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1、红细胞血型血清学疑难问题,傅启华,红细胞血型系统,29个血型系统，260多个血型抗原 最具临床意义的：ABO,Rh,表49-1 红细胞血型系统的抗原、基因和染色体定位,ABO血型系统,ABO血型的形成,红细胞血型血清学的内容,红细胞血型鉴定不规则抗体筛选和鉴定交叉配血试验其它新生儿溶血病检查产前血型血清学检查溶血性输血反应实验室检查.,ABO血型鉴定,正反定型玻片法试管法 微量板法微柱凝胶试验（microcolum gel test，MGT）,不规则抗体筛选和鉴定,盐水聚凝胺试验抗人球蛋白试验木瓜酶试验柱凝集试验,交叉配血试验,盐水交叉配血试验不完全抗体交叉配血试验聚凝胺试验抗人球蛋白试验木瓜
2、酶试验柱凝集试验,新生儿溶血病检查,血型鉴定不规则抗体筛选和鉴定直接抗人球蛋白试验游离抗体和释放抗体检测,血型血清学疑难问题的范围,异常或矛盾的ABO或Rh血型鉴定结果意外的、复杂的、有临床意义的抗体检测和鉴定冷性或温性反应自身抗体的分析药物诱发的血清学异常结果分析疑难配血疑难输血反应的血清学分析阳性DAT标本的处理疑难HDN的血清学分析异常抗原抗体反应格局的分析红细胞以外各类成分输血的交叉配合试验红细胞以外各类成分抗体的检测和鉴定其他,解决血型血清学疑难问题的关键,原始记录、试剂、标本等资料的全面评估、分析和确认掌握技巧，对各种方法综合利用从病史中获得解决问题的珍贵线索,可引起血清学问题的一
3、些临床疾病,DAT阳性 类风关多凝集现象 细菌感染A/B抗原表达减弱 白血病ABO异常 卵巢囊肿获得性B抗原 细菌感染、结肠癌、肠梗阻Kell血型系统抗原抑制 慢性肉芽肿病溶血 PNH、红细胞酶缺乏、过度加热温性自身抗体 癌、HLE冷性自身抗体 冷凝集素疾病、淋巴瘤、梅毒、病毒感染串钱状凝集 多发性骨髓瘤ABO同种抗体缺乏或减弱 低（无）丙种球蛋白血症免疫性ABO抗体 新生儿、妊辰自身（同种）抗N 血液透析病人 HLA抗体 经产妇、移植病人、多次输血者ABO同种抗体的缺乏或减弱 3岁新生儿，70岁老年人,药物的使用与血型血清学疑难问题,假凝集 血浆扩张剂串钱状凝集 右旋糖酐混合外观红细胞 输异
4、型红细胞、骨髓（最近或过去）获得额外抗原 同上DAT阳性 输注/注射免疫球蛋白意外的同种抗体 输注含同种抗体的血浆、输注过免疫球蛋白 以往输红细胞免疫意外的ABO同种抗体 输注冷沉淀、因子浓缩剂、血小板,血型血清学疑难问题解决技巧,选择和使用各类细胞选择和使用各类反应增强剂正确使用酶试剂：酶反应结果只能用肉眼判断。正确掌握反应温度：控制孵育温度（4、2225、37）在离心后保持相应温度预热技术正确使用各类抗人球蛋白试剂选择和使用各类中和和抑制技术正确判断各类反应结果正确使用各类试剂,酶处理效应,用酶处理后，反应性能增强的红细胞血型：ABH、Rh、Lea、Leb、Ii、P1、Jka、Jkb、Ve
5、l、Coa 等。用酶处理后，反应性减弱或破坏的红细胞血型：M、N、S、Fya、Fyb、Xga、Pr1、Pr2、Ch、JMH、Tn等。,一些血型抗体的性质,盐水反应性抗体：抗A、抗B、抗H、抗I、抗P1、抗M、抗N、抗S、抗Lua、抗Lea、抗Leb 以及Rh、Kell血型系统的一些抗体。溶血性抗体：抗Lea、抗Leb、Vel、P+P1+Pk(Tja)、A、B、I。,反应的最适温度,4 抗A、抗B、抗H、抗I、抗N、抗P1 1618 抗Lea、抗Leb、抗M 37其他,具有剂量效应的血型抗原,Rh:C、c、E、eDuffy:Fya、FybKidd:Jka、JkbMNSs:M、N、S、s,能以可溶
