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1、生物性检材的个人识别,一、概 念,法医物证学是应用多种学科的理论知识和技术，研究并解决涉及法律方面的有关生物物证性检材的检验与鉴定的一门学科。生物物证性检材包括人体组织与器官、体液、分泌物、排泄物及由它们形成的生物性斑痕。,二、法医学物证检验的目的及意义,确定案件性质澄清事实，揭露犯罪提供线索，缩小排查范围分析发案现场、罪犯人数及犯罪过程个人识别，证实犯罪肯定或否定亲权关系为查找尸源提供血型依据,三、检材的处理,发现（血痕、精斑、毛发、唾液等）提取 包装 及时送检,法医物证的提取,新鲜血的提取血痕的提取体液、组织块的提取毛发的提取皮肤、烟头、碎骨片及其组织的提取,法医物证的包装,包装物必须清洁
2、分别包装，不能互相混放及时记录，贴好标签，注明标志做DNA分析用的检材应低温保存,法医物证的送检,及时送检，防止检材腐败变质必须有相应的对照检材同时送检对有斑痕的物体完整送检时将斑痕部位加以标记必须填好送检报告单送检人与接收检材人共同查看检材，观察检材条件提出剩余检材的处理意见,法医物证的检验,三国时代，谢承“以弟血滴兄骨验亲”宋慈“判血入水辨认亲子、兄弟”达尔文进化论、许旺和施来登的细胞学说孟德尔遗传定律及摩尔根的染色体学说1900年Landsteiner发现ABO血型DNA指纹系统、PCR、DNA测序,血痕检验,血痕（bloodstains）：血液在体外干燥后形成的斑迹。,血痕检验需要解决
3、的问题,送检检材是否是血痕如果是血痕，是人血还是动物血若是人血，则测定遗传标记进行个人识别同时进行其他诸如出血量、出血时间及出血部位推断等问题,血痕分类,滴状 血液从一定的高度落下时形成滴状，血滴的形状因高度及方向而异：从0.1米以内高度垂直下落时呈圆滴状，边缘基本光滑；从0.5米高度落下时，圆滴边缘呈锯齿状；从1米高度落下时，在圆滴周围往往溅出逗点状或线条状的小血痕。在受伤后行走时，血滴呈一定角度滴落地面，可形成一边呈锯齿状突起的圆形或椭圆型血滴，锯齿状突起指示行走的方向。,距地100cm，70度,距地100cm，25度,距地50cm，70度,距地50cm，25度,流柱状血液从高位流向低位时
4、形成流柱状，下端因血液滞留而变粗。流柱状一般由静脉血所引起。身体上流柱状血痕可以推断受伤时的体位。,喷溅状动脉受伤血液喷射，形成喷溅状血滴，形似感叹号，尖端指明喷射的方向。但是重复打击受伤部位，创口血液受凶器撞击，或挥动沾有血液的凶器，血滴溅落在物体上，也可以呈喷溅状。动脉喷溅的各个血液形状相似，大小相等，方向一致，比较密集；后两者大小不等，方向不一，比较分散。,擦拭状毛巾或衣服擦拭染血凶器或血手，则可形成面积较大，浓淡不一，境界不清，有时呈平行线条的擦拭血痕。,血印痕手上沾有血液时，往往在器皿上，门框或门把上留有血指纹或血掌纹。脚踩血液，则可遗留血鞋印或血足印，这对个体识别有很大的价值。若凶
5、器沾了血液又撞击于别处（如衣服、墙壁、家具等）则可遗留凶器打击面的血印痕。移尸后，有时可见到遗留的染血头印痕，臀印痕或四肢印痕等。,血泊受伤后不能行动，而创口继续出血时，血液可在尸体周围或底下聚集呈血泊。血泊所在地往往是原始现场，根据血泊的大小可以估计出血量。此外，有时可见作案人洗血手或洗凶器遗留的血水，表明凶犯熟悉地形，并有充分时间。,血痕检验的步骤,肉眼检查需要观察血痕的数量、分布、位置、大小、形状、范围、色泽、相互关系，从而达到推断案情的目的。鲁米诺试验（发荧光）,血痕检验的步骤,预试验：联苯胺试验（灵敏但致癌）确证试验：血色原结晶试验种属鉴定血痕的个人识别（遗传标记测定以及性别鉴定）其
6、他检验（出血部位、出血量、血痕陈旧度等推断）,血痕预实验,联苯胺试验（benzidine test）,联苯胺试验,原理：血痕中的血红蛋白或正铁血红素具有过氧化物酶活性，能将过氧化氢分解，释放出新生态氧，将无色联苯胺氧化为联苯胺蓝操作：严格遵守试剂滴加顺序：冰醋酸联苯胺双氧水；联苯胺为一致癌物质，须自我保护。,血痕确证实验（conclusive test）,血色原结晶试验：由日本人高山所建立，故又称为高山氏结晶试验（hemochromogen crystal test）氯化血红素结晶试验显微分光镜检查,血色原结晶试验,原理：OH-血红蛋白 正铁血红素+变性珠蛋白 还（或吡啶、氨 原 基酸等含氮
