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1、脑脊液及浆膜腔积液检验,2,脑脊液检查,（The examination of cerebrospinal fluid）,脑脊液（cerebrospinal fluid,CSF）是存在于脑室及蛛网膜下隙内的一种无色透明液体70%侧脑室脉络丛通过主动分泌和超滤生成30%大脑和脊髓的细胞间隙形成间质液,4,脑脊液生成图,侧脑室 室间孔 第三脑室 中脑导水管 第四脑室 外侧孔和正中孔 脑脊髓蛛网膜下隙 蛛网膜绒毛 回上矢状窦,5,脑脊液的功能：,保护作用调节作用物质交换中介,中枢神经系统病变 血脑屏障通透性 脑脊液成分改变 通过对脑脊液的检查对神经系统疾病的诊断、疗效观察、和预后判断有重要意义,6,
2、一.标本采集,1.适应证 有脑膜刺激征者疑有颅内出血者疑有脑膜白血病者有剧烈头痛、抽搐、昏迷或瘫痪等神经系统体征而原因未明者。,2.禁忌症 颅内压显著升高，视神经乳头水肿、疑有颅内肿瘤者 凡病人处于休克、衷竭或濒危状态以及局部皮肤有炎症、颅后窝有占位性病变或伴有脑干症状者均禁忌穿刺 开放性颅脑损伤或有脑脊液漏者,7,3.标本采集,腰椎穿刺 先作压力测定0.69-1.76kpa(70-180mm H2O)三管 细菌培养 化学分析和免疫学检查 一般性状及显微镜细胞计数检查&每管收集 1-2毫升 及时送检,8,二 检查内容,一、一般性状检查1 颜色（color）无色透明（1）红色 出血引起 应该鉴别
3、穿刺出血和病理性出血 鉴别:a 三管试验 b 离心试验 c 隐血试验,9,穿刺出血和病理出血鉴别,穿刺出血：病理出血：,1 2 3,离心,离心,OD:+,OD:-,（2）黄色：颅内陈旧性出血、脊髓肿瘤或蛛网 膜下腔粘连梗阻（3）白色或灰白色：化脓性脑膜炎（4）褐色或黑色：脑膜黑色素瘤,11,2 透明度（diaphaneity）：清晰透明 WBC 300 106/L 混浊化脓性脑膜炎时，白细胞，脓样乳白混浊 结核性脑膜炎时，白细胞，呈轻度毛玻璃样混浊 病毒性脑膜炎时，仍清晰透明或微浊,12,3 凝块或薄膜（pellicle formatioan and clot）正常脑脊液 24h 不凝 脑膜炎
4、时 Fg 凝块或薄膜 急性化脓性脑膜炎，12 h 凝块 结核性脑膜炎时，1224h 纤细的薄膜,13,1.蛋白质（protein）检验,1）.蛋白质定性（Pandy test）A、原理:蛋白 饱和石碳酸蛋白盐 结果以（-）（+）表示 B、参考值:阴性，部分可呈弱阳性,二 化学检验,）.蛋白定量,14,中枢神经系统炎症：化脓性脑膜炎 定性+定量可达50g/L 结核性脑膜炎 定性+定量达10 g/L 病毒性脑膜炎 定性+出血：脑及蛛网膜下腔出血时，蛋白质多轻度 脑部肿瘤、脊髓肿瘤、蛛网膜下腔粘连，蛋白质,C、临床意义:蛋白质可见于:,15,（2）葡萄糖（glucose）,方法 葡萄糖氧化酶法 自动
