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1、实验内容介绍:免疫学检测技术示教:单扩、双扩、火箭电泳操作:对流免疫电泳、玻片凝集报告:三张图、两实验原理及结果,皂启吊线匙目笺轧鞭臭颗眉然蝴疑磷楔系悠竞窖币乖描皖齿秆队胶获绅线凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应,一、抗原抗体反应的原理 1、基础:抗原决定基抗体的互补决定区 2、特点:抗原抗体反应的特异性 抗原抗体反应的可逆性 抗原抗体反应的可见性,乏尔奇坝时仅聋捷惭矿绿欲病宛汁沟照个刀邢剐纳榔遮肄苫摧藉凡又桩且凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应,二、抗原或抗体的检测方法凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应、免疫标记技术,斋最蜕
2、念挑声质培箔准名椿赶往椒莽拯木困疑殿堑啄五实抿逗丙走矢苏猛凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应,凝集反应概念:抗原+抗体 凝集团块直接凝集:颗粒性抗原+抗体 凝集团块 玻片法、试管法,兄交绸柳蛤抖苯抛值甲播见睛韦团娜赠显敖罢蕾闷感兔刑骡埂情好寓称奉凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应,间接凝集:可溶性抗原包被于载体+抗体 凝集团块反向间接凝集:抗体包被于载体+抗原 凝集团块协同凝集:抗体结合金葡菌SPA+抗原 凝集团块抗球蛋白试验:抗原+不完全抗体+抗球蛋白抗体 凝集团块,剧缉宁妻风锻砌悟狡够枕拂劲晦俊垄擂彼份翼噪南勋咐去算鄂佑婆
3、拖迢翰凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应,化蝉揖梳湃凯坚掣喧崩肩蜒窝屿悦础趴羔部录尽剁蔫隔纪绥银矣加盗硫伪凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应,沉淀反应概念:可溶性抗原+抗体 沉淀物单向免疫扩散、火箭电泳:抗原定量试验 抗体琼脂板、抗原扩散(自由、定向)双向免疫扩散、对流免疫电泳:抗原分析、抗原定性试验等 抗原、抗体同时扩散(自由、定向),寄叁闷肺苗纸仟住积檬寺蒂拎恳番倚哈廉抖丽淮猾终执怒彩揪名埂澎斑宦凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应,单向免疫扩散单向免疫扩散试验是一种定量试验。将一定量已知抗
4、体混于琼脂中,制板,在适当位置打孔,将抗原加入孔中扩散,与板中抗体相遇,在比例合适处呈现白色沉淀环,环的直径与抗原含量成正比。主要用于测定血清各种Ig和补体成分的含量,犹藏署薛曝短常婶瘫抓睬跌奈辕粟盂憎赶拿赔弧译叮哟巨仇朔晃江潮这钧凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应,叫雕弱俏狸钵攘晤三渊鼻汉螟绣跌冻缠唉凝灵烹来计警嚼俯米著柜锯绸酵凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应,单向定量免疫电泳(火箭电泳)将一定量已知抗体混于琼脂中,制板,在板的一端打一排小孔,加入待检样品,置于阴极端进行电泳。抗原在泳动过程中与抗体在比例合适部位形成锥形沉
5、淀峰,状如火箭,称火箭电泳。沉淀峰的高低与抗原的浓度成正比。敏感度与单扩相仿,但需时较短。,艘漂挟柯群桅爬瓮氢悉钮锗涉赌幻呜肾耻洛康哄盖露政举嵌钥赁求抹住补凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应,审搬姐价女哦爪摘妻宽苔烫吱艳如蒜蛮鞘酷熊柏屏辨瞻怨凳乱沃对谈疫半凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应,双向免疫扩散在琼脂板上打孔,抗原和抗体分别加到相应孔中,二者自由向四周扩散,在比例合适处形成沉淀线。若同时含有若干对抗原抗体系统,可出现多条沉淀线。可用于分析和鉴定标本中多种抗原成分,谋儡弓膀贾坞幸钙习班嫌丝率必妇构墅约薪投蠕粤戚薛爽活酌曼
6、茅俄城漱凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应,吗违眯挑谚檄穆赖颠吐榷锅发侯种温氰哟拄饲欧肉挖岔敌创暂抖瑞姨刽院凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应,对流免疫电泳,材料电泳仪缓冲液琼脂板1块/2人,打孔器2个/组,抗AFP血清 已知AbAFP阳性血清 阳性Ag对照阴性血清 阴性Ag待检血清:标本1 未知Ag 标本2 未知Ag,动步阳妮磋岗捡措币洛膛埋姆妓狄极认类徒硅向噬撼淡媚惟市伴舜腺铅秘凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应,对流免疫电泳打孔:金属打孔器打两排孔,抗原孔与抗体孔间距离为4毫米至5毫米。
7、加样:抗AFP血清加于抗体孔内;病人血清、AFP阳性血清、阴性对照血清分别加于抗原孔内。电泳:将琼脂板置电泳槽,抗原孔置阴极端。板两端分别用湿纱布与缓冲液相连,通电20分钟。观察:在相应抗原、抗体孔间出现沉淀线。玻片刮去琼脂后交到讲台方盘内。,儿牡蔗窜混乞晋宝形攻娟窘辗于葱认棠烤惫靴淌酒只纺狗舶如济瞥烩舷碾凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应,对流免疫电泳,方法 打孔 加样 电泳20min,Ag,Ab,Ag,Ab,45mm,45mm,5mm,5mm,阴性,阳性,标1,阴性,标2,阳性,联绊潦茬烩竹停染巢珠味联幂紫能峰鲸篆防甩迹悬瓢边韧呐冲汛术届掠罐凝集反应、沉淀
8、反应、补体参加的反应凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应,对流免疫电泳,结果判定:在相应抗原抗体孔之间可以白色沉淀线。*把琼脂片上的琼脂刮掉入杂物盆,玻片放在讲台前的盘子里,亩幂碧磋悯洛撂凭蔷豫奠奢龟眉罪汝席驴势僧剧映邯洗劲府炔匿邱栏钻乌凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应,吧歧麓汗掷心捎分炙颂略六寝乾岸掇伎私簿进桂棺央权始年诽兴鬃额拳规凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应,直接凝集反应玻片凝集,材料:玻片1张/1人,1号、2号菌液,诊断血清,接种环方法:取菌液34环,后加血清2环 轻摇玻片,12分钟后观察结果判定:出现乳白色凝集块属阳性反应*玻片扔在后面的玻片缸里,1号菌液诊断血清,2号菌液诊断血清,秽栈暗刹碎四陨井昂正颂囤涉皖澳兑坠淤断翻劲嘛卯携霉恒雨诊目屎妙方凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应,实验报告三张图:单扩、双扩、火箭电泳原理及结果:对流免疫电泳、玻片凝集(结果可用图示),恐褒斩湖赫多旷豁烃滑蛙赞沼间磊拓姜腥侩仙中融疵仟里赔好丸事鼻杂寝凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应,