中药注射剂技术要求.ppt

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1、中药注射剂技术要求,目录,一、立项与审评原则,科学、合理、必要安全、有效、可控,更安全？更有效？更可控？,二、新药注射剂要求01概述,（1）非传统给药途径（2）传统用药经验对注射剂处方组成的配伍及配比的指导作用有限（3）充分研究说明其安全性、有效性和必要性，并保证可控性,高风险品种安全第一,注射给药剂最后选择,二、新药注射剂要求02立题依据,如果一个药不比已上市药品优越,不应该使其进入临床试验,否则是对受试人群的不公平。赫尔辛基宣言处方及临床使用方法的确定必须有相应的药学、药理和毒理研究结果的支持。遵循安全、有效、使用方便的原则，重点解决口服给药等难以解决的问题。完成临床试验现已申报生产的品种

2、，对立题依据方面不做进一步要求，但需要补充风险控制计划。,病人的健康是我们首先应该考虑的事情,二、新药注射剂要求03立题依据,开发中药注射剂，符合下列要求：（1）临床治疗及药物性质需要。与非注射给药途径比，充分说明注射给药途径在疗效或安全性方面的优势。（2）与相同适应症的中药注射剂比较，在有效性和安全性方面具有优势或者特色。（3）一类注射剂需提供药代动力学依据，二六类注射剂需进行药代动力学探索试验。（4）组方合理性研究，但同一药材工艺制成的多成分注射剂除外。（5）新注射剂包含旧注射剂且功能主治一致，需进行临床前和临床对比研究，安全性或有效性优之；并且优于同功能主治的主流注射剂。,中药注射剂开发

3、必将越来越难,二、新药注射剂要求04药学部分,原料法定标准的有效成分、有效部位、提取物、饮片、药材等。如无法定标准，随制剂一起申报。视情况完善原料的法定标准。纳入文号管理的原料，提供合法来源（证照发票和报告，供货协议不能少）药材一般应固定品种、药用部位、产地、产地加工、采收期等。炮制入药的说明炮制方法。,源头控制,二、新药注射剂要求05药学部分,辅料一般应有供注射用法定标准。批准上市的辅料，提供证明性文件。若使用未经SFDA按注射途径批准生产或进口的辅料，除下述情况外，均应按新辅料与制剂一并申请注册。（1）使用国外公司生产，并且已经在国外上市注射剂中使用，但尚未正式批准进口的辅料，在申请临床研

4、究时可暂不要求提供进口药品注册证，但须提供该辅料的国外药用依据、执行的质量标准及检验报告。在制剂批准生产前所用辅料应获得进口注册。（2）对于注射剂中有使用依据，但尚无注射用标准的辅料，必要时应对非注射用辅料进行精制使其符合注射用要求，并制定内控标准。应提供详细的精制工艺、内控标准及其依据。辅料与药物的相容性试验应重点考察以下情况：（1）新辅料与药物之间的相互作用；（2）辅料对性质不稳定药物的影响；（3）已有文献资料显示，辅料与药物之间可能存在的不良相互作用。（4）辅料与药物的相容性考察，应采用指纹图谱、含量测定、杂质等指标，重点考察加入辅料前后的改变。,间接控制,二、新药注射剂要求06制备工艺

5、,选择合理，参数明确，通过验证，保证三性。处方研究辅料数量少，用量少，相容性研究，影响因素，专用溶剂、稀释剂配伍稳定性研究灭菌工艺研究优先选择无菌保证水平较高的灭菌方法和条件，并进行灭菌工艺验证，采取措施降低微生物污染水平，确保SAL。如有充分依据证明申请品种不适宜终端灭菌且为临床必须的品种，可考虑选择滤过除菌、无菌生产工艺。通常无菌生产工艺仅限于粉针剂及部分小容量注射剂。工艺必须是中试规模以上。生产工艺文件的详细程度应可以让具备相应知识的相关药学人员能够生产出质量符合要求的产品，该文件可有利于保证不同批次产品质量的一致性，并可作为相关核查或检查的依据。可在“生产工艺”后面以附注的形式，明确对

6、产品质量有明显影响的相关要求，如原料、辅料、生产所用澄清剂、吸附剂，以及关键设备等。溶剂、脱色剂、澄清剂的选择注射剂要求，必要时精制，残留物订入标准,药品是生产出来的，过程控制,二、新药注射剂要求07药学部分,质量研究包括文献研究、化学成分研究、定性定量方法研究和生物质控方法研究等。注射剂成分相对清楚。应对总固体物进行系统的化学成分分析，有效成分制剂，单一成分含量应不低于90%。多成分制剂，总固体中结构明确成分的含量应不低于60%。结合产品的安全性、有效性和均一性，进行相应的质量控制方法研究。质量研究用样品应为中试规模以上。,质量控制,二、新药注射剂要求08药学部分,质量标准质量研究的归宿以药