6、性状态存在的血型抗原,ABH 分泌型的唾液等Lewis 唾液、Le(a+)或Le(b+)个体 的血浆/血清I 奶P1、Pk 包虫囊液、鸽子蛋白,ABO血型鉴定的疑难问题,正反定型矛盾,ABO正反定型矛盾 抗体问题,正定型 反定型 抗A 抗B 抗A.B A1RBC BRBC 0 0 0 0 0,抗体减弱或不产生原因,新生儿（46个月）老年人白血病、淋巴瘤患者使用免疫抑制剂的患者免疫缺陷患者骨髓移植患者,ABO正反定型矛盾抗原问题,正定型 反定型 抗A 抗B 抗AB A1细胞 B细胞 4+4+0 4+,获得性“B”现象,由肠梗阻、结肠或直肠癌和其他低位肠道有关的疾病引起。肠壁渗透性增加，细菌多糖吸
7、附到红细胞上产生B特异性。也见于普通变形杆菌引起的败血症。,红细胞血型抗原减弱或消失,A亚型和/或B亚型白血病、何杰金氏病等某些疾病引起的血型物质增多，如胃癌，胰腺癌,ABO正反定型矛盾血浆异常（1）：缗钱状凝集,正定型 反定型 抗A 抗B 抗AB A1细胞 B细胞 4+2+4+2 4+,缗钱状凝集原因,白/球蛋白倒置血浆扩容剂，如右旋糖酐华通氏胶状物（Whartons jelly)：存在于脐带血中。,ABO正反定型矛盾血浆异常（2）：多凝集,正定型 反定型 抗A 抗B 抗AB A1细胞 B细胞 2+1+4+4 4+,多凝集现象原因,病人红细胞被细菌或病毒感染，使T抗原激活。所有正常人血清均含
8、有T抗体。反应强度取决于血清中T抗体的量。,ABO正反定型矛盾血浆异常（3）：丫啶黄抗体,正定型 反定型 抗A 抗B 抗AB A1细胞 B细胞 0 3+0 4 4+,ABO正反定型矛盾血浆异常（4）：不规则抗体,正定型 反定型 抗A 抗B 抗AB A1细胞 B细胞 4+4+4+,ABO正反定型矛盾血浆异常（5）：其他原因,高效价冷凝集素抗A1（A2,A2B型）抗H（A1,A1B型）,ABO正反定型矛盾的处理方法,重复所有试验直接抗人球蛋白试验受检RBC用N.S洗3次，用抗A、抗B、抗A.B、抗H和抗A1检查。用A1、A2、B、O细胞反定型抗体筛选自身对照,处理方法个案分析（1）超量血型物质,用
9、N.S洗涤被检红细胞多次，将红细胞配成盐水溶液，即可得到正确的正定型。,处理方法个案分析（2）获得性“B”现象,将抗B试剂酸化到pH6.0，就可区别“真B”和获得性“B”。酸化的抗B试剂仅与“真B”反应。,处理方法个案分析（3）缗钱状凝集,用N.S洗涤被检红细胞，或在反应管中滴加12滴N.S。脐带血用N.S洗涤68次。,处理方法个案分析（4）冷凝集,将反应管置37C水浴，晃动35min冷吸收放散试验,交叉配血中的疑难问题,交叉配血不合,主侧交叉配血不合,受血者因素 存在不规则抗体（同种抗体、自身抗体、冷凝集素等）献血者因素 红细胞被致敏,次侧交叉配血不合,受血者因素 红细胞被致敏献血者因素 存
10、在不规则抗体,双侧交叉配血不合,多见于自身免疫性溶贫患者高冷凝集素患者或供血者,交叉配血不合的处理,复核受血者和供血者血型鉴定结果抗体筛选试验和抗体鉴定试验抗人球蛋白试验吸收放散试验自身交叉反应试验试剂问题,血型血清学试验应做项目,ABO血型鉴定（正反）Rh血型鉴定抗体筛选试验盐水交叉配血试验介质交叉配血试验（酶、聚凝胺、抗人球蛋白等）,血型血清学试验中应该注意的一些问题,盐水：pH值非常重要，应在6.57.5之间。不然，可以引起假阴性。木瓜酶试验：木瓜酶可以破坏MN、Ss、Fya、Fyb和Xga等抗原。聚凝胺试验：聚凝胺对Kell血型系统的抗原抗体反应不敏感；肝素可以中和聚凝胺。,输血相容率,检查项目 输血总相容率（%）不做检查 64.4 ABO定型 99.4 Rh定型 99.8 抗体筛选 99.94 交叉配血 99.96,谢谢！,
