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1、原位杂交产品知识介绍,原位杂交 vs 免疫组化,原位杂交：核酸水平，碱基互补配对免疫组化：蛋白水平，抗原抗体反应杂交更具特异性,原位杂交的应用,没有好的抗体核酸量远多于蛋白蛋白为分泌型抗体背景高度着色,探 针 主 要 类 型,双链DNA探针：如HPV单链DNA探针：如EBER寡核苷酸探针RNA探针,EBER原位杂交原理,EBER：EBV编码的小RNA，胞核内EBER表达量很高，各期均可表达，最适用于临床诊断EBV感染原理：单链DNA探针与小RNA杂交定位：细胞核,EBER的临床应用价值（一）,诊断EBV感染性疾病，如：传染性单核细胞增多症、慢性活动性EBV感染 协助诊断特殊部位肿瘤，如：鼻型N
2、K/T细胞淋巴瘤，鼻咽癌协助诊断免疫缺陷状态下的淋巴组织增生，如：器官移植后淋巴增生性疾患 协助识别EBV阳性细胞，如：RS细胞,协助临床诊断：,EBER的临床应用价值（二）,EBV感染性疾病：抗病毒治疗，预后好器官移植后淋巴增生性疾患：早期预后较好EBV(+)的非霍奇金淋巴瘤比EBV(-)的预后差EBV(+)的霍奇金淋巴瘤比EBV(-)的预后好或无显著差异鼻型NK/T细胞淋巴瘤：预后很差,协助了解预后和指导治疗：,EBER原位杂交的主要过程,酶消化变性：55C杂交：37C杂交：单链DNA探针与RNA病毒互补配对显色：细胞核着色,图1 传染性单核细胞增多症,图2 经典霍奇金淋巴瘤,RS细胞,（
3、摘自周小鸽教授资料）,目录,背景知识临床应用价值原位杂交原理市场定位和优势,HPV产品的：,一般介绍,HPV（Human Papilloma Virus，人乳头瘤病毒）：双链DNA病毒，110种以上HPV可感染多种器官和组织HPV主要分为皮肤型和生殖道粘膜型男女生殖系统均可感染HPV宫颈HPV感染最为常见，举例介绍,HPV与宫颈癌的关系（一）,HPV主要分为高危、低危型高危型：16,18,31,33,35,45,51,52,56,58,59,68,73,W123B，与宫颈癌关系密切低危型：6,11等HPV平均感染期为8个月，大多数感染可以自然消退。HPV16,18最易感染，且感染期最长。,HP
4、V与宫颈癌的关系（二）,宫颈癌的发生率在女性恶性肿瘤中排第二位，仅次于乳腺癌。99.7%的宫颈癌患者体内存在HPV。好发部位：宫颈鳞状上皮和柱状上皮的交界处。,宫颈癌演变过程,尖锐湿疣，CIN I CIN II CIN III（重度非典型增生+CIS）早期浸润癌 浸润癌 概念：CIN：宫颈上皮内瘤，包括非典型增生和原位癌；病变 局限于上皮细胞层内，未突破全层 CIN I：轻度非典型增生（病变不到上皮1/3）CIN II：中度非典型增生（病变达到1/3，不到2/3）CIN III：重度非典型增生（病变达到2/3，但未及全层）及原位癌CIS：原位癌，病变累及全层，但未突破基底膜,宫颈病变的治疗,宫
5、颈癌术后存活率,宫颈浸润癌5年存活率：67%宫颈早期浸润癌：90%宫颈原位癌：100%,结 论,HPV是宫颈癌的主要致病因素 宫颈癌早期诊断、早期治疗意义重大 对宫颈病变不同阶段的诊断，决定了临床治疗方式、随诊方案,目录,背景知识临床应用价值原位杂交原理市场定位和优势,HPV产品的：,宫 颈 癌 筛 查,巴氏涂片（PAP涂片）CCT（电脑辅助宫颈细胞学检测系统）TCT（膜氏液基超薄细胞学检测系统）CCT、TCT都是PAP方法的改进HPV-DNA病毒学检测 TCT+HPV检测（HC）阴道镜下活检 即病理切片检查，严格说，已不属筛查范围,杂交捕获 vs 原位杂交,杂交捕获(HC)：定性，分型，临床
6、，筛查原位杂交(ISH)：定性，定位，分型，病理，诊断HC与ISH在应用上互补,HPV原位杂交产品的临床应用价值,病因学诊断协助病变分期作为预测因素指导疫苗应用,目录,背景知识临床应用价值原位杂交原理市场定位和优势,HPV产品的：,HPV原位杂交的主要过程,微波修复：暴露核酸变性：打开双链DNA探针、双链DNA病毒杂交：单链DNA探针与单链DNA病毒互补配对显色：细胞核着色,操 作 要 点,微波高火，30分钟变性95C，8分钟杂交：37C杂交液与盖玻片大小匹配条件匹配，充分洗涤,尖锐湿疣，H P V通用型（泰普试剂盒）,尖锐湿疣，HPV 6/11型（泰普试剂盒）,尖锐湿疣，HPV 16/18（
7、泰普试剂盒）,宫颈癌，HPV 16/18（泰普试剂盒）,宫颈癌，HPV 16/18（泰普试剂盒）,目录,背景知识临床应用价值原位杂交原理市场定位和优势,HPV产品的：,市 场 定 位,目标科室：病理科目标客户：病理医生产品目的：协助病因诊断及病理分期,产 品 类 型,高危型：16/18型通用型（28种亚型）低危型：6/11型,使 用 指 导（一）,生殖道炎症与尖锐湿疣的鉴别诊断及预后 选用：通用型（28种亚型）、16/18型、6/11型原位杂交 通用型（+）：尖锐湿疣 16/18型（+）：提示癌变趋向 6/11型（+）：病因诊断、提示预后,使 用 指 导（二）,尖锐湿疣、CIN I、CIN I
8、I、CIN III 首选：16/18型原位杂交 参考：通用型原位杂交（避免漏诊）目的：16/18型阳性，可提高病变诊断级别,使 用 指 导（三）,CIS、宫颈癌 首选：16/18型原位杂交或PCR分型 参考：通用型原位杂交（HPV阳性，辅助诊断）原因：采用PCR分型，防止因原位杂交灵敏度不够而 可能导致的漏诊,泰普HPV原位杂交 vs PCR,宫颈癌组织：原位杂交：20例（）PCR：20例（）（临床禁）免疫组化：15例（）5例（）,（北 医 病 理 系 提 供）,产品比较（HPV通用型）,我 们 的 优 势,通用型产品覆盖面广(28种亚型)，包含HPV52/58型；高危型灵敏度高；微波修复，容易掌握；除了普通规格外，还提供20人份的小规格产品，适合于科研及业务量不大的科室；在保证质量的前提下，价格最具竞争力；除了售后服务之外，还能够开展售前培训；强有力的研发队伍，能够做到产品的不断完 善和升级；,总 结,协助病理医生进行诊断指导临床医生确定治疗方案患者得到及时、最佳治疗,联 系 方 式,连瑞虹电话：010-80720071转607 13366267257,谢谢！,