7、材或饮片投料的，应制订中间体的质量标准。标准所用方法须经过方法学的验证，符合相应的要求。制法项应明确各工艺步骤及技术参数，明确所用辅料的种类、规格及用量等。检查项除应符合现行版CP一部附录制剂通则“注射剂”项下要求外，还应建立色泽、pH、重金属、砷盐、炽灼残渣、总固体、草酸盐、钾离子、树脂、蛋白质、鞣质、降压物质、异常毒性检查及刺激、过敏、溶血与凝聚试验等检查项目，注射用无菌粉末应检查水分。此外，有效成份注射剂应对主成份以外的其他成份的种类及含量进行必要的控制。,标准控制,二、新药注射剂要求09药学部分,质量标准指纹图谱原料（药材、饮片、提取物、有效部位等）、中间体、制剂均应分别研究建立指纹图

8、谱，包括指纹图谱的相关性研究。指纹图谱的研究应全面反映注射剂所含成份的信息，必要时应建立多张指纹图谱。明确结构的成份，应当在指纹图谱中得到体现，一般不低于已明确成份的90，对于不能体现的成份应有充分合理的理由。指纹图谱的评价指标相对峰面积、相对保留时间、非共有峰面积或者相似度等。也可根据产品特点，增加特征峰比例等指标及指纹特征描述，并规定非共有峰数及相对峰面积。指纹图谱的评价还可选用对照提取物对照的方法。有效成份制成的注射剂，主药成份含量应不少于90。多成份制成的注射剂，所测成份应大于总固体量的80，注射剂中含有多种结构类型成份的，应分别采用HPLC和/或GC等定量方法测定各主要结构类型成份中

9、至少一种代表性成份的含量，此外，应对未测定的其他成份进行研究。处方中含有毒性成份或已上市单一成份药品的，应测定其含量。含测指标均应规定其含量的上下限。,指纹控制,二、新药注射剂要求10药学部分,稳定性研究影响因素试验、加速试验和长期试验。稳定性考察项目应选择能灵敏反映药物的稳定性。性状、含量、pH、可见异物、无菌等。有效成份及其制剂应考察有关物质的变化。有效部位及其制剂应关注其同类成份中各成份的变化。临床前稳定性研究的考察时间应能够保证制剂在临床期间使用的稳定性。申报生产时应提供长期稳定性试验研究资料。,质量稳定可控是合格药品的先决条件。,二、新药注射剂要求11药理部分,药代动力学有效成分注射

10、剂全面研究ADME参数。多成分注射剂 PK探索性研究。必要时研究主要成分之间的相互影响。在新药研制过程中，药代动力学研究与药效学研究、毒理学研究处于同等重要的地位，已成为药物临床前研究和临床研究的重要组成部分。药代动力学研究,可指导临床确定给药途径、剂量和次数等，对临床试验方案的设计、临床合理用药有很大的指导意义。*申报临床研究的多成分中药注射剂应尽可能对其中的主要有效成分、毒性成分进行药代动力学研究。*已完成临床试验申报生产的多成分制成的注射剂，原则上不再要求补充动物的药代动力学试验研究。,ADME,二、新药注射剂要求12药理部分,药效学研究根据功能主治，选择合适的试验方法、试验动物、给药剂

11、量、给药途径和观察指标，全面考察药理作用和量效关系。（1）功能主治类似的公认有效的主流药物阳性对照研究；（2）口服或其他非注射给药途径对比研究，合理制备对照药物。（3）阐明注射给药的合理性。（4）如果复方制剂中含已上市注射剂，且功能主治接近，增加上市对照，注意剂量的合理性。注：参比口服给药样品制备工艺（1）合理性原则上同一般新药。（2）对于有效成分、有效部位而言，可直接以有效成分或有效部位的提取转移率为指标进行工艺优选。（3）对于源于临床的中药复方，可采用与临床用药相同的工艺，如汤剂可直接采用水煎工艺（需考虑合煎的配伍禁忌等）等，或按照新药研究的原则与方法研究后确定，此外，需关注已知有效成分的

12、提取情况以及工艺参数的合理性等。,疗效才是硬道理,二、新药注射剂要求13毒理部分,非临床安全性评价安全性评价必须在GLP试验室中进行。通常需做一般药理、急毒、长毒、制剂安全性试验（过敏、溶血、刺激等）。含首次注射给药的原料，应提供遗传毒性、生殖毒性研究资料，必要时提供致癌性试验资料。中药注射剂的原料虽使用过，但由于制备工艺不同导致物质基础发生变化的，需要提供遗传毒性、生殖毒性等试验资料，必要时尚需提供致癌性试验资料。原料为新的有效成分的注射剂，原料来源于新药材的注射剂，应在上市前完成全部的生殖毒性试验和遗传毒性试验。目前已获临床批件的受试物，如有必要，则应完成遗传毒性试验，并在上市前应完成I段

