分光光度计的使用.ppt

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1、分光光度计的使用,张国川,通过棱镜或光栅得到一束近似的单色光.波长可调,故选择性好,准确度高.,分光光度法的主要部件框架,(1)分光光度计的主要部件,光源:发出所需波长范围内的连续光谱,有足够 的光强度,稳定。可见光区:钨灯,碘钨灯(3202500nm)紫外区:氢灯,氘灯(180375nm)单色器:将光源发出的连续光谱分解为单色光的 装置。棱镜:玻璃3503200nm,石英1854000nm光栅:波长范围宽,色散均匀,分辨性能好,使用方便,吸收池:(比色皿)用于盛待测及参比溶液。可见光区:光学玻璃池 紫外区:石英池检测器:利用光电效应,将光能转换成 电流信号。光电池,光电管,光电倍增管指示器:

2、低档仪器:刻度显示 中高档仪器:数字显示,自动扫描记录,(2)分光光度计的类型,722型分光光度计结构方框图,光源,吸收池,检测系统,分光系统,分光光度计的使用(1)选择波长,拧动此旋钮,至所需波长,(2)将测试溶液装入吸收池(操作如下)手拿毛玻璃面,先用待装液漂洗 3 遍,装入量为吸收池高度的 3/4,,透光面,毛面,容量的3/4,用镜头纸擦净透光面,,不要将纸团成球,不要来回擦,而要向同一方向擦。,所有关于吸收池的操作均在实验台面之上的空间进行,这样可保证一旦吸收池滑落时掉在台面上,不至于摔破。,通过手柄将池架推到头,此时黑体对着入射光。,遮光黑体,2 号,1 号,0 号,放入吸收池架(透

3、光面向着透光窗一侧)。放置顺序为:,透光窗,然后盖上盖子。,按 MODE 键,(3)调节投射比为 0.000,至投射比(T)灯亮,按一下“0%”键,此时仪器自动校正后显示“0.000”。(有的分光光度计没有黑体,需要在打开试样室盖(起黑体的作用)的情况下调 T=0.000),(4)调透射比为 100%将手柄向操作者方向拉出一档(听到“咔嚓”一声),此时参比(0 号)溶液进入光路。按一下“100%T”键,此时仪器显示“BLA”表示仪器正在自动校正,校正完毕后显示“100.0”。,B L A,100.0,(5)重复(验证)(3)、(4)两步,直至透射比为 0.000 和 100%不变。按“MODE

4、”键至“ABSORBANCE”灯亮(此时转换到测吸光度功能上)。,将手柄向操作者方向再拉出一档(听到“咔嚓”一声),此时被测(1 号)溶液进入光路。此时仪器所显示的数值即为 1 号被测溶液的吸光度值(记录下来)。,-0.000,0.186,再拉出一档,仪器所显示的数值为 2 号溶液的吸光度值。将 1、2 号吸收池换装入 3、4 号溶液(黑体和 0 号参比溶液不动),然后同法测定各溶液的吸光度、并一一记录下来,记录格式如下表。,绘制标准曲线:根据未知溶液(6 号溶液)的吸光度从标准曲线上查得试液浓度。,原试液含铁质量浓度=查得的浓度 稀释倍数,实验报告格式一、实验目的 二、实验原理 三、实验步骤,四、数据记录,五、标准曲线(图)六、从标准曲线上查得的七、原试液的八、思考题,酸度计使用天平使用滴定管使用移液管使用容量瓶使用离心机使用烘箱使用,

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