实验四尿液理化及显微镜检查.ppt

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1、实验三 尿液分析,尿液一般检查,尿液理学检查:尿色 通明度 比密尿液化学检查:酸碱度 蛋白 糖定性尿液显微镜检查:细胞 管型 结晶要求:掌握尿液的常规检查;掌握各种实验的基本原理,会按规程操作;镜下能识别常见有形物;能观察和判断各项实验的正常和异常结果,一、尿液的理学检验,1 尿液颜色:直接倒入试管观察 报告方式:书明尿液色泽及深度,如淡黄色,深黄色,乳白色等 新鲜尿液为淡黄色;可呈现不同黄色,受到饮水,季节,生理,药物,病理等因素影响。如血尿分为 镜下,肉眼。棕色,咖啡色可能是肾前疾病,而血块、红色则为下尿道感染。2 尿液透明度:报告方式:清晰透明、微混、混浊,若有凝块等亦需注明 正常尿液:

2、淡黄色 清晰透明,3 尿液比密:比密计悬浮法 操作:将比密计轻轻放入已盛尿液(2/3高度)的比密筒中,并加以捻转,使其垂直悬浮于尿液中,待比密计平稳后,读取与尿液凹面相切的刻度。成人:1.0031.030 注意:尿液沿比密筒壁缓慢加入,不要产生气泡,二、尿液化学检验,1 pH值:尿试带法/PH试纸正常范围 4.58 受到药物、疾病等影响,pH降低:酸中毒,肾小球肾炎,痛风等。pH升高:尿路感染,呼吸性碱中毒等。,2 尿蛋白定性,1)加热乙酸法原理:加热可使蛋白变性凝固,然后加醋酸使得尿液的pH接近蛋白质的等电点,有利于蛋白质下沉。操作:2/3试管尿液,用试管夹夹住试管底部,倾斜试管使上1/3尿

3、液处煮沸,加5%乙酸2dd,再加热至沸腾,观察结果。结果判断:清晰-黑色背景下轻微浑浊+/-明显浑浊无颗粒+明显浑浊有较多颗粒+大量絮状物有部分沉淀+絮块状大量沉淀+评价:最为经典也最为准确的尿蛋白定性方法。特异性强,2)磺基水杨酸法 原理:磺基水杨酸在略低于蛋白质等电点的酸性 环境下,其阴离子与蛋白质氨基酸的阳离子结合,生成不溶性的蛋白盐而沉淀。操作:试管2支,各加ml尿液,一管对照另一管加20磺基水杨酸0.1ml,轻轻混匀1min后观察结果。结果判断:与对照管通明度一致-黑色背景下轻微浑浊+/-不加黑色背景可见浑浊但无颗粒+明显浑浊并出现颗粒+浑浊更明显出现絮状物+严重浑浊出现大量絮块+评

4、价:敏感,假阳性率高,适用蛋白尿的筛选。,3 糖定性试验:班氏试验 原理:葡萄糖含有醛基,在热碱性溶液中,能将班氏试剂的兰色硫酸铜还原为黄色的氧化亚铜,进而生成红色氧化亚铜沉淀。操作:ml班氏试剂,加热试管底部,煮沸,观察,再加尿液0.1ml,继续煮沸min,冷却后观察结果。结果判断:蓝色不变-蓝中略带绿无沉淀+/-绿色有少许黄绿色沉淀+较多黄绿色沉淀+土黄色浑浊大量沉淀+大量红棕/砖红色沉淀+评价:方法稳定,缺乏特异性。,三、注意事项,1、尿蛋白(1)尿pH 尿液偏碱时(pH9.0)可使加热乙酸法,磺基水杨酸法呈假阴性,而使干化学试带法呈假阳性;尿液偏酸(pH3)也会引起蛋白定性假阴性。因此

5、,实验前需先将尿液pH调至5.0-6.0。(2)离子强度 尿液离子强度很低时,可使加热乙酸法呈假阴性。因此对于限盐或无盐饮食的病人使用本法进行尿蛋白定性时,需滴加饱和氯化钠溶液1一2滴后再进行检查。,(3)药物 药物不仅影响磺基水杨酸法蛋白定性结果,对于化学试带法也会产生干扰。当病人应用大剂量青霉素钾盐、庆大霉素、磺胺、含碘造影剂时,容易使磺基水杨酸法出现假阳性;而使化学试带法呈假阴性。,(4)标本的污染 当尿中混有生殖道分泌物时,可使定性出现“假”阳性,为此很有必要指导病人清洁尿道口采集中段尿,或离心后测定上清液。(5)在规定时间内判读结果 加热乙酸法和磺基水杨酸法都要求立即观察结果。,2、

