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1、精品论文逍遥散及其组方对抑郁模型小鼠的影响1张崇燕，唐永鑫，曾南，梁珂，卢陆飞成都中医药大学，四川成都（611137）E-mail: zengnan966摘要：目的：通过比较逍遥散及其组方抗抑郁作用的差异，明确主要配伍药物，精简复方。方法：采用小鼠自主活动测定、悬尾模型及其强迫游泳模型观察逍遥散及其拆方的抗抑郁作 用。结果：逍遥散全方、柴胡、归芍、柴归芍、去柴胡、去归芍组均能减少行为绝望抑郁小鼠不动时间，而去（柴归芍）组却未表现出作用。其中，柴胡优于归芍、去柴胡弱于去归芍，柴归芍优于柴胡、归芍，且全方不及柴归芍。此外，所有药物组均无中枢兴奋作 用。结论：柴胡、白芍、当归为逍遥散主要药物。关键词
2、：逍遥散；组方研究；抗抑郁逍遥散出自宋代太平惠民和剂局方，全方由柴胡、白芍、当归、白术、茯苓、薄 荷、生姜、甘草 8 味药组成，具有疏肝解郁，养血健脾的功效1。近来，关于逍遥散用于抑 郁症治疗的临床、实验报道逐年增多，但对于其组方的研究却鲜有报道。基于此现状，本研 究采用小鼠行为绝望抑郁模型，通过比较逍遥散及其组方对此模型的影响，以期为明确主要 配伍药物，精简复方提供一定的实验依据。1. 实验材料1.1 实验动物ICR小鼠，雄性，体重25-30g，由四川省医学科学院实验动物研究所提供（动物合格证 号：scxk（川）-2004-15）。自然昼夜节律光照，自由饮水、摄食，于适应2天后进行实验。 实
3、验场地为国家中医药管理局成都中医药大学中药药理三级实验室，编号：TCM2032043。1.2 仪器ZZ-6 小鼠自主活动测定仪(成都泰盟科技有限公司)；悬尾实验箱(自制，长40cm、宽30cm、高40cm)；游泳玻璃杯（高25cm、直径18cm）；温度计（100量程）；计时秒表。1.3 药物逍遥散按方剂学1比例调配：柴胡 9g、当归 9g、白芍 9g、白术 9g、茯苓 9g、薄 荷 1.5g、生姜 9g、甘草 4.5g。上述药材均由成都中医药大学附属医院老中医门诊部提供， 经鉴定均为药典正品药材。各药物组（包括柴胡、归芍、柴胡归芍、逍遥散去柴胡、逍遥 散去归芍、逍遥散去（柴胡归芍）、逍遥散全方
4、，共 7 个组）按组别要求取相应药物，以6 倍量水浸泡 30min，加热煮沸后文火煎煮 40min，过滤药液，再按同法煎煮 30min、20min， 合并三次滤液，水浴 80浓缩至所需浓度，置于 4冰箱保存备用。盐酸阿米替林，常州四 药制药有限公司生产，批号：0702134。1本课题得到成都中医药大学校基金重点项目（编号：ZRZD200503）的资助。- 5 -2. 实验方法2.1 小鼠自主活动实验健康雄性 ICR 小鼠根据体重分层随机分组，分为 9 个组：空白组，柴胡组、归芍组、 柴胡归芍组、逍遥散去柴胡组、逍遥散去归芍组、逍遥散去（柴胡归芍）组、逍遥散全 方组、阿米替林组。小鼠按照分组灌胃
5、给药，空白组每日给予蒸馏水，阿米替林组剂量为10mg/kg，其余药物组剂量均以人用量 30 倍计。每天一次，连续 7 天，末次给药或蒸馏水1h 后，将小鼠放入 ZZ-6 小鼠自主活动测定仪中，适应 2min，观察并记录随后 4min 内小鼠 的活动次数。2.2 小鼠悬尾实验（tail suspension test, TST）分组及给药方法同 3.1。参照 Nishizawa 等2方法并稍加改进。末次给药或蒸馏水 1h 后， 将小鼠尾端（距尾尖 1.5cm 处）用透明胶带固定于悬尾箱水平金属棒上，使其呈倒悬状态， 头部离箱底约 30cm，适应 2min，观察并记录随后 4min 内累计保持不动
6、状态的时间。2.3 小鼠强迫游泳实验（force swimming test, FST）分组及给药方法同2.1。参照Julio等3方法并加以改进。各组小鼠于实验前24h进行15min 游泳训练，末次给药或蒸馏水1h后，将小鼠头部朝下放入游泳玻璃杯（锡箔纸包裹杯外壁以 遮挡小鼠视线、减少外界干扰），水温为2325。适应2min，观察并记录随后4min内小 鼠累计保持不动状态（小鼠在水中停止挣扎，或呈漂浮状态, 仅有细小的肢体运动以保持平 衡）的时间。2.4 统计学处理应用 SPSS13.0 统计软件，数据以 X S 表示，各组数据呈正态分布进行单因素方差分 析（one-way ANOVA），非正
7、态分布进行 K-W 检验。3. 结果3.1 逍遥散及其组方对小鼠自主活动的影响与空白对照组比较，逍遥散及其组方、阿米替林组共 8 个剂量组小鼠的活动次数、站 立次数均无统计学差异（p0.05），表明各组药物在受试剂量下对小鼠自主活动无明显影响。 结果见表 1。表 1 逍遥散及其组方对小鼠自主活动的影响（ X S）组别动物（只）剂量(g/kg)活动站立空白1585.1114.0038.0015.03柴胡154.5102.2927.5540.8215.36归芍154.585.6725.1237.8315. 08柴归芍159.081.8926.5734.3919.58去柴胡1513.578.3821