13、生殖毒性试验和至少一种动物的段生殖毒性试验；对于未完成全部生殖毒性试验的，批准上市时应在说明书中注明“本品没有完成全部生殖毒性试验，未观察对子代的安全性”；上市后，继续完成其他段的生殖毒性试验。急毒和长毒试验均应采用啮齿类和非啮齿类两种动物。制剂安全性试验需考察稀释剂的种类、给药浓度、给药速度等。含上市注射剂处方的复方注射剂，功能主治基本一致，增设阳性对照组，注意剂量可比性。,安全第一，生命至上,二、新药注射剂要求14临床部分,临床研究I期IV期临床研究。报产时，报送I期至III期临床试验资料和风险控制计划。风险控制计划包括：药品监测期内的期临床试验；药品上市后安全性和有效性进一步研究；临床应

14、用中的安全性及有效性观察计划和针对临床应用中可能发生的风险所制订的防范及应对措施。含上市注射剂处方的复方注射剂，功能主治基本一致，需进行临床对比研究，其疗效或安全性应明显优于已上市的注射剂。非注射给药途径与注射给药途径的给药剂量应通过各自的预试验来确定，不得采用有效剂量以下的剂量，对试验结果应进行全面的分析，以充分说明选择注射给药途径的合理性。对已获得临床研究批件，但在中药、天然药物注射剂基本技术要求正式公布时尚未完成期临床试验，或已经结束期临床尚未确定期临床试验方案的品种，应在期临床研究中执行中药、天然药物注射剂基本技术要求中相关要求。,疗效才是硬道理,二、新药注射剂要求15临床部分,I期：

15、单次给药和多次给药的耐受性和安全性考察；考察稀释液的种类、给药浓度、给药速度等；必要时，进行药敏试验；有效成分注射剂，进行药代动力学研究研究；多成分注射剂，进行药代动力学探索。II期在I期安全剂量范围内，应进行剂量的研究，并根据临床需要，继续观察稀释溶液的种类、给药浓度、给药速度等对安全性和有效性的影响。必要时，应继续进行过敏性试验（如皮试等）的观察和研究。,耐受性剂量探索,二、新药注射剂要求16临床部分,期：在期临床试验初步确定的安全、有效剂量的基础上，需要进一步与临床公认安全、有效的阳性治疗药物（注射剂）进行对比试验，与对照药物比较，试验药物在安全性或有效性方面应有明显的特点或优势。根据临

16、床需要，继续观察稀释溶液的种类、给药浓度、给药速度等对安全性和有效性的影响。必要时，应继续进行过敏性试验（如皮试等）的观察和研究。上市后：按照风险控制计划进行研究。,疗效确证评价阶段上市后风险控制,三、改给药途径注射剂要求01综述部分,改变给药途径注射剂包括：（1）非注射制剂改为注射剂（2）肌内注射与静脉注射（包括静脉滴注）及其他注射途径之间的相互改变。立题依据的要求与新的中药、天然药物注射剂相同。应从临床用药、药物性质等角度，进行风险效益评价，提供改变给药途径合理性的充分依据。,获益大于风险，方可以改变,三、改给药途径注射剂要求01其他部分,药学部分要求与新的中药、天然药物注射剂相同。药理毒

17、理部分要求与新的中药、天然药物注射剂相同。临床部分按新的中药、天然药物注射剂的要求对其有效性、安全性进行研究。现注射剂如与原制剂的功能主治基本一致，还要进行对比研究，并具有明显优势。,改变给药途径，其实和新药要求差不多,四、改剂注射剂要求,综述部分：不改变给药途径，大小针、冻干针间的互改从临床用药、药物性质等角度，进行风险效益评价充分论证改剂的合理性。药学部分药用物质基础没有改变，要求同仿制的中药、天然药物注射剂；药用物质基础有改变，要求同新的中药、天然药物注射剂。药理毒理部分药用物质基础没有改变，要求同仿制的中药、天然药物注射剂；药用物质基础有改变，要求同新的中药、天然药物注射剂。临床部分药

18、用物质基础没有改变，要求同仿制的中药、天然药物注射剂；药用物质基础有改变，要求同新的中药、天然药物注射剂。,改变物质基础？,五、仿制注射剂要求01药学部分,与被仿品种的处方组成、药材基原、药材产地、生产工艺（前处理、提取、分离、纯化，包括工艺参数）、制剂处方、规格剂量、功能主治等保持一致。1如不能确定其药材产地、工艺参数细节、制剂处方等与被仿品种一致的，应进行对比研究，以保证与被仿制品种质量的一致性。2所用辅料应符合注射用要求，必要时应完善其质量标准。原标准中明确辅料种类、规格及用量等的，一般应与原标准相同。3质量研究和质量标准在原则上与新的中药、天然药物注射剂要求相同。指纹图谱应与已上市同品

19、种一致，并应能全面反映注射剂中所含成份。4参照中药、天然药物稳定性研究技术指导原则进行稳定性研究。仿制药的稳定性应不低于已上市同品种（对比研究）。,一颗随时可能爆炸的炸弹,五、仿制注射剂要求02药理临床部分,药理毒理部分申请仿制的中药、天然药物注射剂，如结构明确的成份占总固体90%以上的，可仅提供过敏性、溶血性、刺激性试验资料。其他注射剂，则需提供一般药理学、急性毒性、长期毒性、过敏性、溶血性、刺激性等安全性试验资料。临床部分按新注射剂要求完成I、III期临床试验对被仿品种的全部功能主治（适应症）应进行规范的临床试验，以充分观察其人体安全性和有效性。,仿制对比研究,六、注射剂补充申请要求01,