5、生化分析法 参考值 成人 2.54.5 mmol/L（4580mg/dl）儿童 2.84.5 mmol/L（5080mg/dl）临床意义：约为血糖60：细菌感染如化脑、结脑等,16,（3）氯化物（chloride）,方法 硝酸汞滴定法 离子电极法 硫氰酸汞比色法 参考值 120-130mmol/l 临床意义：神经系统炎症，结核性脑膜炎减少最显著,17,（四）酶学检查,LDH：见于化脑、脑血管病、脑瘤等 AST:见于脑栓塞、脑萎缩、中毒性脑病等 CK：见于化脑、结脑、蛛网膜下腔出血等 ADA：见于结脑等 Lzm：见于结脑等,18,三 显微镜检查,（一）细胞计数 1.细胞总数计数 改良牛鲍氏计数盘
6、 少：直接计数法 多：稀释计数法，结果再乘以稀释倍数 2.白细胞计数 冰醋酸破坏红细胞，其他同上 3.红细胞计数 红细胞数细胞总数白细胞数&当穿刺损伤血管导致血性脑脊液或出血性脑血管病 时，计数细胞总数已无意义，白细胞数须经校正,19,4.参考值 正常脑脊液内无红细胞，白细胞极少 成人（0-8）106/L 儿童（0-10）106/L 新生儿（0-30）106/L（10-50）106/L 轻度增加（50-100）106/L 中度增加 200106/L 显著增加,白细胞,20,（二）白细胞分类,1、步骤：脑脊液离心沉渣涂片瑞氏染色油镜 2、正常：主要是 M、L 3、意义：化脑：白细胞显著增加，以
7、N 为主 结脑：白细胞中度增加，早期以 N 为主，中晚期 以 L 为主 病脑：白细胞轻度增加，以 L 为主 隐球菌脑膜炎：以 L 为主，可发现隐球菌 脑寄生虫病：WBC E 急性脑膜白血病：WBC，可见原始及幼稚细胞,化脓性脑膜炎,图注：嗜中性粒细胞数量增多，见激活单核细胞出现。图中央见浆细胞和激活淋巴细胞各一个。,结核性脑膜炎,图注：以淋巴细胞反应为主，伴有嗜中性粒细胞和单核样细胞，中下方见一泡沫浆细胞。,病毒性脑膜炎,图注：图正中为一大淋巴样细胞，胞浆内见一圆形嗜酸性包涵体,24,四 细菌学检查,1显微镜检查 革兰氏染色 化脓性脑膜炎时其阳性率约为60-90%2细菌培养 主要用于脑膜炎奈瑟
8、菌、链球菌、葡萄球菌、大肠埃希菌、流感嗜血杆菌分离培养 巧克力平板应放入CO2烛缸，有利于脑膜炎奈瑟菌和流感嗜血杆菌、肺炎链球菌等生长.,图注：中性粒细胞胞浆内外见大量杆菌。（经脑脊液细胞培养证实为大肠杆菌）,化 脓 性 脑 膜 炎,26,图注：图中隐球菌呈大小不等的球体，散在和成堆出现，可见有芽胞。,隐球菌脑膜炎,27,脑囊虫病,图注：典型的嗜酸性粒细胞反应，并伴有较多淋巴细胞。,28,五 免疫学检查,1免疫球蛋白（immunoglobumin）,方法：免疫散射比浊法 参考值：IgG:10-40mg/l IgA：0-6mg/l IgM:0-13mg/l,几种中枢神经系统疾病时脑脊液内免疫球蛋
9、白的改变,30,.结核性脑膜炎的检查：（1）抗-TB-Ab：ELISA 简便，敏感度较高。（2）PCR：测TB-DNA 敏感度高（10-20个），假阳性高。3.神经性梅毒CSF检查（1）FIA-ABC：CSF密螺旋体荧光抗体吸收试验 特异性好，灵敏度高。（2）USR：梅毒血凝试验 过筛试验，灵敏度低。（3）TPHA：梅毒确诊试验 特异性强，灵敏度高。,32,4、寄生虫免疫检查（1）脑囊虫：补体结合试验（CF）胶乳凝集试验（LA）间接红斑试验（LHA）（2）广圆线虫：ELISA法 间接荧光抗体试验（IFAT）（3）旋毛虫 单克隆抗体技术：流式细胞仪,33,六 蛋白电泳（protein elect