8、.1636.0013.96去归芍1521.086.3824.8135.0620.39去（柴归芍）1516.579.7128.9437.1779.69全方153088.0021.3536.9414.81阿米替林150.0183.1915.5745.2517.413.2 逍遥散及其组方对小鼠悬尾实验的影响与空白组比较，柴胡、归芍、柴归芍、去柴胡、去归芍、逍遥散全方、阿米替林组 均明显减少 TST 中小鼠不动时间（p0.05）。数据以（实验组动物数据/对照组均值）100%，即以对照组的相对值表示。结果见表 2。表 2 逍遥散及其组方对小鼠悬尾实验的影响（ X S）组别动物（只）剂量(g/kg)不动时
9、间(100%)空白15100.0032.31柴胡154.547.8525.15 *归芍154.554.6031.44 *柴归芍159.050.0827.53 *去柴胡1513.562.8024.04 *去归芍1521.056.4527.08 *去（柴归芍）1516.599.3045.95全方153071.1334.89 *阿米替林150.0156.9550.06 *与空白组比较，* p0.01。3.3 逍遥散及其组方对小鼠强迫游泳实验的影响与空白组比较，柴胡、归芍、柴归芍、去柴胡、去归芍、逍遥散全方、阿米替林组 均能明显减少 FST 中小鼠不动时间（p0.05）。柴胡缩短 FST 中小鼠不动时
10、间的作用优于归芍药对（p0.05），而全方去掉柴胡（也即去柴胡）以后，作用就不及去归芍（p0.05）。数据以（实验组动物数据/对照组均值）100%，即以对照组的相对值表示。结果见表 3。表 3 逍遥散及其组方对小鼠强迫游泳实验的影响（ X S）组别动物（只）剂量(g/kg)不动时间（100%）空白15100.0012.39柴胡154.540.2619.94 * *归芍154.559.3415.35 * *柴归芍159.032.6218.02 * *去柴胡1513.559.4712.43 * *去归芍1521.042.5119.91 * *去（柴归芍）1516.591.5719.39全方1530
11、62.2424.65 * *阿米替林150.0138.6124.94 * *与空白组比较，* p0.001。4. 讨论抑郁症作为一种常见的情感性精神障碍，在中医上属于“郁症”的范畴，认为“郁证未有 不伤肝者”，因此多采用疏肝健脾的治法4。逍遥散出自宋代太平惠民和剂局方，具有 疏肝解郁，养血健脾的功效，全方由柴胡、白芍、当归、白术、茯苓、薄荷、生姜、甘草8 味药组成。作为中医调和肝脾的经典方剂，逍遥散的现代临床应用范围非常广泛，对消化系 统、中枢神经系统，内分泌系统等均有影响5。陈晓天等6通过整理与分析十余年来有关逍 遥散的300余篇临床报道, 结果发现逍遥散在精神神经系统疾病中的应用几率较高,
12、 且疗效 较好, 其中最常见的病症是抑郁性精神症, 能明显改善患者精神状态，使其情志舒畅、心情 愉快。抑郁症动物模型的复制是研究抑郁症及其治疗药物的关键，小鼠悬尾实验（TST）和强 迫游泳实验(FST)作为行为绝望抑郁模型，是经典的抗抑郁药筛选、评价模型，具有简单、 快捷、敏感的特点。两者以不动时间作为判断指标，反映了小鼠的情绪低落以及绝望状态， 可被临床有效的抗抑郁药及一系列抗抑郁治法减少，且不受抗焦虑药影响。但是，除了抗抑 郁药，中枢兴奋药也可明显缩短不动时间。本研究采用 TST 及 FST 这两种模型观察逍遥散及其拆方对抑郁状态小鼠行为的影响， 结果显示，柴胡、归芍、柴归芍、去柴胡、去归
13、芍、逍遥散全方、阿米替林组均能明显缩 短 TST 及 FST 中小鼠不动时间，而去（柴归芍）组对不动时间没有影响，表明逍遥散及 其各组方，除开去（柴归芍）组，均具有抗抑郁活性。而空白组与去（柴归芍）组两者 之间比较无统计学意义，提示逍遥散中佐使药单用无效。对于柴胡优于归芍、去柴胡弱于去归芍的实验结果，TST 显示趋势表现，而 FST 具有 显著性差异，且去（柴归芍）在两项实验中均显示无效。此外，较柴胡单用以及归芍药对 配伍应用，柴归芍组（也即柴胡、当归、白芍三者合用）表现出一个协同的作用（TST 中具趋势、FST 中具显著性差异）。综观 TST 及 FST 这两个实验的结果，一定程度上肯定了
14、柴胡在逍遥散中作为君药的地位，而当归、白芍居于臣药的地位。在 TST 与 FST 中，与空白组及去（柴归芍）组比较，逍遥散全方组、柴归芍组均 表现出抗抑郁作用，但是对于不动时间的缩短，全方组却不及柴归芍组。经推测，笔者认 为存在两个可能性原因：一方面在体外，药物煎煮过程中，诸多药物的存在可能使药物各成 分彼此之间发生化学反应上的变化，从而引起药液中有效成分浓度的变化；另一方面在体内， 逍遥散全方中，茯苓、白术、薄荷等佐使药的存在可能影响了柴胡、归芍的吸收，进而影响 了柴胡、归芍的生物利用度。这也在一定程度上提示了柴胡、归芍作为主要配伍药物，为逍 遥散全方进行复方精简提供了一定的可行性。为明确各
15、组药物是否具有中枢兴奋性的作用， 实验同时进行小鼠自主活动测定，结果表明各组药物对小鼠自主活动均无明显影响，从而提 示各组药物在实验剂量下无中枢兴奋性作用。目前中药复方药理学研究方法大体上分为全方研究及拆方研究两个大类7，本实验在全 方研究、验证药效学的基础上，按照君臣佐使的组方原则，采用拆方研究当中的撤药研究法 对逍遥散进行拆方研究。实验结果显示，柴胡、当归、白芍为逍遥散全方组成的主要药物。 本着疗效确切、价廉的原则，可将逍遥散全方去掉白术、茯苓等佐使药，将其精简为柴胡、 当归、白芍三味药。然而，仅凭本文目前研究结果，不能完全说明问题，今后应进一步深入 结合相关实验来进行研究，从而为逍遥散全