20、1增加适应症：提供相关的非临床药效学试验资料根据用量或疗程，提供相关的安全性试验资料应进行I、II、III期临床试验，以充分观察人体安全性和疗效。如不增加用量、不改变用药人群，可仅进行II、III期临床试验。如增加用量或延长疗程等，还应进行期临床研究。用量和疗程不变的，在临床研究前完善【检查】项内容，其他质量控制内容可在临床研究期间完成。2改变工艺：若药用物质基础没有改变，要求同仿制的中药、天然药物注射剂若药用物质基础有改变，要求同新的中药、天然药物注射剂。,中药注射剂无小事,六、注射剂补充申请要求02,3改变用法用量：原则上需进行I、II、III期临床试验，如不增加用量，用法不变，可仅进行I

21、I、III期临床试验。根据用法用量的改变情况，提供非临床安全研究资料。4改变用药人群：需进行I、II、III期临床试验。必要时需进行非临床安全性研究及不同人群的人体药代动力学研究。,补充申请，谨慎小心,六、注射剂补充申请要求03,5增加规格：若申请增加的药品规格与同品种上市规格不一致，应当遵循科学性、合理性、必要性的原则，提供充分的立题依据，并视情况提供相关研究资料。（1）浓度没有改变的增加装量规格，即注射剂成分没有发生改变，仅是装量的改变。（2）浓度规格的改变，即注射剂中药物浓度发生了改变，这类情况比较复杂，有单成分注射剂浓度的变化，多成分注射剂浓度的变化；也有伴随辅料或工艺改变等情况。需提

22、供溶血、刺激性等安全性研究资料，并视浓度变化带来的影响酌情进行非临床研究及临床研究。A：申请单位无所申请的给药途径规格，但有已上市规格品种，按仿制要求进行研究和申报B：在已上市品种中，无所申请的给药途径规格，按照改变给药途径要求进行研究和申报。6变更原料药来源要求同仿制的中药、天然药物注射剂。,变还是不变，是个问题,六、注射剂补充申请要求04,7变更注射用辅料如变更注射用辅料的种类或增加用量，要求同仿制的中药、天然药物注射剂。如变更注射用辅料的来源或减少辅料用量，应提供辅料标准、检验报告以及药物的相容性、稳定性等药学对比研究资料，必要时提供非临床及临床研究资料。8其他中药、天然药物注射剂的补充

23、申请根据补充申请的内容参照本技术要求提供相应的研究资料。,中药注射剂，一声叹息,七、标签包装说明书01,符合24号令规定和指导原则要求【成份】包括所有的药物成份和应用的辅料，根据批件及所附质量标准明确辅料。如质量标准中未明确所用辅料，则不能确认所用辅料。【功能主治】/【适应症】根据药物临床研究结果确定的药物适用的疾病范围、病情、分型分期、人群。改剂型或仿制的中药、天然药物注射剂注册申请也应该根据该药品的临床试验结果来确定。不能无临床依据地照搬原剂型的适应症。,合理用药,七、标签包装说明书02,【用法用量】用法中应该进行详细描述，包括临床应用前药物的配制、稀释的方法、稀释的溶液、稀释的浓度，药液

24、配制后的存放时间、使用前需要对药物性状的观察，滴注的速度、每次用药的间隔时间。对于新药，应要求提供配制后的存放时间的研究资料。对于补充申请中该项“药液配制后的存放时间”等不明确的，暂不要求。【不良反应】列出临床试验中全部肯定或可能与药物有关的不良事件。根据申请材料内容书写。对于有明确毒性成分的，应写明其情况。国家已确认的内容（如根据不良反应通报等）需在说明书中明确。,明明白白用药,七、标签包装说明书03,【注意事项】尽量全面地列出临床应用中可能出现的各种担忧包括必要的未进行研究的相关信息。如果未进行过特殊人群用药临床试验者，需要在此予以说明如本品未在孕妇及哺乳期妇女、儿童以及老年人中进行过临床

25、试验，因此，在孕妇及哺乳期妇女、儿童以及老年人中有效性和安全性用药无法确定临床试验中的排除病例标准，也需要在此予以说明或适当的表述要求同“不良反应”。【药物相互作用】应包括药物相互作用的内容。如无该项研究结果，需要特别注意说明无与其他药物混合或合并使用经验。,安全用药,七、标签包装说明书04,【临床试验】试验结果尽量表述清楚，不限于篇幅的限制。【药理毒理】包括非临床主要药效学试验及安全性试验结果。药效学方面为与临床疗效密切相关的主要药效试验结果。安全性方面应列出安全性试验中出现的对临床应用安全有参考意义的试验结果，注意描述动物种属类型、给药方法（剂量、给药周期、给药途径）和主要毒性表现等重要信