10、rophotesis）,A、方法：电泳前浓缩:透析法 载体：琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等。B、正常脑脊液蛋白电泳分带与血清蛋白不同点：出现较多的前白蛋白而血清中较少-球蛋白略高于血清-球蛋白仅为血清中的一半,34,C、参考值：前白蛋白 2-6%0.020.06 白蛋白 55%-65%0.550.65 1球蛋白 3%-8%0.030.08 2球蛋白 4%-9%0.040.09 球蛋白 10-18%0.100.18 球蛋白 4-13%0.040.13,35,D、临床意义 a、前白蛋白：脑萎缩、脑积水及中枢神经变性疾病 b、白蛋白：脑血管病变、椎管阻塞等 c、球蛋白：脑膜炎、脑肿瘤等,常见中枢神经系
11、统疾病的脑脊液检查特点,第六节 浆膜腔积液检查（The examination of serous membrane fluid）,浆膜腔：少量液体 润滑作用 浆膜腔积液胸腔 20ml 胸水 腹腔 50ml 腹水心包腔 1050ml 心包积液,38,根据积液的产生原因和性质不同漏出液（transudate）非炎性积液 原因：血浆胶体渗透压降低 毛细血管内流体静脉压升高 淋巴管阻塞渗出液（exudate）炎性积液 原因：感染性 化脓菌、分支杆菌、病毒等感染 非感染性 外伤、化学物理刺激、肿瘤、风湿性疾病等,40,标本采集,四管 细菌培养（结核检查留10毫升）化学分析和免疫学检查 显微镜细胞计数检
12、查（EDTA-K2抗凝）不抗凝观察凝集现象&每管收集 1-2毫升 及时送检,41,检查项目,1.颜色 漏出液淡黄色，渗出液不定 红色：血性 黄色脓性：化脓菌感染 乳白色：胸导管淋巴管阻塞2.透明度 漏出液多为清晰透明，渗出液多混浊3.比重 漏出液 1.0184.凝固性 漏出液不易凝固，渗出液 能自凝,（一）一般性状检查,42,（二）化学检测,1.粘蛋白定性试验（Rivalta Test）原理：酸性糖蛋白 PI3-5，在稀醋酸溶液中产生白色沉淀 漏出液多为阴性，渗出液多为阳性2.蛋白定量实验 方法同脑脊液蛋白定量 是鉴别漏出液和渗出液最有用的方法之一 漏出液30g/L3.葡萄糖测定 漏出液接近血
13、糖水平，渗出液往往低于血糖水平4.乳酸测定 乳酸浓度升高往往提示细菌感染，有助于 漏出液渗出液的判断5.LDH测定 渗出液LDH浓度升高,43,（三）显微镜检查,1.细胞计数 方法同脑脊液检查 漏出液WBC500 106/L2.细胞分类 离心沉渣涂片瑞氏染色油镜分类 漏出液L 和间皮细胞为主，渗出液可见各种细胞增多3.细胞学检查 如肿瘤细胞的检出可作为原发性或继发性肿瘤的诊断依据4.寄生虫检查 乳糜液可检查微丝蚴，阿米巴病积液可找到阿米巴滋养体,44,（四）细菌学检查,1.镜检 离心沉渣涂片革兰染色或抗酸染色找病原菌2.细菌培养（必要时）,漏出液和渗出液的鉴别诊断,鉴别要点 漏出液 渗出液原因 非炎性所致 炎症肿瘤化学物理刺激外观 淡黄，浆液性 不定，可为血性脓性乳糜性透明度 透明或微混 多混浊比重 1.018凝固性 不自凝 能自凝粘蛋白定性 阴性 阳性蛋白定量 30g/L 葡萄糖定量 与血糖相近 常低于血糖水平细胞计数 常500 106/L 细胞分类 以L、间皮细胞为主 根据病因，分别以N、L 为主细菌学检查 阴性 可找到病原菌积液/血清总蛋白 0.5积液/血清LDH比值 0.6LDH 200IU,
