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1、1,实验三1、血红蛋白的测定(比色法)2、红细胞脆性的测定3、影响血液凝固的因素,2,血红蛋白的测定(P80)1 目的 掌握比色法测定动物血红蛋白含量的方法。2 实验原理 血红蛋白的量与血液颜色呈正相关,3,3 主要材料 家兔、沙里氏血红蛋白计、0.1N盐酸4 方法与步骤 4.1 清洗:血红蛋白吸管、比色管;4.2 将0.1N盐酸加入比色管中至刻度“2”处;4.3 加样:用血红蛋白吸管取血20L,加入盐酸中,并利用上层盐酸将吸管内壁洗涤2-3次(避免起泡);4.4 酸化10min以上;4.5 比色;4.6 读数:绝对数:每100mL血液中血红蛋白的克数;相对数:,4,5 注意事项5.1 血红蛋
2、白吸管和比色管要清洁;5.2 取血要准确;5.3 避免比色管内起泡;5.4 蒸馏水要逐滴加入,防止过量;5.5 酸化时间不能少于10min;5.6 在自然光下比色,比色无刻度一方朝外。,5,红细胞脆性的测定(P82)1 目的 学习测定红细胞渗透脆性的方法,理解溶液渗透压在维持细胞正常形态中的作用。2 原理 红细胞膜对低渗溶液的抵抗力,称为RBC渗透脆性。用低渗NaCL溶液的浓度表示:最小抵抗、最大抵抗,6,3 实验动物:家兔4 方法与步骤4.1 溶液配置表2 不同浓度NaCl溶液配制,7,4.2 制备抗凝血:柠檬酸钠抗凝血。4.3 加抗凝血:每只试管加1滴,轻轻混匀。4.4 静置1h4.5 观
3、察结果4.5.1 未溶血试管:出现分层现象,下层红色浑浊,上层为无色透明。4.5.2 不完全溶血试管:出现分层现象,下层红色浑浊,上层为淡红色透明。4.5.3 完全溶血试管:无分层现象,完全淡红色透明。,8,6 注意事项6.1 试管要洁净、干燥;6.2 配液要准确;6.3 加血量要一致,1D;6.4 轻轻倾倒试管2-3次混匀,避免机械溶血;6.5 静置时间保证1h,防止中途人为振动;6.6 在光线明亮处观察结果。,9,影响血液凝固的因素(P88),1 目的 以凝血时间为指标,了解影响凝血的因素。2 原理 血凝是一个酶促过程,有多种凝血因子参与,分为内源性和外源性凝血两个途径。,10,3 动物:
4、家兔4 方法与步骤4.1 家兔的麻醉、保定与手术 33%乙醇溶液,6mL/kg,耳缘静脉注射。4.2 试管准备4.3 颈动脉采血4.4 记录凝血时间,11,5 实验结果表1 血液凝固及其影响因素,12,6 注意事项6.1 采血过程要尽量快,以减少计时误差;6.2 每支试管口径大小及采血量要相对一致;6.3 液体石蜡管内多余石蜡应尽量弃除;6.4 判断凝血的标准要一致,一般以倾斜试管 达30-45时试管内血液不见流动为准。,13,表1 不同浓度NaCl溶液配制,表2:血液凝固及其影响因素,14,实验报告撰写格式有要求,15,家兔Hb、RBC脆性测定及影响血凝因素的观察,1 实验相关信息及目的 2 材料 2.1 动物 2.2 主要药品:2.3 主要仪器:3 实验方法:简述或按生理实验指导书ab页介绍方法进行1 4 结果 4.1 家兔Hb、RBC脆性测定:见表1。,表1:家兔Hb、RBC脆性测定,4.2 家兔血凝时间的测定:见表2。,表2:不同因素对家兔血凝时间的影响,5 讨论,5.1 家兔Hb测定结果与对照比较,其值?,原因:,5.2 家兔RBC脆性测定结果与对照比较,其值?,原因:,5.3 家兔血凝时间测定结果表明,时间长短,原因:,参考文献,1.陈杰,家畜生理学M,第四版,北京:中国家业出版社,23-34,2.王力,论文题目J,中国兽医杂志,2006(9):12-23,