26、息，如未发现明显毒性、毒性靶器官，则不需列入。【贮藏】详细说明其贮藏方法，包括贮藏的条件。上市后，药品生产企业应根据上市后安全性及有效性结果，特别是不良反应和不良事件出现的情况，及时提出说明书的修订申请。,放心用药,八、无菌工艺验证常见技术问题01,一问：按照欧盟决策树的要求，不能达到121，15分钟灭菌，可选择F08的残存概率法。请问，若产品能达到121，12分钟灭菌，是否就不能选择121，10分钟，同样，能达到10分钟，就不能选择8分钟，都是F08的情况。答：从微生物杀灭的数学模型可知，在初始污染相同的情况下，灭菌F0值越大，无菌保证水平越高。因此，显然为降低产品残留微生物的风险，尽量选择

27、高的F0值是顺理成章的。二问：在产品质量稳定的条件下，均能满足121，8分钟和115，30分钟，哪个条件应该优先选择呢？答：不考虑产品理化质量稳定性，理论上这两种条件达到的F0值几乎相等，无所谓优选哪个。但实际生产中，还要考虑灭菌器内产品中热穿透的情况，灭菌器内不同部位的产品实际获得的F0值的差异，不同灭菌批次间产品的F0的差异等。应该选择热分布差异小，产品F0值差异较小的灭菌工艺。,如果可以，为什么不选高F0,八、无菌工艺验证常见技术问题02,三问：申报资料中的灭菌条件为“1012，灭菌30分钟”，这种表示法是否规范？答：暂不说灭菌条件为“1012，灭菌30分钟”是否规范，“1012，灭菌3

28、0分钟”本身不能称为终端灭菌，因“1012，灭菌30分钟”几乎不能计算F0值。灭菌条件的表示可以参照中国药典2005年版二部附录168灭菌法，12115min或11640min。四问：最终灭菌工艺的选择原则是首选F012，而不是F08；还是只要达到F08即可？答：可参考欧盟灭菌工艺选择的决策树。五问：同品种10ml、20ml注射剂，采取相同的灭菌方式是否合适？答：同品种10ml、20ml注射剂，可以采取相同的灭菌方式，但应进行热穿透试验，考察不同体积样品的热穿透是否有一致，同时考虑采用的灭菌方式应能保证大体积产品的无菌保证水平。,通过验证是关键,八、无菌工艺验证常见技术问题03,六问：选择最高

29、无菌保证水平的灭菌工艺，可能会与产品的质量，如有关物质、稳定性等方面有冲突，如何平衡这一矛盾？另外，国外上市的是粉针剂，国内申报时是否还需要进行灭菌工艺的选择研究？答：实际上，在进行灭菌工艺选择研究过程中就应该进行不同灭菌条件下样品质量变化的研究，选择灭菌工艺的过程也是平衡无菌保证水平和（样品质量）理化指标的过程，在产品有临床需求的情况下，灭菌工艺的选择应以其自身能达到的最高无菌保证水平为原则。对国外上市的粉针剂，国内申报时也应对其采用粉针剂型进行研究，如主药确系对热、对水分不稳定，则可以采用与国外相同的粉针剂；如果主药不是对热、对水分不稳定，则应根据主药的性质选择无菌保证水平高的剂型。七问：

30、决策树中残存概率法是否亦优先选择121的温度条件？答：不一定，要根据产品的稳定性确定，如果采用更高温度和更短的时间能满足残存概率法时，可能比较低温度，更长时间的灭菌条件对产品更有利。如果产品不能耐受121的高温，则可以降低温度，并保证微生物的残存概率小于10-6。,最高无菌保证水平,八、无菌工艺验证常见技术问题04,八问：对热不稳定药品（如蛋白质类、生物制品等），应该直接进行无菌生产工艺的验证。答：对热不稳定药品（如蛋白质类、生物制品等），首先应对采用的无菌工艺进行研究，是采用除菌过滤+无菌生产工艺，还是采用无菌组装工艺；然后再对无菌工艺进行验证。九问：是否在产品注册申报时就已形成本产品的完整

31、的工艺规程中规定的各项参数的验证？答：药品注册管理办法规定，申请人在申报“药品注册申请表”后，经药品审评中心审评符合规定的，通知申请人向药品认证管理中心申请生产现场检查，现场检查目的是确认核定生产工艺的可行性，同时抽取1批样品，并规定样品的生产应当符合GMP要求。由此可见，申报产品注册时，应对用于正式上市产品生产的工艺有了足够的认识。这种认识是建立在产品和工艺开发，扩产、设备和系统的验证以及验证批的生产整个过程上的。验证批的目的是要证明在规定的工艺参数的范围内，工艺过程能始终生产出合格的产品来。因此，在进行验证批生产前，应已充分了解并能控制工艺中各种关键的可变因素。,验证批生产,八、无菌工艺验

32、证常见技术问题05,十问：在进行灭菌工艺验证时，一般会放置一个校验的探头在灭菌柜控制探头旁边，这两者之间的温度差异有什么要求？是否应按校样标准，只允许0.5的偏差？答：一般来说:a：灭菌器自带的独立的记录探头与监控探头就应完成足够的验证数据，然后对存在的偏差作修正；b：验证所用的测温探头的精度应优于灭菌器自带的记录探头和监控探头；c：验证本身的作用之一是对灭菌器自带的监控探头和记录探头进行修正，以便正常使用时达到较为准确的温度值。D：目前没有找到“只允许0.5的偏差”的说法。十一问：如验证时的装载方式为半载或满载，在以后生产中处于满载和半载之间的是否需要验证？答：对于处于满载和半载之间的装载方

