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1、实验十二 维生素C含量的测定,提出问题：,什么是维生素C？是性质的检测还是量的检测？,What is Vitamin C?,Vitamin C(also called ascorbic acid 抗坏血酸)is a water soluble vitamin found abundantly in many plants.Vitamin C is essential to growth in the human body because it is required for making collagen胶原.However,human cannot make Vitamin C.It has
2、 to be provided through diet.The disease that results from a severe deficiency in vitamin C is called scurvy坏血病.People with scurvy get bruises瘀伤 easily.Their skin and teeth also become very unhealthy.,维生素C，又称抗坏血酸，在植物的绿色部分及许多水果、蔬菜中含量丰富，是一类对物质代谢具有重要的作用的水溶性维生素。,参与氧化还原反应。（递氢体）参与体内羟化反应，Vc是羟化酶的辅酶。解毒作用,维生素
3、C是具有L系糖构型的不饱和多羟化合物，可分为还原型和氧化型两种形式。根据它具有的还原性质可测定其含量。,什么是维生素C？,生理特性：参与体内羟化反应，参与氧化还原反应，促进铁吸收防止贫血，解毒作用，改善变态反应，提高免疫力，人体不能自己生产。物理特性：水溶性化学特性:强还原性,维生素C的生物特性,水溶性强还原性,提取维生素C的水溶液通过氧化还原滴定法来测定维生素C。,测定的思路,DCPIP,The principle of this method is a titration with dichlorophenolindophenol(or phenol-indo-2:6-dichloroph
4、enol,also known as DCPIP).Ascorbic acid reacts with DCPIP,changing the color from blue to pink to colorless.They react in a 1:1 fashion,so if a known quantity of DCPIP solution reacts with the plant tissue extract,the quantity of DCPIP used gives a direct measure of the quantity of ascorbic acid pre
5、sent.,是性质的检测还是量的检测？,蛋白质的性质实验蛋白质的两性反应及等电点的测定 溶菌酶的提取蛋白质含量的测定蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳 细菌DNA的提取 UV测定DNA含量和纯度PCRDNA琼脂糖凝胶电泳 酶的动力学测定血清SGPT酶活性的测定,用标准品来测定样品,1.学习定量测定维生素C的原理和方法。,2.进一步掌握滴定法的基本操作技术。,3.了解水果及蔬菜中维生素C的含量情况。,【目的和要求】,（一）提取,称取松针2.0克(或其他水果210克)，剪碎，放在研钵中；,【实验方法】,加 2%草酸 5-10毫升，研磨成浆状；,滤纸过滤，滤饼可用少量 2%草酸 洗2-3次；,置滤液于50mL
6、容量瓶中,用2%草酸溶液定容并混匀。,2mL 标准Vc 溶液（0.1mg/mL）8ml 2%草酸,（二）标准抗坏血酸的滴定,根据所用染料的体积，计算出1ml染料相当于多少毫克(T)抗坏血酸。,分别以0.1%2,6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至淡红色，并保持15秒不褪色，即达终点。,10ml 2%草酸,（空白对照）,（三）样品的滴定,滤液2份，每份10mL,滴定方法同前。,ml 染料相当于 T mg Vc,（四）计算,VA:滴定样品提取液所用染料的平均毫升数VB:滴定空白对照所用染料的平均毫升数C:样品提取液总的毫升数D:滴定时所取样品提取液的毫升数W:待测样品的重量（g）T:为1ml染料能氧化抗坏血
7、酸的毫克数,Vc含量（mg/100g样品）,（VAVB）T D,C,100 W,1.整个操作过程要迅速，防止还原型抗坏血酸被氧化。,2.滴定所用2，6-二氯酚靛酚的量应在1-4毫升之间，超出或低于此范围，应增减样品液用量或改变提取液稀释度。,【注意事项】,3.微量滴定管要小心操作。,【实验报告】,实验标题姓名，班级，学号实验原理DCPIP(蓝色)+H+DCPIPH+(粉红色)DCPIPH+(粉红色)+Vc DCPIPH2+(无色)实验方法及简单步骤实验结果及计算,实验报告,ml 染料相当于 T mg Vc,实际测得每100g 松针 中的维生素C含量为 mg,选材：松针 样品量:g,讨论为了测得准确的维生素C含量，实验过程中都应注意哪些操作步骤？为什么？试简述维生素C的生理意义。实验设计中有什么可以改进的地方？,实验报告,
