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1、粗糙脉孢菌顺序四分子分析,实验目的,了解粗糙脉孢菌的生活周期及特性学习顺序四分子的遗传学分析方法计算基因与着丝点之间的距离,粗糙脉孢菌,粗糙脉孢霉(Neurospora.crassa)属于球壳目(Sphaeriales)的一种真菌,菌丝多核,附有分生孢子。野生型可分离出营养缺陷型突变株,有性生殖形成梨形的子囊果,产生包含8个子囊孢子的子囊。子囊孢子为黑色,直线排列。主要在土壤中和禾本料植物上,尤其在玉米芯和棉籽壳上,是食用菌菌种最大的危害之一。1927年BODodge 研究其生活史和孢子的形成1932年CCLindegren 把它用做遗传材料,用于分离交配型因子的研究1941年GWBeadle
2、和ELTatum分离出突变株,开展以基因与酶假说为基础的研究。后来分离出很多突变株,制作出与n=7的染色体数相对应的连锁图,被应用于突变机制、重组机制、基因的微细结构、互补性等的研究,为遗传学发展做了重要贡献。,粗糙脉孢菌作为遗传材料的优势后代多,样本大,统计分析误差小生活周期短易培养,易筛选突变型单倍体,不存在显隐问题孢子按顺序排列在子囊中,粗糙脉孢菌的生活周期,第一次分裂分离子囊,+-,非重组型子囊:目的基因与着丝粒之间未发生重组,+,+,+,+,+,+,+,+,_,_,_,_,_,_,_,_,MI MII Mt,顺序四分子分析用于着丝粒作图,+-+-+-+-+-+-+,重组型子囊:目的基
3、因与着丝粒之间发生重组,第二次分裂分离子囊,+,_,+,+,+,+,+,+,+,_,_,_,_,_,_,_,_,+,+-+,例子,基因与着丝点间距离的计算,其它分离子囊,基因转换:一个基因在联会过程中受到等位基因的影响而发生变化,基因转换总是伴随着染色体之间的交换。,实验材料,粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)野生型菌株,Lys+,接合型为A,分生孢子呈粉红色缺陷型菌株,Lys-,接合型为a,分生孢子呈白色,实验步骤,1、杂交接种与培养:野生型菌株(Lys+,A)缺陷型(Lys-,a)2、压片观察子囊:(注意观察时期)1)将附有子囊果的滤纸放入装有来苏尔溶液的培养皿中2)取一张载玻片,滴1-2滴来苏尔,用接种针将子囊果挑出,放在载玻片上3)盖上另一张载玻片,用手指压片,将子囊果压破4)显微镜观察,统计各种类型子囊的数量,每人统计200个左右的子囊,一个子囊果中散出30-40个子囊,实验报告,品系,性状,思考,假设在基因与着丝点之间发生了双交换,你的数据和计算结果会发生怎样的偏差?,在计算重组值的公式中,1/2的含义是什么?,