33、式，建议使用模拟产品填充使其达到满载，从而确保生产时的装载方式与验证时一致。,无菌验证,八、无菌工艺验证常见技术问题06,十二问：在同一条大容量注射剂生产线上，如果有一台灭菌柜，需要进行多个规格产品（如250ml,100ml）以及不同灭菌参数产品（比如灭菌温度和时间不同）的灭菌，那么在进行验证和再验证的过程中，如何进行热分布以及热穿透的验证设计？是否各种规格、各种灭菌条件均需分别进行验证？答：一般来说，各种规格、各种灭菌条件均需分别进行验证。不同规格混合装载的灭菌，除非能够确认很多的相关内容，否则不推荐应用。十三问：在对湿热灭菌器进行验证或再验证过程中，进行热分布、热穿透的验证时，如果柜内设置

34、12个或16个热电偶进行温度测试时，找到的冷点在3次验证中可能不同，如果出现这种情况该如何处理？答：一般来说，空载热分布的冷点应该是在确定的位置周围，否则就可能是设备、压力、空气置换不完全、蒸汽质量等原因引起。对于装载热穿透，大容量注射剂（LVP，100ml）冷点位于产品的几何中心和沿纵轴位于产品的底部，但需要验证确认。冷点的定位在小容量注射剂中并不典型，因为溶液加热的速率几乎与灭菌器相同。还有，容器的方向也会影响冷点的位置，当容器旋转或翻转时，可能不存在可辨别的冷点。如果装载不变，容量相同，蒸汽穿透不存在阻隔等，冷点仍然无法重现，则应检查设备、工艺、压力、蒸汽质量等方面可能存在的不确定性。,

35、冷点重现,八、无菌工艺验证常见技术问题07,十四问：满载热分布和空载热分布对于灭菌效果上体现出的意义有何不同？答：两项试验都是测量灭菌腔室的温度分布情况，还不反映产品内的温度和热效益的情况，还不能直接反映产品的灭菌效果。但腔室情况显然会影响产品内的情况。验证中依次进行空载热分布、满载热分布、产品热穿透试验。采用这种试验的主要目的是用尽量少的试验次数，尽可能地揭示客观情况。前道试验的结果为后道试验提供信息。十五问：满载热分布试验是用空瓶进行还是用装注射用水的输液瓶进行？答：满载热分布试验是用模拟样品进行。十六问：热穿透试验中的模拟样品是什么概念，是指实验室小批量样品吗？答：热穿透试验中的模拟样品

36、是指热穿透性能与真实样品一致的样品，不是实验室小批量样品。十七问：微生物挑战试验的生物指示剂的种类需要根据品种选择吗？如何选择？答：微生物挑战试验的生物指示剂的种类及选择可以参考中国药典2005年版二部附录169灭菌法。,热分布与热穿透,八、无菌工艺验证常见技术问题08,十八问：热穿透试验怎么做？答：热穿透试验的目的是确定灭菌室装载中的“最冷点”，并确认该点在预定的灭菌程序中获得充分的无菌保证值，即菌种残余量10-6及各检测点温度与灭菌室内平均温度的差值2.5。对于可能影响灭菌效果的操作情况的变更应做相应的验证，确认操作方法。例如：当在每个灭菌盘上增加不锈钢盖后，实际产品（溶液）内部的升温时间

37、要比不加盖时慢2分钟，因此要在灭菌程序设定时增加2分钟的时间。热电偶的放置与满载热分布试验规程一致，将标准热电偶放在灭菌溶液中心部位。十九问：灭菌前微生物污染水平的测定方法？答：滤膜过滤法是最常用的方法。使用前应通过验证。二十问：培养基灌装试验年度再验证每年两次，每次几批？答：对于某个产品的年度再验证，通常的做法是每年进行两次培养基灌装试验，每次一批。,再验证,八、无菌工艺验证常见技术问题09,二十一问：产品的微生物限度检测结果为0CFU，没有发现耐热微生物，那么验证过程中能否采用D值稍低的枯草芽孢杆菌作为生物指示剂进行验证？答：1）、微生物限度的检测结果和选择D值稍低的枯草芽孢杆菌作为生物指

38、示剂之间不存在因果关系。2）、根据提问者的问题，可以认为其采用的是残存概率法的灭菌工艺。对于残存概率法的灭菌工艺可以选择生物指示剂进行残存概率测试，仅仅是因为产品或包装本身不能承受过度杀灭，从而选择比较严格的过程控制，加上产品的初始菌数量控制，或者再加上除菌过滤工艺等等，然后选择生物指示剂进行灵敏度测试，测出平均含菌量N0，再进行不少于4个梯度菌量、足够批次、数量的产品的灭菌前后微生物限度测试（若必需，对不同灭菌时间也要进行测试），寻找并得到大于下降6个对数等级的状态参数，在满足F0值在812之间的条件下，从而推算出D值。二十二问：灭菌前微生物污染水平的测定方法？答：滤膜过滤法是最常用的方法。

