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1、1、微生物培养的常用器具及其灭菌,灭菌方法：高压蒸汽灭菌 干热灭菌,1、微生物培养的常用器具及其灭菌,生物安全超净柜,小型无菌箱,平板（plate）又称培养平板（culture plate）,接种针,解剖镜,.,培养,武汉大学中国典型培养物保藏中心,几种常用菌种保藏方法的比较,矿油斜面覆盖保藏,武汉大学中国典型培养物保藏中心,无菌技术、菌落、纯培养、二元培养物；掌握固体培养基分离纯培养的方法、选择培养分离法；了解液体培养基分离纯培养的方法、单孢分离法；掌握获得目的微生物分离纯化的基本流程；掌握菌种保藏的意义、常用菌株保藏方法；了解国内外菌种保藏机构。,本章要求,第二章 纯培养,1一般说来，严格
2、的无菌操作是一切微生物学工作的基本要求，但在分离与培养极端嗜盐菌时，常在没有点酒精灯的普通实验台上倾倒培养平板、在日常环境中直接打开皿盖观察和挑取菌落，而其研究结果并没有因此受到影响，你知道这是为什么吗？答：培养极端嗜盐菌的培养平板需要添加很高浓度的氯化钠（25%），实验室环境中的一般微生物都不能在这种选择培养基上生长，因此在实验过程中，即使不采取无菌操作技术，实验结果仍不会受到影响。,2如果希望从环境中分离得到厌氧固氮菌，你该如何设计实验？,答：（1）根据选择分离的原理设计不含氮的培养基，在这种培养基上生长的细菌，其氮素应来自固氮作用。（2）将环境样品（例如土样）稀释涂布到选择平板上，放置于
3、厌氧罐中。对厌氧罐采用物理、化学方法除去氧气，保留氮气。培养后在平板上生长出来的细菌应是厌氧固氮菌或兼性厌氧固氮菌。（3）挑取一定数量的菌落，对应点种到两块缺氮的选择平板上，分别放置于厌氧罐内、外保温培养。在厌氧罐内外均能生长的为兼性厌氧固氮菌，而在厌氧罐外的平板上不能生长，在厌氧罐内的平板上生长的即为可能的厌氧固氮菌。,3、对细菌的细胞形态进行观察和描述时应注意哪些方面?你是否能很快地在显微镜下区分同为单细胞的细菌、酵母菌和原生动物?答：(1)首先应使用稀释涂布等方法对待检菌株的纯度、群落形态、生理特性等进行检查、确认。(2)选用正常的新鲜培养基和新鲜培养物进行培养和观察，避免培养过程中一些物理、化学条件的改变或培养时间过长等因素对细胞形态的影响。(3)报告细胞大小时应选用多个细胞检测的平均数，并记录所用的实验方法，包括培养条件、培养时间、样品制备方法和染色方法等。(4)可从大小和形态上对细菌、酵母菌和原生动物进行区分。酵母菌、原生动物个体较大，一般可用低倍镜观察，酵母菌细胞一般呈卵圆形、圆形、圆柱形或柠檬形，不具运动性，原生动物细胞形态多变，能够运动。相比较而言，细菌细胞一般较小，需用高倍镜或油镜才能看清。,4、菌种保藏的意义、常用菌株保藏方法,
