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1、血液凝固及其影响因素,实验室规则,穿好工作服，不迟到早退。,2 组长提前10分钟持有效证件到实验准备 室借实验器材。,3 实验室不可大声喧哗，各组间可互相观摩。,4 实验完毕，动物统一回收，集中销毁。,5 实验结束，留下一组同学打扫卫生，老师 检查后方可离开。,6 部分实验要求写出实验报告,实验目的,学习测定血液凝固时间的方法。了解钙离子和纤维蛋白在血液凝固中的作用。了解血液凝固的基本过程，以血液凝固的时间为指标，观察不同因素对血液凝固速度的影响。,血液凝固的概念：由流动的胶体状态变为不能流动的冻胶凝块的过程。正常为2-8min血液凝固的本质：由多种凝血因子参与的酶促反应，使可溶性的纤维蛋白原
2、变成不溶的纤维蛋白，最终网罗血细胞而成血凝块。,实验原理,内源性凝血,外源性凝血,a,a,a a Ca2+PL,组织损伤,a,胶原、玻璃、异物,Ca2+PL,a a Ca2+PL,二、凝血酶原变成凝血酶,一、凝血酶原激活物形成,三、纤维蛋白原变成纤维蛋白,三个阶段,两条途径,a,内源性凝血及外源性凝血的区别,实验对象,实验器材,10ml注射器，试管11支，小烧杯2个，试管架，竹签，吸管6支，水浴装置一套，秒表，冰块，棉花，液状石蜡。M/40 CaCL2，肝素（8U/ml），2%草酸钾溶液，生理盐水，肺组织悬液，抗凝全血，稀释凝血酶溶液，富（少）血小板血浆。,实验操作步骤,前期准备：富、少plt
3、血浆、肺组织悬液，置4储存一、观察纤维蛋白在凝血过程中的作用 二、内源性凝血和外源性凝血过程 三、各种因素对血液凝固的影响,一、纤维蛋白原在凝血过程中的作用,取抗凝血10ml，注入2小烧杯内，加M/40 CaCL2 4滴/ml,轻摇混匀。1.一杯静置。2.另一杯不断用竹签搅直至纤维蛋白形成，随后洗净竹签上的纤维蛋白，观察纤维蛋白呈丝状且有弹性。3.比较两杯凝固情况。,二、比较内源性和外源性凝血过程,（1）比较2、3管抗凝时间，分析差别原因（2）比较1、2管时间，说明血小板抗凝中作用,注：试管应标号，最后同时加CaCl2，摇匀。每30秒倾斜试管一次，分别记录三只试管凝固时间。,三、观察影响血液凝
4、固的一些因素,每只试管加抗凝血1ml，复钙后立即计时，每30秒倾斜试管一次，并记录凝血时间。如果肝素和草酸钾管不出现血液凝固，各再复钙一次，观察血液凝固否。,注意事项,统一观察项目内的各试管应保持基本条件一致（试管口径、血量、温度）判断凝血标准要一致（倾斜试管45度时，试管内血液无流动）不要过多的振动试管或者手握试管，防止外部条件影响实验结果。,思考题,实验中向血浆中加入钙离子，为什么会发生凝固？血小板在血液凝固中起何种作用？生理情况下机体为什么不会发生血液凝固?,血小板在凝血中的作用,（1）为凝血因子的激活提供磷脂表面。（2）释缩血管物5-HT和TXA2，也促其自身聚集。（3）释放及钙离子等凝血因子，加速凝血过程（4）吸附凝血因子（、），利于血凝。（5）血小板的收缩，可引起血凝块收缩，挤出血清，使血凝块变得更坚实。,