39、使用前应通过验证。,降低灭菌前微生物污染水平,八、无菌工艺验证常见技术问题10,二十三问：请问灭菌前微生物污染水平和耐热性（D值）的测试方法？答：微生物污染水平通常采用滤膜过滤法截留微生物，再将滤膜转移到固体培养基表面，培养并作微生物计数。应注意过滤的体积、截留微生物的数量，保证足够的检出率（足量的过滤量）和可计数性（截留的微生物太多就没法计数了）。每批产品都进行的耐热性测试并非D值测试，而是所谓沸腾试验一种定性试验。将截留了微生物的滤膜放入装有同种产品药液的试管中，进行水浴煮沸15分钟或更长时间，对该药液进行无菌检查，如阴性则通过，呈阳性，说明污染菌是耐热菌，则需要进一步测D值。99%以上的

40、检品是非耐热菌。D值测定相当复杂，请参考药品生产验证指南（蓝皮书，国家药监局编）第三篇第三章第一节，有详细介绍。二十四问：对于过度杀灭法是否需要进行灭菌工艺验证？残存概率法的产品研发工艺研究与实际生产中验证有何区别？答：当然需要验证，欧盟CGMP附录第83条:所有的灭菌工艺都应验证。残存概率法是灭菌工艺的设计，本身就需要验证确认。,所有灭菌工艺皆需验证,八、无菌工艺验证常见技术问题11,25问：怎样根据D值计算接种量？答：芽孢接种量的计算：Ni10Do(lgNo+6)/Di 其中Ni为生物指示剂耐热孢子接种数量 No为预定产品中灭菌前污染微生物的限度 Do为污染微生物允许的最大D值 Di为生物

41、指示剂耐热孢子在产品中的D值26问：对于选择残存概率法最终灭菌的产品，如果灭菌前每批检测微生物限度，而微生物限度检测时间为72小时，而实际连续生产的生产周期远远短于72小时，其检测结果仅是对灭菌后产品无菌保证水平的参考吗？答：显然灭菌前微生物含量检查的结果远远滞后于生产过程，其目的不是用于对当批产品的中间控制。该检查的意义主要有二：第一，用于评价该批产品的无菌保证水平；第二，长期积累了多批灭菌前微生物含量的数据后，可以对生产系统在灭菌前的各工艺步骤的微生物污染状况作整体的评估，从而指示该生产体系是否有效地将微生物污染控制在很好的水平，是否需要进行改进等。,必要的灭菌前微生物检查,八、无菌工艺验

42、证常见技术问题12,27问：请问微生物种类、数量研究的方法？所需的设备？如果采用残存概率法，是否在生产过程中必须对微生物水平进行测定，如果引入将增加多少成本？作为大输液生产企业，采用残存概率法，是否要建立专门的微生物实验室检测灭菌前药液微生物污染水平？答：微生物污染的程度即数量的检查可以按照药典收载的微生物限度检查方法进行；微生物的种类即鉴别可以从以下几方面依次展开：1）通过肉眼观察菌落形态；2）镜检形态和运动性；3）一般生化试验：革兰氏染色或3KOH试验；4）生化鉴定（即API试验）鉴别到种。采用残存概率法时，应该检测产品灭菌前微生物污染水平，包括污染菌的煮沸试验（如100，15分钟）和微生

43、物计数。注射剂生产企业，微生物实验室是必不可少的，其基本功能应包括原辅料的微生物限度检查，产品灭菌前微生物污染量检查，产品无菌检查，细菌内毒素检查，生产环境动态检查（空气微粒、浮游菌和沉降菌计数）。有条件的实验室还可开展以下工作：微生物的鉴别试验（建议企业集团的中心实验室开展API鉴定），生物指示剂的标定（即D值测定，建议企业集团中心实验室开展该项工作）。,微生物实验室,八、无菌工艺验证常见技术问题13,28问：过度杀灭法是否确定不需进行微生物挑战试验？答：过度杀灭法的内涵是产品中的微生物下降12个对数，微生物挑战试验是证明微生物的残存概率不大于10-6，故过度杀灭法可以不进行微生物挑战试验。

44、29问：最终灭菌产品是否每个申请注册的品种都要单独进行设备验证？是否可以只进行一次设备验证，其它品种可以通用？设备验证资料是否可不附在品种验证资料中，只作为存档备查？答：最终灭菌产品不一定每个申请注册的品种都要单独进行设备验证，如果注册品种采用相同的或更低的灭菌条件，可以只进行较高温度灭菌条件下的设备验证；针对品种灭菌条件的设备验证资料也应附在品种的验证资料中。30问：非溶液剂型、半固体或粉针剂的灭菌工艺可以计算出类似于F0值的数值吗？可以计算出SAL吗？具体规定是多少？答：非溶液剂型、半固体或粉针剂的灭菌工艺不可以计算出F0值，但可以计算出SAL，具体可参考欧盟灭菌工艺选择的决策树。,过度杀

