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1、不同有效成分的免洗手消毒凝胶杀菌效果的研究黄勇I黄超2*1 .海南省卫生健康委员会医疗服务指导中心；2”通讯作者，海南森瑞谱生命科学药业股份有限公司摘要目的比较5种不同有效成分的免洗手消毒凝胶的消毒效果。方法采用载体定量杀灭金黄色葡萄球菌、白色念珠菌试验、现场手消毒试验，比较5种不同成分的除菌率及杀灭对数值。结果复方成分的免洗手消毒剂除菌率高，且含不同复方成分的消毒凝胶除菌效果无明显差异，但单一成分的免洗手消毒凝胶除菌率较复方成分的消毒凝胶稍低。结论5种不同有效成分的免洗手消毒凝胶均能达到除菌效果，但以复方成分的免洗手消毒凝胶的效果最好。AbstractObjectiveTocompareth
2、edisinfectioneffectsoffivekindsofhand-washingdisinfectantgelswithdifferentactiveingredients.MethodsCarrierswereusedtoquantitativelykillStaphylococcusaureus,Candidaalbicans,andon-sitehanddisinfectiontests.Thesterilizationratesandlogarithmicvaluesof5differentingredientswerecompared.ResultsThedisinfect
3、ionrateofthecompound-componenthand-washingdisinfectantwashigh,andthedisinfectioneffectofthedisinfectinggelcontainingdifferentcompoundcomponentswasnotsignificantlydifferent,butthesingle-componenthand-washingdisinfectanthadaslightlylowerdisinfectionratethanthecompound-componentdisinfectinggel.Conclusi
4、onThefivekindsofhand-washingdisinfectiongelswithdifferentactiveingredientscanallachievethesterilizationeffect,butthehand-washingdisinfectiongelwithcompoundingredientshasthebesteffect.关键词乙醇;正丙醇;葡萄糖酸氯己定;三氯羟基二苯醛;免洗手;消毒凝胶;杀菌Keywordsethanol;n-propanol;Chlorhexidinegluconate;triclosan;hand-washing;disinfe
5、ctiongel;sterilization日常选购手消毒剂时，通常要求消毒剂具有以下特点：杀菌作用快速、高效，抗菌作用持久；对皮肤刺激小，无异味：价格合理，使用方便。特别是面对近期全球蔓延的肺炎疫情，通过手部消毒从而切断病毒传染途径已经是一项公认的最有效、经济的防疫措施，本消毒试验选取5种含不同有效成分的免洗手消毒凝胶对微生物的杀灭效果及对手部皮肤消毒的消毒效果比较，为医疗机构及生活合理选用手消毒剂提供依据。1材料与方法1.1 研究对象本研究选取5种不同成分的免洗手消毒剂，其成分分别为：以乙醇和正丙醇为主要有效成分的消毒凝胶，乙醇含量为54%66%,正丙醇含量为9%11%;以乙醇为主要成分，
6、乙醇含量为70%80%;以三氯羟基二苯醛为主要有效成分的消毒凝胶，三氯羟基二苯酸含量为0.18%0.22%;以三氯羟基二苯酸和乙醇为主要有效成分的消毒凝胶，乙醇含量为50%60%,三氯羟基二苯酸含量为0.5%0.6%；以葡萄酸酸氯己定和乙醇为主要有效成分，葡萄酸酸氯己定9gLllgL,乙醇含量为54%66%1.2 试验菌悬液与菌片制备试验菌为金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、白色念珠菌(ATCClO231),均由广东省微生物菌种保藏中心提供。取各试验菌进行分离培养，取单个菌落接种至增菌液，经35培养1824h,用稀释液稀释配制成试验浓度的菌悬液。取菌悬液染滴无菌脱脂白色布片(IOmmXlom
7、m),自然晾干,每个菌片的回收菌数为5xl055xl06(cfu片)1.3 中和剂鉴定试验121分别以金黄色葡萄球菌和白色念珠菌为试验菌，设6个组，按照载体定量杀菌试验方法进行中和剂鉴定试验。试验结果，以第1组无菌或极少菌落生长，第2组较第1组多但远较第3、4、5组少，第3、4、5组组间误差率不超过15%,第6组无菌生长，试验重复3次，且结果一致，可判定所选中和剂及其浓度适宜。1.4 载体定量杀菌试验将免洗手消毒凝胶按一片菌片5.0mL用量，将其原液加入到无菌平皿中置于20KC水浴恒温，再放入菌片，浸泡作用至预定时间。取出菌片，放入装有5.0mL中和剂离心管中，经充分振荡混匀，再放至IOmin
8、使中和作用充分。再经振荡洗脱后，取洗脱液倾注接种培养，进行活菌计数。另取稀释液代替消毒凝胶，放入菌片，作为阳性对照，其随后的试验步骤和活菌培养计数与上述试验组相同。试验重复3次，计数各组的活菌量(Cfu/片)，计算杀灭对数值。1.5 现场消毒试验随机选取30名工作人员作为受试者，指导示范双手相互充分搓擦后，让受试者手指并拢，用无菌棉拭子沾湿采样液，在一侧手指屈面指尖至指根，往返转动涂擦2遍采样，作为阳性对照组。取该手消毒凝胶5ml置于受试者双手掌中，按照6步洗手法揉擦双手Imin,对另一侧手指屈面按上述方法进行涂抹采样，作为试验组。将采样棉拭头无菌剪入装有Ioml中和剂的试管中，中和作用Iom