6、尿糖(1)标本留取 根据临床需要留取清晨空腹尿或餐后2h尿。(2)容器清洁 不含氧化性物质,否则易导致班氏法假阴性而试带法假阳性。(3)及时送检 标本不宜长时间存放,以免细菌繁殖造成假阴性结果。(4)干扰因素及处理(a)尿中尿酸、水杨酸盐等,可使班氏定性出现假阳性;而高浓度的VitC使试带法呈假阴性。(b)蛋白尿 影响班氏法的检查结果,应加热除去。(c)其它还原性糖类 会使班氏法定性结果高于试带法,此时按试带法结果报告。,镜检标本制作:取新鲜尿标本1015ml,以10001500rpm离心35分钟,取出离心管,用吸管慢慢将上清液弃掉,切勿弄混沉渣,最终留取0.2ml,混匀后滴在载玻片上,用18

7、mm18mm盖玻片镜检。镜检:观察时先用低倍镜观察有形成分全貌和管型,然后用高倍镜鉴定细胞成分,细胞用高倍镜观察10个视野,管型用低倍镜观察20个视野,记录结果,手工制片镜检,参考值,WBC5个/HPFRBC 3个/HPF扁平上皮或大圆上皮细胞少许/HPF通明管型偶见/LPF,细胞,1.尿红细胞正常人尿中排出红细胞数量甚少,24h尿中排出红细胞数多不超过100万。在新鲜标本沉渣中,典型的红细胞形态呈两面凹的圆盘形,淡黄色;在低渗的环境下,红细胞吸水胀大破裂,血红蛋白从细胞中逸出,成为一个大小不等的空环,则称影细胞(shadow cell);在浓缩尿液中,由于渗透压增高,细胞中的水分减少,红细胞

8、常表面带刺,呈皱缩状。,均一性红细胞,非均一性红细胞,泌尿系统疾病,血尿原因,泌尿系统各部位的炎症、肿瘤、结核、结石、创伤、肾移植排斥、先天性畸形,各种原因引起的出血性疾病如特发性血小板减少性紫癜;免疫性疾病如SLE,其它系统疾病,泌尿系统附近器官疾病,前列腺炎、精囊炎、盆腔炎,2.WBC,一般而言尿中白细胞是指分叶核粒细胞而言,新鲜尿中,白细胞外形完整,无明显的退行性变,浆内颗粒清晰可见,胞核不是非常清楚。炎症时,外形多不规则,结构模糊,浆内充满粗大颗粒,核不清楚,细胞常成团,界线不清,此时称为脓细胞。尿标本久置室温后,因pH、渗透压等改变,白细胞也可产生退行性变,难以与脓细胞区分开。因尿中

9、白细胞与脓细胞增多时意义相同,故区分白细胞与脓细胞没有多少实际意义。,白细胞,脓细胞,尿沉渣白细胞临床意义,1)泌尿系统炎症2)泌尿系统附近器官炎症3)肾移植术后排斥反应,(三)上皮细胞和异形细胞,由于新陈代谢或炎症等原因,泌尿生殖道的上皮细胞脱落后,可混入尿中排出。尿中的上皮细胞,有来自肾小管的立方上皮,有来自肾盏、肾盂、输尿管、膀胱和部分尿道的移行上皮,也有来自尿道中段的假复层柱状上皮,以及尿道口和阴道的复层鳞状上皮。,管型,管型是肾小管,集合中管状铸型样蛋白聚体。形成管型的必要条件是:原尿中有少量的白蛋白和由肾小管分泌的T-H蛋白是构成管型的基质;肾小管有使尿液浓缩和酸化能力,浓缩既可提

10、高蛋白质含量,又能提高盐类的浓度;尿液酸化后还能促进蛋白质的沉淀;要有可供交替使用的肾单位,正常两肾共约有200万个肾单位,但它们并非全部同时工作,而是交替工作与休息。管型的形成,需要让具备形成管型的尿液在肾单位的下部有足够的停滞时间,以便蛋白质得以浓缩、沉淀而凝聚成管型。当形成管型的肾单位的重新排尿时,已形成的管型即随尿排出。,(五)结晶,尿液中是否出现结晶,取决于这些物质在尿液中的溶解度、浓度、pH、温度及胶体状况等因素。当促进与抑制结晶析出的动态平衡被打破时,就可见结晶析出。结晶多来自饮食,一般无重要临床意义。,尿酸钠结晶,各种磷酸盐结晶,A and C:草酸钙结晶B and D:尿酸结晶,A:酪氨酸结晶,B:胱氨酸结晶 C:胆固醇结晶,D:胆红素结晶,

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