45、灭VS残存概率,八、无菌工艺验证常见技术问题14,31问：关于培养基灌装试验，是针对生产线验证的，还是针对申报产品进行的（每个产品都要灌装三批验证），请问：（1）生产线验证能否代替申报产品的灌装试验（同类品种）？（2）采用何种培养基，硫乙醇酸盐和改良马丁两种培养基都要吗？（3）GMP检查中不同包装规格是否都需要进行三批次的灌装试验？答：（1）培养基模拟灌装试验应根据产品、包装规格、包装形式的不同而分别进行。例如，如果产品是粉针剂，则培养基模拟灌装试验通常会先灌装液体培养基，然后再灌装模拟产品的无菌粉末（如PEG无菌粉）；如果无菌注射液或冻干粉针剂，则只需灌装液体培养基即可；如果包装的规格有2m

46、l、5ml、10ml几种，则即便是同一种产品也需要分别进行各自规格的培养基模拟灌装试验；如果包装的形式有西林瓶或者其他形式（如预充式注射器、安瓿），因采用不同生产线需要分别进行培养基模拟灌装试验。在具体工作中，考虑到培养基模拟灌装试验实际上是对整个生产线的系统验证，包括生产设备、环境和人员操作等，所以，如果进行培养基模拟灌装试验采用最差条件，即瓶子最大，灌装速度最慢，人员最多，时间长于正常生产的时间等，则也可以不必进行每个产品、每个规格的培养基模拟灌装试验；如果不是最差条件，则应根据产品、包装规格、包装形式的不同分别进行。（2）一般采用广谱的培养基，能促进革兰氏阳性、阴性、酵母菌和霉菌的生长，

47、如大豆胰蛋白胨培养基，厌氧培养基只在特殊情况下使用。（3）只有在首次验证时，每种规格需要连续成功进行3次培养基模拟灌装试验，以后每年进行2次，每次进行1批次培养基模拟灌装试验即可。,最差条件培养基灌装试验,八、无菌工艺验证常见技术问题15,32问：中国药典2005年版无菌培养时间已变为14天，培养基模拟灌装后在两个温度的培养试验是否也需延长？答：总培养时间不得少于14天，可以分成两个温度（22.5度和32.5度）各培养至少7天，也可以一个温度（22.5度）直接培养。33问：培养基灌装试验合格标准置信限为95%，染菌概率0.1%，请具体解释一下使用哪个统计方法，如何计算查表得出。答：有关计算公式

48、的详细说明，可参照SFDA药品安全监管司和药品认证管理中心组织编写的药品生产验证指南（2003）中有两种计算方法。一种是采用泊松分布的近似值计算公式，即P（X0）=1e-Np0.95其中，P为置信限，N为模拟分装瓶数或批量，p0.1（污染概率）另一种计算方法是更为精确的二项式计算公式，即P(X0)=1（1X）N其中，P为置信限，N为模拟分装瓶数或批量，X=0.1（污染概率）在书中的第259页，列有“可信限为95%时一次模拟分装中模拟分装量、污染数量与污染概率关系表”，可从该表查出模拟分装数量与污染数量的对应数值。34问：培养基灌装试验中，培养基灭菌后、灌装前，再经滤膜除菌过滤，以观察滤器在消毒

49、安装过程中的无菌效果，是否可行？答：培养基灌装试验是对包括无菌过滤在内的所有步骤的无菌性保证程度的考察，推荐配制培养基后直接用于无菌过滤及随后的灌装过程，实际操作中要注意防止不溶性颗粒堵塞滤器。,污染概率,八、无菌工艺验证常见技术问题16,35问：粉针剂、冻干粉针、小容量注射剂工艺验证的异同点中培养基灌装程序的差异主要是指什么，具体怎样做，起始点是哪里，从哪里开始到哪里结束？答：对于无菌粉针剂，培养基灌装的形式有一些特殊性，如要准备模拟的无菌粉末，分装后用注射器将液体培养基加入瓶中；或将无菌培养基粉末分装，结束后用注射器加入无菌注射用水。但目的仍是考察整个无菌分装过程的无菌保证程度。36问：如

50、何进行容器密封性验证？答：容器密封性验证常采用物理和微生物学检测手段。物理检测有许多优点，如灵敏度较高、使用方便、检测迅速及低成本等。在产品有效期内，均可使用物理检测方法来确定包装完整性是否符合规定要求。进行包装完整性检测的一个重要原因是确保无菌产品始终保持无菌状态。因此，在产品包装的研发阶段，应考虑采用微生物侵入试验，或采用经验证过的并且比微生物检测更为有效的物理试验方法，来检测产品包装的完整性。但是，对效期内产品的稳定性试验来说，因进行微生物侵入试验较为困难，故建议采用物理检测方法。微生物侵入试验是对最终灭菌容器密封系统完好性的挑战性试验。在验证试验中，取输液瓶或西林瓶(小瓶)，灌装入培养