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1、Chapter 13 常用仪器分析方法概论,13.2 光度分析法 13.3 色谱分析法,一、仪器分析和化学分析化学分析：以物质化学反应为基础。仪器分析：以物质的物理或物理化学性质为基础。,各自的特点：,二、仪器分析方法的分类,13.2 光度分析法photometric analysis,四氮杂苯的吸收光谱,带状光谱与线状光谱,电磁辐射：E=h=hc/近紫外：200400nm可见光：400760nm,一、光度分析的基本原理,物质的颜色,光的互补色示意图,选择性吸收可见光中某波长段的光而显示吸收光的互补色,朗伯比尔（Lambert-Beer）定律,k：与吸光物质的种类和入射光的波长有关。k越大，表
2、示溶液对入射光越容易吸收。c以g100mL-1为单位时比吸光系数c以molL-1为单位时摩尔吸光系数,A=bc,例、,某待测液用1.0cm吸收池测量时，其透射光强度为入射光强度的1/2，在同样波长下，若用2.0cm吸收池测量该溶液，其透光率和吸光度各为多少？,解：,二、紫外-可见分光光度计,光源 可见区：钨灯（3601000nm）紫外区：氢灯（200400nm）,主要部件,吸收池或比色皿 材质：光学玻璃（可见区）或石英玻璃（紫外区）规格：0.5、1.0、2.0、3.0cm等 注意事项：保护，配套。,三、测量方法,1、测量条件的选择,显色条件的选择 选择吸收系数较大的物质进行测定。波长选择 作吸
3、收曲线，找max浓度范围选择 A=0.151.00(T=70-10%)参比溶液的选择 溶剂空白、试剂空白、试样空白,2、测定方法,标准曲线法,维生素B12的标准曲线,直接比较法,k标=k样 b标=b样,例、,有一标准Fe3+溶液，浓度为6gmL-1，其吸光度为0.304。试样溶液在同一条件下测得的吸光度为0.510，求试样溶液中Fe3+的浓度。,解：,概念：,原理：不同物质在固定相和流动相中具有不同的分配系数，两相相对移动时，各组分产生差速迁移而分离。,特点：高灵敏度、高选择性、高效能、分析速度快及应用范围广等优点。,13.3 色谱分析法chromatography,一、色谱原理和色谱分析中的基本概念,二、色谱法分类,按两相物理状态分：,按固定相形式分：,按分离机制分：,分配色谱法吸附色谱法离子交换色谱法凝胶色谱（空间排阻）色谱法亲和色谱法,三、色谱图及常用术语（1）,色谱峰基线色谱峰高h色谱峰区域宽度 a.标准偏差 b.半高峰宽W1/2 c.峰底宽Wb,保留值保留时间tR死时间t0调整保留时间tR,四、色谱图能提供的信息,色谱峰数目：最少组分数保留值：定性峰高或峰面积：定量峰间距及峰宽：柱的分离能力,五、色谱分析仪器,气相色谱仪：气路系统、进样系统、分离系统温控系统、检测记录系统,高效液相色谱仪器,高压输液系统进样系统分离系统检测记录系统,
