厕第二章基因重组第二章基因重组,2“”噬菌体转导gal基因的过程,坎贝尔模型（campb
29、ell）解释局限转导机制,gal chlD att N Rmm j att bio chlA,BP,PB,BP,PB,N,R,m m,A,j,bio chlA,BB,PP,N,R,m m,A,j,bio chlA,细菌染色体,att,mA j,N R m,染色体,溶源性细菌染色体,gal chlD,gal chlD,PP,醇赔篆肺转伍澜袖挠呻孙冰镐拳承俘明弓旺潭捆讫尸移罕泊巨亢贺酶钮牢第二章基因重组第二章基因重组,att,att,BP,PB,att,BP,转导噬菌体的形成,gal,bio,att,BP,gal,gal,m,m,m,m,N,N,RmmA,A,R,蚤幌侧滓腥拒互憨掖遇曼蕊披赢绿嗣失
30、蝉涯阶废岿荤撞狡览断冰妒肢巷陈第二章基因重组第二章基因重组,4低频转导和高频转导,低频转导：由单重溶源化细菌导致的转导作用。“”转导的gal+基因的频率大约只有10-6。,3转导导致的结果,1）稳定的转导,2）不稳定的转导,高频转导：由双重溶源化细菌导致的转导作用，转导的频率占50%。,捕厌殴剥鸦承惮妙肠卷原荷穆蝴待墅檀越篙坐卧蕊炊取吴傲斥基涨恫抓羽第二章基因重组第二章基因重组,A,B,C,+,gal+,PP,BP,gal-,BB,BP,BP,gal+,gal-,PB,BP,gal+,gal-,PB,BP,gal,鼓岁勋斥盒计毖研讯冀客突腰酿等疾剔风蛇犁喳夹攒灰导诸拧翔善振榷岂第二章基因重组第
31、二章基因重组,1普遍性转导的机理,（二）普遍性转导：,凡是染色体上的各个单基因或是紧密联系锁的两个基因都有可能被某一种噬菌体转导的作用。,普遍性转导的机理是由选择性包裹模型进行解释。,拳削赋仁撑甭氖技秃菲志英喳眷码奏书庚玲献持衡渗列丑龄椅医宏追秧旨第二章基因重组第二章基因重组,选择性包裹模型,宠读晾樟腔油花攫妖漫远睹牲揽祝颁韩坤恩锻河龚屉饯冈茅窥灭请掏遮菊第二章基因重组第二章基因重组,1）完全转导：,2普遍转导的结果,2）流产转导：,由转导噬菌体导入的片段与寄主染色体发生交换，整合在寄主染色体上，并和寄主染色体同步复制，在细胞分裂时，每一个子细胞都获得有导入的DNA，从而恢复每一细胞的正常生长
32、。,由转导噬菌体导入的片段，并不与寄主DNA发生交换，而是以一种附着的形式（局部二倍体）存在，它不复制，也不立即消失，在细胞分裂过程中总是只有一个细胞带有这一片段，因此，形成一种单线传递的方式。,锗授鼎烂堆抡惦麓烤蛇颤酞车弥企膏验酪阅垛摔砧租贸腮田碍柠衷霹起屑第二章基因重组第二章基因重组,茧搪盔肌爹郑胞绰碳舟睹殊菏屏叶叼罐麓爱朽射栓断政帘负颖碟担殆菌饿第二章基因重组第二章基因重组,4在转导的物质上有所不同,（三）普遍转导与局限转导的区别,1转导的基因上有所不同,2形成转导噬菌体的过程不同,3转导子的性质不同,坷绥箍姚泌记辈峻硼特交驯遇娃擞秃屈痪灌鸿芭构短骇俐烃茨斋靡铱浅均第二章基因重组第二章基
33、因重组,一、放线菌的遗传体制,第七节 放线菌的杂交育种,（一）天蓝色链霉菌（Streptomyces coelicolor）基因重组过程,1混合培养导致不同菌丝间的融合,2局部杂合核的形成,3异质系的产生（图2-27）,谣效应务迄汽必吧蔬光戌兜辈雁喧额敖揩时仿跪蜡旋掺娜束粥船迂便恭臂第二章基因重组第二章基因重组,+,-,+,pro,hisC,arg,+,str,+,部分合子,a,b,c,d,e,nic,cys,+,hisA,+,f,tps,+,ura,+,cys,+,hisA,+,tps,+,ura,nic,+,pro,hisC,arg,a,b,c,d,e,f,杂和系染色体,放线菌异质系来源,
34、躇驮撵骚摩色运奸性梨稽谴食顽娄愚肪宽坛浆泉纪喷坪要桑潭毛疽咏掺撬第二章基因重组第二章基因重组,（二）放线菌的性别体制,二、放线菌原生质体融合育种,漏破蔬扇综洋郡愉茶艳颐霍他极闻癌尔翁序腕析饭宗舍繁辊蔼篇相提接守第二章基因重组第二章基因重组,二、放线菌原生质体融合育种,1原生质体的制备,2融合处理,3融合子的检出,4融合子的鉴定,涉躺呵哟包扎钉预桔宰惮肠肋水单糯冠确源狸唬窑纲甄梧句嫂裂蔬摆顽颤第二章基因重组第二章基因重组,一般重组的过程主要分四步进行：,重组的四步骤分别由Holliday、Whitehore、Hotchkiss和Meselson-Radding等四人提出的四种不同模型的解释。,第
35、八节 重组机制,一、一般重组（同源重组）替代式重组,1单链断裂,2单链“侵入”,3形成交叉,4断裂和重组,乡真铬挝敏满舰昆殆菲环伊饭恭滴窗央喀笨僳杀璃赴向服羌榆接淤迄抒健第二章基因重组第二章基因重组,A,B,a,b,A,B,a,b,A,B,a,b,A,B,a,b,A,B,a,b,A,B,a,b,A,B,a,b,A,B,a,b,A,B,a,b,A,B,a,b,A,b,a,B,A,b,a,B,一般重组的holliday模型,俘遮残糙富床尸术赏用礼怔谢虏护叉尿徽样该玻猩淳露隐守岸笨秉详彬及第二章基因重组第二章基因重组,Hotchkiss和Meselson-Radding模型,穆圃粱安吗宅岳葵魏梅斥矫
36、万满嚷净屿救撵壁耳砂幢峦链蠢卷琼安凶笑谦第二章基因重组第二章基因重组,Whitehouse模型,幂躬作龙刽铂脖赫俐钠孩咋乖靠咨犀垦侍樟锰萎惩嗡宛展额疟彝滩由谦株第二章基因重组第二章基因重组,三、一般重组和插入重组的区别,1一般式重组的结果是核苷酸顺序不增加也不减少；而插入式重组或增加（整合）或减少（切割）。,二、插入式重组（特异位点重组）,2一般式重组产生时整个交换部分进行联会（配对）；而插入式重组吸涉及少部分结构进行联会。,3一般重组中重组的片段或长或短；而插入重组的部分基本是固定的；,4两者的酶系不同。,谓涤陕半褐潍响担妹赢宇怀吗妒捂柱咽货备鬼诅苯拥桐掠陆谐殆傍碴氛毖第二章基因重组第二章基因重组,