7、化合物）血红素 血色原结晶,血色原结晶,种属鉴定(Species identification),目的：确定血痕是否人血。原理：可溶性抗原与相应的抗体特异性结合。结果：在一定条件下，出现肉眼可见的白色絮状沉淀为阳性，应用已知的抗人血清或抗人血红蛋白血清与未知的血痕浸出液反应。,血痕种属试验方法,环状沉淀试验琼脂糖凝胶扩散试验金标记分析试验法其他种属试验方法,血痕ABO检验,目的：个人识别，排除是绝对的，认定是相对的，必须在确定为人血后进行。,吸收试验,又称凝集抑制试验。原理：测定加入检材的抗血清效价降低程度。方法：1、备两份检材，分别加入抗A或抗B血清；2、37温箱2小时或4冰箱过夜；3、离心
8、取上清液；4、分别用生理盐水倍比稀释；5、加1%相应指示红细胞，离心后观察。,正常显微镜下红细胞,发生凝集的红细胞,血痕进一步检验,酶型：PGM1,EAP,EsD,GLOI,GPT;血清型：Gm,Km,GC,Hp,ORM,PLG等；人类白细胞抗原系统：HLADNA多态性分析性别鉴定：amelogenin基因位于性染色体上，合成人类牙釉质蛋白。,精液斑检验,精液斑：精液干燥后形成的斑痕。解决下列问题：是否为精斑；是否为人精斑；是何人的。精液组成：固体成分（精子等）10%精浆（蛋白质、酶等）90%,精液斑检验,肉眼检查：紫外线下发银白色荧光预备试验：碘化碘钾结晶试验 酸性磷酸酶检验（磷酸苯二钠）锌
9、离子检出法确证试验：精子检出法 抗人精沉淀反应 P30检测试验,碘化碘钾试验,又称Florence试验。原理：胆碱+Florence试剂 褐色针状结晶缺点：1、灵敏度不高，仅1:4002、仅在一定时间内可能出现有意义的阳性结果3、假阳性率高，特异性低。,被单上的精斑,过碘胆素结晶,酸性磷酸酶试验,原理：酸性磷酸酶 Fe(CN)-4-磷酸苯二钠 萘酚 红色醌类化合物 氨基安替比林优点：含量高，灵敏度高(1:20,000)，适用于微量及降解陈旧检材。,个人识别,精斑ABO血型检测:中和试验精斑酶型检验精斑的DNA分析,纽约一起奸杀案现场。现场血迹明显，法医正用荧光灯检验精斑。,毛发、骨骼、牙齿,1
10、、性别2、年龄3、身高4、身源认定,三、毛发检验,需要解决的问题有：是毛发还是纤维；是人毛还是动物毛；毛发来自人体何部位；是自然脱落还是暴力拔脱，推断致伤物；毛发的个人识别。,砍断毛发断端,剪断毛发断端,人头发毛干,人头发小皮花纹,马毛毛干,马毛小皮花纹,绵羊毛毛干,绵羊毛小皮花纹,毛发的分型检验,毛发ABO血型检验毛发的酶型检验毛发的DNA分析用于毒化检验,毛发毒化检验证实嫌疑人口供,发现一裸体女尸（青年女性），颈前部有抓痕，无典型窒息表现，无其他致命伤痕。死者指甲下发现他人皮肤组织,案例,逮捕嫌疑犯（青年男性），该犯供述两人在房间内服用毒品后死者出现燥狂表现，将死者按倒后见其未苏醒即逃离现
11、场。且供述本人此前未服用毒品，毒品来自死者。,毒化检验证实死者体内毒品达到致死量。毛发检验显示死者头发（12cm）全程发现毒品嫌疑人毛发（4cm）仅在近端1cm处发现毒品，,四、骨骼检验,（男性）,（女性）,耻骨联合角度判断性别,四、骨骼检验,骨的种属检验骨的血型检验骨的个人识别,五、牙齿检验,是运用牙科学的理论和技术，研究解决侦查、检察、审判和重大灾害事故中，涉及人身伤亡有关个人识别问题的法医人类学技术。,法医DNA检验,1985年Jeffreys等人首先报道了利用DNA指纹技术解决一起移民争端案件，开创了“法医DNA分析”时代，为法医物证检验开辟了新领域，使法医物证检验达到了个人同一认定水
12、平。此后，在短短的十年间，尤其在DNA体外扩增技术（PCR）用于法医检验以来，法医DNA分析技术得以飞速发展，在STR位点的复合扩增、mtDNA的序列分析以及MVR-PCR（小卫星重复区域的数字编码法）等技术的研究上都取得了很大进展。,法医DNA检材的种类,人体组织器官或其分泌物和排泄物。例如血液（血痕）、精液（精斑）、阴道液（阴道液斑）、唾液（唾液斑）、粪便、尿、胎便、胎垢、羊水、恶露、乳汁、呕吐物、胃肠内容物、皮肤、毛发、指甲、骨骼、脏器碎块等。,法医DNA检验原则,生物物证检验提供的检验报告或技术鉴定在刑事侦察和司法审判中具有重要的作用，是与刑事犯罪作斗争不可缺少的手段。鉴定人必须坚持实
