动物细胞融合和单克隆抗体17中.ppt

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1、1、写出动物细胞核移植过程所涉及到的技术手段。,复习检测,2、现有A、B两种植物,写出“杂种植株AB”的培育过程。,细胞核移植、早期胚胎培养、胚胎移植,动物细胞融合与单克隆抗体,莱芜十七中高二生物组,一、动物细胞融合(细胞杂交),1、概念:,指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。,2、结果:,形成单核的杂交细胞,3、原理:,细胞膜的流动性,4、诱导方式,物理法:离心、振动、电激,化学法:聚乙二醇(PEG),生物法:灭活的病毒,不同DNA的两个细胞,灭活病毒诱导细胞融合,融合后的细胞进行有丝分裂,5、动物细胞融合过程,杂交细胞形成的标志是什么?,6、意义:,一、动物细胞融合(细胞杂交),克

2、服了远缘杂交不亲和的障碍,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段,7、最重要的用途:,主要用于制备单克隆抗体,主要用于制备单克隆抗体,获得杂种植株,用途,物理、化学方法(同左),灭活的病毒,物理(离心、振动、电刺激)化学(聚乙二醇),诱导方法,使细胞分散后诱导细胞融合,去除细胞壁后诱导原生质体融合,细胞融合的方法,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性、植物细胞全能,原理,动物细胞融合,植物体细胞杂交,比较项目,植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较,单克隆抗体,抗体是由何种细胞产生的?2.抗体是如何产生的?,单克隆抗体,淋巴因子,抗体不纯,产量少、纯度低、特异性差,单克隆抗体,4、传

3、统制备抗体的缺点是?,3、传统制备抗体的方法是?,向动物体反复注射某种抗原,使动物产生抗体,再从血清中分离抗体,如何获得化学性质单一、特异性强的抗体?,单克隆抗体,问题讨论,提示:,1.什么样的细胞可以产生抗体?2.什么样的细胞可以无限增殖?,瘤细胞和癌细胞有何区别?,共同点:两者都有无限增殖的能力不同点:瘤细胞不能转移,一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖,单克隆抗体,设计方案:,单克隆抗体制备过程,细胞融合,足够数量的、能产生特定抗体的细胞群,单克隆抗体,筛选(选择性培养基),选出杂交瘤细胞,二、单克隆抗体,诱导其融合的方法有哪些?两两融合的细胞有几种?,选出产生所需

4、抗体的杂交瘤细胞,第一次筛选:,第二次筛选:,获得的B淋巴细胞是否是一种?,单克隆抗体,杂交细胞,杂交瘤细胞,骨髓瘤细胞,特异性杂交瘤细胞,杂交瘤细胞系,提取,经免疫的B细胞,动物细胞融合技术,动物细胞培养技术,单克隆抗体的制备过程:,选择性培养基,克隆化培养、抗体检测,骨髓瘤-骨髓瘤细胞杂交瘤细胞 B细胞-B细胞,单克隆抗体,什么是单克隆抗体,单:克隆:抗体:,单个细胞?,无性繁殖,抗原 抗体,特异性结合,特点:特异性强、灵敏度高、可大量制备(产量大)。,单克隆抗体,作为诊断试剂(特异性高、灵敏度高等优越性。)用于治疗疾病和运载药物 生物导弹,(作为载体,运载抗癌药物,形成“生物导弹”治疗肿瘤),单克隆抗体的应用,再见,

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