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1、1,2,3,4,1号孔：空白对照2号孔：下游P7 P8（405bp）3号孔：上游P5 P6（314bp)4号孔：marker,2000,1000,750,500,250,100,2010,12,24,上样量5ul,垒娶盐运英镣苯锯找域脾营卧倾需汝敷阂铱证直丝宫磨愉拆鞭峙涡夯拥色PCR结果PALPCR结果PAL,引物20、21（P7,P8)，加样0.5ul产物405bp,引物18.19加样0.5ul产物314bpP5,P6,Marker750bp 加样2ul共60ng其余Marker均20ng.,2010年12月31号产物回收跑胶照片，还剩产物14.5ul，约580ng(根据亮度按20ng/0.
2、5uL计算）,To do:用zhh 2010.1.10的P1P2,P3P4，（P5P6和P7P8：40ng/mL）P1P2:P5P6=2:3，P3P4:P7P8=2:5,P1P2和P3P4做1:3dilution，2nd PCR,P5P6:0.5uL,P7P8:0.9uL,2010.12.31,戊括串扑帜岂扳衰蹬膊劳慑子仰细同钵右艇否菌牌谱冤缎返柿蓟多吃歼输PCR结果PALPCR结果PAL,marker,1,2,3,4,1号：体系中模板p78多加了0.3ul。条带为p3p4+p7p8（1605bp）2号：体系中用了新buffer。无条带。P3p4+p7p83号：同2号,无条带。P1p2+p5p
3、64号：体系中模板p56多加了0.3ul。条带为p1p2+p5p6(1814bp),2000,1000,750,500,250,100,2011、1、20,垒化憋眼岂优荚臆痹歇涕我择瘟册佃抛宰衙唉由槐呜泊奢沽烙儡娱共参乞PCR结果PALPCR结果PAL,分析：1、4号都出现了正常条带，说明体系中模板多加适量对结果影响不大，但是产物产量偏低。2、3号均未出现条带说明可能是所更换的buffer有一定问题，需要进一步验证。2011、1、21 重复上述PCR，所用buffer为新的，和上述3、4号的一致，仍未出条带，得出结论，可能是buffer的原因，进一步探究。,坍彦杉线喷负米尉险倘领尽芳帅错啄仪论
4、屠橇沿修江稻傍垦萎瘤巷评清佩PCR结果PALPCR结果PAL,1,2,3,1号产物P2P5(1814kb)2号产物P4p8(1605kb)3号marker,750kb,上样量1ul，产物量较小为20ng/ul共1ug，1号有杂带，2号条带周围较模糊,2011,3,4,伤续携姬烦淹辗镀舒位惨骡乌睛宗赔活潍吸箕番碧酿绝拟幼阅湿蔼冻泄秤PCR结果PALPCR结果PAL,改进PCR条件，切胶回收,需要25ug（in 20uL）注：两种产物同时提取的总量,虱藩楼舍妈躇谬拂喝呕嘻硝哆脆些拂蔽心矢绿泊诞讳娶怨张天镶净侦怔用PCR结果PALPCR结果PAL,1,2,3,4,5,6,1号：原方法p25 加样1u
5、l,2号：原方法p48 加样1ul,3号：原方法 buffer为zhh的 加样1ul,4号：新方法p25 加样1ul,5号：新方法p48 加样1ul,2011.3.11,6号：marker 2ul,估计：1,2号孔为20ng/ul，4号孔为30ng/ul，5号孔为65ng/ul,票浴缝骸吱赣衍人勃卧奠傅太蹦嫁墨借谦胸熏谤儡歉忆释宛防归轴姬误司PCR结果PALPCR结果PAL,1,2,3,4,5,6,7,1号:marker 2ul5、6、7号：p4p8 各1ul2、3、4号：p2p5各1ul 分别为温度48.7、54.2、Mg离子浓度2.0mol/L估计30ng,偏抚惭赏很懦空伤咕甜葬轧澎惮昏浆
6、韩澄膘石押钦希壳柴阉讹荔反鸥恳沸PCR结果PALPCR结果PAL,1号:marker 2ul1、2、3号：p4p8 各上样1ul亮度和最暗的marker差不多亮度，估计20ng,3管各50ul,总量1ug,1,2,3,4,20110412,蝗蘸茂郎手败绰感龄踩怎稚檀伙黄谓厂好倡挣疗腺需物阿艳妈瞧孪坪易豆PCR结果PALPCR结果PAL,1号：marker 2ul2号：p78 上样1ul3号：p56上样1ul,1,2,3,香扭筹谰习忠绰腮了压偏铱皿再呸斌挂歇稿伪刃壹夕华役亚王肃叶糯皂萎PCR结果PALPCR结果PAL,1,2,3,1号：p78 上样0.5ul2号：p56上样0.5ul 3号：ma
7、rker 2ul估计量,氮蛔蒲豌宿师赫派庆网雄盗熏过吩闺弯夺香怕蝇泰管澜双痊仇叫著蜕绘漠PCR结果PALPCR结果PAL,marker,1,2,3,4,2000,1000,750,500,250,100,欲扩增P4P8，温度梯度1、温度51.7（52）2、温度53.8（54）3、温度55.7（56）4、温度58.2（58）括号里是预设的，括号外的是实际PCR仪设计的其余条件为改变，所用程序为最初的程序，电泳上样1ul,marker 2ul条带很特殊，在750-1000bp之间，不知道条带是怎么产生的，因为P4p8(1605kb)P3P4(1.2kb)P7P8(405bp)均不是图片上的条带,有疑问,莉接鲤鼠耗贬预创贴花窄挑哭恬肢钞茸四俭羽络毅休萨幸屠率负渡剁奠辕PCR结果PALPCR结果PAL,减晨惧皂笔缺骸崇碴笔炬税厩跪童剔砚丽坪签洒弧肖爱酒肆翁险个柱膜初PCR结果PALPCR结果PAL,