13、事求是的原则，忠实于事实真相，运用科学的方法客观地作出鉴定结论，不受外界因素的影响。,亲子鉴定,亲子（权）鉴定（identification in disputed paternity）（parentage testing）亲权纠纷（disputed parentage）（disputed parentage testing）应用医学及生物学的理论和技术，通过对遗传特征的检验来判断假设父母与子女之间的亲缘关系。利用人类遗传标记的检测与分析，判断父母与孩子之间是否亲生关系。,涉及案件：,人类社会中婚姻家庭血缘关系古代滴骨验亲法 合血法现代社会1、家庭纠纷（婚生子女、非婚生子女）2、刑案强奸致孕3
14、、调错婴儿4、失散家庭（拐买儿童）5、移民、遗产继承6、计划生育,鉴定原则,简单遗传受等位基因控制遗传特征（血型、DNA多态性等）复杂遗传受等位基因控制+环 镜因素影响（容貌、肤色等）,单纯遗传规律,1、孩子不可能有父母均无的基因；2、孩子必定得到父母双方的一对等位基因中的各一个；3、当父母的一方或双方为某个基因的纯合子时，这个基因必定要在孩子中表现出来；,亲子鉴定的原理,人类遗传标记遵循孟得尔遗传规律分离律、自由组合律孩子的基因座上的等位基因，必然一半来自父亲，一半来自母亲。根据父母与孩子的遗传标记检测结果，分析等位基因的遗传，可以排除亲代与子代的血缘关系，或不能排除亲代与子代的血缘关系（可
15、以认定亲生关系）。,父权否定（exclusion of paternity）,当alleged father（AF）与孩子的遗传标记（genetic marker GM）未按孟德尔定律遗传时，可否定他们之间的血缘关系。1、孩子有某种遗传标记，母亲没有，则必定来自生父，若AF没有这种遗传标记，则他不是孩子的生父。2、若AF查出一对遗传标记，其中之一必须遗传给他的孩子，如果孩子没有这两种遗传标记中之一，则AF不是孩子的生父。,父权机会（probablity of paternity）,父权机会不能否定AF为孩子的生父时，那么其与孩子有亲缘关系的可能性有多大。相对父权机会（RCP）=PI/PI+1P
16、I（父权指数 paternity index）AF具备必需基因或必需单倍型成为孩子生父的机会PI=随机男子具备必需基因或必需单倍型成为孩子生父的机会,计算PI的步骤,AB型人遗传A机会0.5 B机会0.5A型人遗传A机会0.5754 O机会0.4246B型人B机会0.5752 O机会0.4248,随机男子的机会 该基因的基因频率AB 传A机会0.5 A的基因频率为0.2080.2 PI=0.5/0.2=2.5总PI=PI 1 PI 2 PI3.PI数越大 RCP值高RCP-99.95%（PI2000）,非父排除率（probability exclusion PE）,指通过某一遗传标记系统的检测
17、，在被误控为生父的男子中，能够排除亲生关系的比例。累计非父排除率（CCE）,亲子鉴定检验,一、血型-红细胞 血型ABO MN Rh 白细胞血型 HLA 血清蛋白型Hp Gc Tf 红细胞酶型EsD PGM1二、DNA基因座检测,DNA遗传标记的检测,DNA遗传标记的分类1、片段长度遗传标记第一代 限制性片段长度多态性（RFLP）非编码DNA序列组成十分复杂，有10%串联重复（tandem repeat）-这种首尾串联序列又叫做卫星DNA。第二代 短串联重复序列多态性（STR）2、序列多态性遗传标记,检测技术DNA指纹应用小卫星DNA探针分子杂交的方法，检测出人基因组中的限制性片段长度多态性提取
18、DNA加内切酶DNA片段电泳Southen转移转移后的尼龙滤膜加同位素探针X线片感光,短串联重复序列（short tandem repeats，STR）基因座多，多态性高，片段短，基因片段400bp以下。目前为主要的技术手段。STR遗传符合孟得尔遗传定律。STR基因座的检测：检材提取DNAPCR扩增毛细管电泳荧光自动分析软件自动分析读取基因型。,STR复合扩增分型技术,STR是存在于人类基因组DNA中的一类具有长度多态性的DNA序列，主要是由于核心重复单位数目的变化形成了STR基因座的个体遗传多态性，个体的这种差异在基因遗传过程中遵循孟得尔共显方式遗传，其多态性成为法医物证多态性检验的丰富来源，目前已成为法医学上个体识别和亲子鉴定主要技术方法。,