16、方的精简提供更为有力可靠的实验依据。参考文献1 段福津.方剂学M.上海:上海科学技术出版社.2002,60.2 Nishizawa K, Torii K, Kawasaki A, et al. Antidepressant-like effect of Cordyceps sinensis in the mouse tail suspension test. Biol Pharm Bull. 2007 Sep;30(9):1758-62.3 Rubio J, Caldas M, Dvila S, Gasco M, et al. Effect of three different cultiva
17、rs of Lepidium meyenii (Maca) on learning and depression in ovariectomized mice. J.BMC Complement Altern Med. 2006 Jun 23; 6: 23.4 郑高利,张信岳,孙丽文,等. 疏肝解郁颗粒抗抑郁作用的研究J. 中国中医药科技.2004,11(4):205-207.5 王晓强,高权国.逍遥散的药理研究进展J.中医药信息,2007,24(1):40-42.6 陈晓天, 史欣德.逍遥散在精神神经系统疾病中的应用概况J.江苏中医药,2007,39(6):66-67. 7 陈兰英,陈奇,刘
18、荣华,等.中药复方药理研究方法进展J.中国实验方剂学,1999 ,5(2):62-63.The effect of Xiaoyao Power and its components on the depressive mouse modelsZhang Chongyan, Tang Yongxin, Zeng Nan, Liang Ke, Lu LufeiChengdu University of Traditional Chinese Medicine, Sichuan (611137)AbstractObjective: To compare the difference of anti-
19、depression effect between the Xiaoyao Power and itscomponents on depressive mouse models, so to make clear the key components of Xiaoyao Power and simplify the compound. Methods: The auto locomotor activity detecting, tail suspension test and forced swimming test were adopted to observe the effects
20、of the anti-depression effect between the zhXiaoyao Power and its component. Result: Xiaoyao Power, single Chaihu, Danggui and Baishao compatibility, Chaihu with Danggui and Baishao compatibility, Xiaoyao Power without Chaihu, Xiaoyao Power without Danggui and Baishao significant shorted the immobil
21、ity time in the tail suspension test and forced swimming test in mice, while the Xiaoyao Power without Chaihu withDanggui and Baishao compatibility had no effect on the immobility time. In particular, single Chaihu is better than Danggui and Baishao compatibility, Xiaoyao Power without Chaihu is wor
22、se than Xiaoyao Power without Danggui and Baishao, Chaihu with Danggui and Baishao compatibility is superior to single Chaihu, Danggui and Baishao compatibility, Xiaoyao Power is inferior to Chaihu with Danggui and Baishao compatibility. In addition, Xiaoyao Power and its component had no influence on locomotor activity. Conclusion: Single Chaihu, single Danggui and single Baishao were the key components of Xiaoyao Power.Keywords: Xiaoyao Power; Compatibility research; Anti-depression.作者简介：张崇燕，女，1983 年生，硕士研究生，主要从事中药复方抗抑郁作用方面的研 究。
