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1、食品中合成着色剂的测定 色素提取,2012.4.18,课程目的：掌握食品中合成着色剂的测定原理；了解高效液相色谱的工作原理及操作方法。,着色剂：通过使食品着色后改善其感官性状，增进食欲的一类物质。天然着色剂：辣椒红、甜菜红、红曲米、胭脂虫红、高粱红、叶绿素铜钠、姜黄、栀子黄、胡萝卜素、藻蓝素、可可色素、焦糖色素等等。合成色素：用人工合成的方法从煤焦油中制取，或以苯、甲苯、萘等芳香烃化合物为原料合成的有机色素。包括苋菜红、柠檬黄、亮蓝、日落黄、诱惑红、赤鲜红等等。,合成着色剂的潜在危害致泻性、致癌性国际：JECFA制定各种合成着色剂的ADI我国：食品安全国家标准、食品添加剂使用标准（GB2760
2、-2011）现状：超量使用，使用工业色素、染料色素,方便、快速、准确地检测食品中合成着色剂，是对其进行有效管理的必要手段。测定手段（GB/T 5009.35-2003）：高效液相色谱法薄层色谱法示波极谱法其他：纸上层析、分光光度法,苋菜红、亮蓝、柠檬黄、日落黄,合成着色剂在饮料中的最大使用量（GB2760-2011）,一、实验原理,1.聚酰胺吸附法提取合成着色剂 聚酰胺（尼龙）通过氢键吸附着色剂，天然着色剂（影响测定）在酸性条件下被洗脱去除，合成着色剂在碱性条件下被洗脱收集，浓缩后上机测定。吸附洗涤解吸附浓缩上机,理化测定一般步骤：除杂质、收集目标物、调整浓度、上机,2.高效液相色谱法 高效液
3、相色谱法（HPLC）：是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。检测器：二极管阵列检测器,3.结果分析保留时间（定性）：根据样品中各物质被洗脱至检测器的时间差异来进行定性分析；峰面积（定量）：根据样品峰面积与标准品峰面积的比较来进行定量分析。,二、试剂与器材,二、试剂与器材,器材：烧杯、玻棒、吸管、移液管、G3漏斗、抽滤瓶*2、针筒、温度计、5mL玻璃离心管电子天平、水浴锅,三、实验步骤,取样、脱气 称取饮料20g，倒入50mL烧杯
4、，碳酸饮料用电炉加热除去二氧化碳。（已脱气）。2.色素吸附 称取聚酰胺3g，用少许PH4的水（70）调成糊状，加入待测样品，搅拌5min。,3.除杂质 组装好G3漏斗，将样品倒入漏斗，抽滤；PH4的水（70）洗涤3次，每次20mL（洗涤沉淀物）；甲醇-甲酸洗涤3次，每次20mL（洗涤天然色素）；400mL PH4的水洗涤。4.解吸附 更换抽滤瓶。用乙醇-氨水-水溶液洗涤三次（5mL、10mL、5mL），收集解吸液。5.样品浓缩 解吸液倒入蒸发皿中，80水浴蒸发至约2mL，以乙酸（一小滴）调节PH至6。收集样品至玻璃离心管，加水定容至5mL。,70 PH4水，糊状,加热脱气,更换抽滤瓶,目标物,6.上机测定 3000rpm离心5min，取上层10L进高效液相色谱。7.结果分析（1）保留时间（2）含量计算,X试样中着色剂含量（g/kg）A样液中着色剂含量（g）V2进样体积（mL）V1试样稀释总机体（mL）m试样质量（g）结果保留两位有效数字,
