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1、细菌学各论,了解各种细菌的形态、培养特性、致病机理及微生物学诊断。,李丹毒，白结核，芽孢球菌除淋膜，若问芽孢菌有何，炭气肿疽破三梭，这些细菌均阳性，其他细菌阴性多。,第7章 革兰氏阳性球菌,第一节 葡萄球菌属 Staphylococcus,广泛存在于自然界，多数是不致病的腐物寄生菌。致病性葡萄球菌可引起化脓性炎症、败血症、食物中毒等。,分 类,（1）金黄色葡萄球菌(S.aureus)：多数致病（2）表皮葡萄球菌(S.epidermidis)：偶可致病（3）腐生葡萄球菌(S.saprophyticus)：不致病,按照色素不同分类,金黄色葡萄球菌（金黄色）,表皮葡萄球菌（白色）,腐生葡萄球菌（柠檬
2、色）,金黄色葡萄球菌S.aureus,一、形态 球状，排列成葡萄串状，无芽孢和鞭毛，个别形成荚膜。,二、培养及生化特性,1.普通培养基上生长良好，脓汁、液体培养的染色片中常见双球或短链排列，需氧或兼性厌氧。2.含有血液和葡萄糖的培养基中生长更佳，致病菌株溶血。3.产生金黄色色素。,4.高度耐盐（10-15%）5.分解葡、乳、麦、蔗糖，产酸不产气，致病菌株能分解甘露醇；过氧化氢酶阳性。,三、抗原性,1.多糖抗原：磷壁酸中的核糖醇残基2.蛋白质抗原：细胞壁的一种表面蛋白 人源菌株含SPA（Staphylococcus protein A),能与多种哺乳动物IgG Fc片段非特异性结合，逃逸体液免疫
3、。,四、抵抗力,抵抗力较强，能在干燥脓汁或血液中存活数月，80 30min可杀死，煮沸迅速死亡，对碱性染料敏感，对多种抗生素产生耐药性。,超级细菌：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,五、致病性和毒力因子,侵袭性疾病：主要引起化脓性炎症。通过各种途径 侵入机体，导致皮肤或器官的多种感染，甚至败血症。毒素性疾病：由葡萄球菌产生的外毒素引，被葡萄球菌污染的食物或饲料引起人或动物的中毒性呕吐、肠炎及人的毒素休克综合征等。,毒力因子主要包括酶和毒素，可引起两类疾病：,1.毒素(Alphatoxin)-溶血素 损伤细胞膜的毒素，对多种哺乳动物红细胞有溶血作用（属穿孔毒素），对白细胞、血小板、肝细胞、成纤维细胞、血
4、管平滑肌细胞等均有损伤作用。（引起肌体局部缺血和坏死）,2.肠毒素(enterotoxin)引起人类食物中毒，表现为呕吐、腹泻等。按抗原性不同，分为A、B、D等二十多个血清型，均可引起急性胃肠炎即呕吐为主要症状的食物中毒。(耐热抗酸，经受10030min,世界性卫生问题),作用机制：到达中枢神经系统后刺激呕吐中枢而导致以呕吐为主要症状的食物中毒,3.凝固酶 能使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝集的酶类物质。（1）游离凝固酶:使液态纤维蛋白原变成固态纤维蛋白。（2）结合凝固酶:使纤维蛋白原与菌体交联而致细菌凝聚。作用：有助于致病菌株抵抗吞噬细胞和杀菌物质。,凝固酶试验,+-,4.耐热核酸酶、溶纤维蛋
5、白酶、透明质酸酶等 利于细菌扩散。,耐热核酸酶试验,-+,5.表皮剥脱毒素（exfoliative toxin）,表皮剥脱毒素引起的烫伤样皮肤综合征（staphylococcal scalded skin syndrome,SSSS），又称剥脱性皮炎，多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人 表现为弥漫性红斑和水疱形成，继以表皮上层大片脱落，受损部位的炎症反应轻微具有抗原性，可被甲醛液脱毒成类毒素,六、所致疾病,（1）侵袭性疾病主要引起化脓性炎症：葡萄球菌可通过多种途径侵入机体，导致皮肤或器官的多种感染，甚至败血症。皮肤软组织感染：主要有疖、毛囊炎、脓痤疮、甲沟炎、麦粒肿、蜂窝组织炎、伤口化脓等
6、。内脏器官感染：如肺炎、脓胸、中耳炎、脑膜炎、心包炎、心内膜炎等，主要由金葡菌引起。全身感染：如败血症、脓毒血症等，多由金葡菌引起，新生儿或机体防御可能严重受损时表皮葡萄球菌也可引起严重败血症。,（2）中毒性疾病：由金葡菌产生的有关外毒素引起。,食物中毒：进食含肠毒素食物后16小时即可出现症状，如恶心、呕吐、腹痛、腹泻，大多数病人于数小时至1日内恢复。烫伤样皮肤综合征：多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人，开始有红斑，12天有皮起皱，继而形成水疱，至表皮脱落。由表皮溶解毒素引起。毒性休克综合征：由TSST1引起，主要表现为高热、低血压、红斑皮疹伴脱屑和休克等，半数以上病人有呕吐、腹泻、肌痛、
7、结膜及粘膜充血，肝肾功能损害等，偶尔有心脏受累的表现。,症状,关节炎,毛囊炎,蜂窝组织炎,烫伤样皮肤综合征,三种葡萄球菌的主要性状比较,七、微生物学诊断,标本的采集 化脓性病灶采取脓汁、渗出液；败血症采取血液；脑膜炎采取脑脊液；食物中毒则分别采集剩余的食物、呕吐物和粪便。直接涂片检查分离培养 普通平板培养、血液琼脂平板、高盐培养基。,1 致病性葡萄球菌的鉴定：（1）产生凝固酶和耐热核酸酶（2）产生金黄色色素，有溶血性（3）发酵甘露醇 2 葡萄球菌肠毒素的检查：作细菌分离鉴定的同时，接种至肉汤培养基，培养后取滤液注射至家兔（皮下、静脉）。,鉴定：纯培养物,动物试验,微生物检查法,标本,脓汁，血液
8、，剩余食物，呕吐物等,分离培养,血浆凝固酶发酵甘露醇耐热核酸酶,直接涂片镜检,革兰阳性葡萄球菌,生长现象,色素，溶血,生化反应,毒素检查,2011年“思念”速冻水饺事件,2011年以前的国家标准中，速冻水饺中“不得检出”金黄色葡萄球菌；2012年制定的标准改为：取5个样品分别检测，只要有一个的金黄色葡萄球菌超过每克10000个，就不合格。对于冷冻面食，如果只有一个样品的菌数高于每克100个但是不超过10000个，那么也算合格；如果有两个或者更多这样的样品，则不合格。,第二节 链球菌属 Streptococcus,链球菌属细菌是化脓性球菌中的另一大类常见细菌，广泛分布于自然界，多数不致病，有些可
9、导致人或动物各种化脓性炎症、肺炎、乳腺炎、败血症。,一、分类,（一）根据抗原结构分,1.属特异性抗原（P抗原）：核蛋白抗原2.群特异性抗原（C抗原）：多糖抗原3.型特异性抗原：蛋白质抗原，又称表面抗原。多与菌体毒力与免疫原性有关。链球菌G蛋白,兰氏（Lancefield)用温热的稀盐酸浸出C抗原，与特异性血清作沉淀反应，将链球菌分为20个血清群（A-V，缺I和J）。同群链球菌间，因表面蛋白质抗原不同，又分不同型。,兰氏分群法,乳胶凝集试验,型溶血性链球菌 菌落周围有不透明草绿色溶血环。多为条件性致病菌。型溶血性链球菌 菌落周围形成完全透明的无色的溶血环。致病力强。,（二）根据溶血现象分类,型链
10、球菌不产生溶血素，菌落周围无溶血环，也称为不溶血性链球菌。无致病性，常存在于乳类和粪便中，偶尔引起感染。,二、形态,球形或卵圆形，直径。呈链状排列，链长短不一。致病菌株链较长，液体培养比固体培养菌链长。,三、培养特性,大多数兼性厌氧，少数专性厌氧营养要求复杂，需补充血液、血清、葡萄糖等。血平板上形成灰白色、表面光滑、边缘整齐的细小菌落。不同菌株溶血不一。,在血清肉汤中易形成长链，管底呈絮状沉淀。,致病物质：脂磷壁酸（LTA）：重要的粘附素 M蛋白：细胞壁中的蛋白质组份，具有抗吞噬和抗吞噬细胞内的杀菌作用。一旦病菌大量繁殖则产生链球菌溶血素（O和S）、致热外毒素等毒性物质，透明质酸酶、链激酶、D
11、NA酶等侵袭性物质。,四、致病性,所致疾病：可引起多种动物发病,链球菌引起动物和人类的多种疾患。（1）化脓性炎症：由皮肤伤口侵入，引起皮肤及皮下组织化脓性炎症，如疖痈、蜂窝组织炎、丹毒、乳房炎等。沿淋巴管扩张，引起淋巴管炎，淋巴腺炎，败血症等，经呼吸道侵入，常有急性扁桃腺炎、咽峡炎，并蔓延周围引起脓肿、中耳炎、乳突炎、气管炎、肺炎等。不卫生接生，经产道感染，造成“产褥热”。,所致疾病,（2）败血症：目前最为常见的是猪链球菌病。在世界各国均常见，且危害严重。1998年及2005年我国曾有猪链球菌2型大范围感染猪和人的报道。猪链球菌病的病原，至少有三种：马链球菌兽疫亚种、猪链球菌2型、猪链球菌1型
12、。（3）猩红热：由产生致热外毒素的A族链球菌所致的急性呼吸道传染病，临床特征为发热、咽峡炎、全身弥漫性皮疹和疹退后的明显脱屑。,所致疾病,猪链球菌病,猪链球菌（Streptococcus suis）2型,S.equi subsp.zooepidemicus ATCC35246,S.suis type 2 HA9801,五、微生物学诊断,标本的采集：采集适当的标本渗出液、脓汁、乳腺炎 乳液、脑脊髓液、尿液和感染组织。检验方法（一）直接检查：可直接涂片，革兰氏染色镜检。（二）分离培养:接种血平板，观察菌落形态和溶血情况。（三）细菌鉴定：菌落形态、溶血特性、细菌形态、生化 特性。如定群、定型，则要作血清学试验。,