9、in。充分振荡洗脱，取洗脱液进行活菌计数培养，计算杀灭对数值。2结果2.1 中和剂鉴定试验结果试验结果表明，用1.5%卵磷脂、0.5%吐温-80的磷酸盐缓冲液(PBS)组成的中和剂，可以有效中和主要有效成分为葡萄糖酸氯己定和乙醇的消毒凝胶及以乙醇和正丙醇为主要有效成分的消毒凝胶对试验菌的残留作用，且中和产物对试验生长及培养无影响。用1%组氨酸、1.5%卵磷脂，0.5%吐温-80的磷酸盐缓冲液(PBS)组成的中和剂可以有效中和以三氯羟基二苯醍和乙醇为主耍成分的消毒凝胶及以三氯羟基二苯酸为主要有效成分的消毒凝胶对试验菌的残留作用，其中和剂溶液和中和产物溶液对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的生长基本无影
10、响，对细胞和病毒的生长基本无影响。选用3.0%吐温作为以乙醇为主要成分的消毒凝胶中和剂对白色念珠菌、金黄色葡萄球菌的生长几乎无影响，表明试验所选的中和剂及其浓度适宜，结果见表o表1不同成分的消毒凝胶消毒剂鉴定试验结果消毒凝胶有效成分中和剂试验组别各菌平均回收数菌数(CfU/片)金黄色葡萄球菌白色念珠菌以乙醇和正丙醇为主要1.5%卵磷脂、1组00有效成分的消毒凝胶0.5%吐温-802组1352203组以乙醇为主要有效成分 的消毒凝胶3.0%吐温以二氯羟基二苯酰为主 耍有效成分的消毒凝胶1 %组氨酸、1.5%卵磷脂、0.5% 吐温-80以二氯羟基二苯酰和乙醉 为主要有效成分的消毒凝胶1 %组氨酸、
11、 0.5%卵磷脂、5%吐温80以葡同酸酸氯己定和 乙醇为主要有效成分1.5%卵磷脂、0.5%吐温80瑞西 密溜溜 露11潮组组组组组组组组组组组组 123456 123456286O 060O 023O 05461 72.2 TK菌试验结果2.2.1 试验结果表明，用不同成分的消毒凝胶原液作用3min,对布片上的金黄色葡萄球菌、白色念珠菌的平均对数值3.00。结果见表2、表3。表2不同成分的免洗手消毒凝胶对金黄色葡萄球菌的杀灭试验结果消毒凝胶有效成分试验次数试嚓组.平均窗法,对而纪聿均值落数系英对数值(CfWmL)(cfumL)(%)(KL)以乙醇和正丙醇为主要有效成分的消毒凝胶Oooolo6
12、lo6loftloft3 2 2.99.1 1 3以乙醇为主要有效成分的消毒凝胶Oooo 3 7 4 8 12 4 2106106106106 X 4.6O O 3L4.3.99.99995.9799.99925.0899.99925.0899.99975.5999.99624.4299.98313.7799.99893.9699.99064.03以三氯羟基二苯酰和乙醇为主要有效成分的消毒凝胶3.3 1064.4 X IO62.9 IOft3.5 X IO6以二氯羟基二苯酸为主要成分的消毒剂以葡箱酸酸氯己定和乙醇为主要有效成分99.99975.5299.99985.6499.99975.469
13、9.99975.5499.99294.1599.98963.9899.98903.9699.99004.0099.99995.9299.99985.7699.99925.08表3不同成分的免洗手消毒凝胶对白色念珠菌的杀灭试验结果消毒凝胶有效成分试验组别试验组平均菌落数(cfumL)对照组平均菌落数(cfii/mL)杀灭率(%)杀灭对数值(KL)以乙醇和正丙醇为主要有效成分的消毒凝胶23平均值99.999799.999799.999899.999846578615.55.5.99.98153.7399.96443.4499.98903.9699.98173.741以乙醇为主要成分凝胶23平均值以
14、三氯羟基二苯酰为主12901.7IO699.98293.77要有效成分的消毒凝胶2801.7IO699.99534.3331202.410ft99.99504.38平均值1601.910699.99164.08以三氯羟基二苯醛和乙醇199.99945.20为主要有效成分的消毒凝胶299.99975.52399.99985.78平均值99.99975.56以葡箱酸酸氯己定和为主要有效成分的消毒凝胶123平均值99.99975.5199.99985.7499.99945.2699.99975.542.3手现场消毒试验结果，除主要成分为乙醇的免洗手消毒凝胶对手微生物的平均杀灭对数值小于1,其他的都大
15、于3,结果见表4。表4手现场消毒试验结果洎毒梃股有效成分例数成验组平均菌落数对照组平均菌落数东火率汆火对数值（Cfu/样木）（Cfu/样本）(%)(KL)以乙醇和正丙醇为主要有效成分的消毒凝胶30例96(6-300)4.8IO3(5.6IO2-1.5IO4)98.00%(78.57%-99.96%)1.70(1.67-3.41)以乙醇为主要成分凝胶30例76(6-213)4.3XIO2(1.8IO2-8.7IO2)82.33%(40.83%-98.80%)0.75(0.23-1.93)以三氯羟基二苯醛为主要有效成分的消毒凝胶30例144(13-300)2.5IO3(1.4103.4IO3)94
16、.4%(7857%9913%)1.25(1.11-1.57)以三氯羟基二苯醛和乙醇为主要有效成分的消毒凝胶30例120(3-460)2.4IO4(L5102-2.4IO4)99.50%(9L58%99.97%)2.30(1.11-3.51)以葡葡酸酸氯己定和乙醇为主要有效成分30例180(53-300)4.6IO3(4.1XIO2-1.6IO4)96.09%(72.73%-99.15%)1.40(1.06-1.72)2.4各不同成分的消毒凝胶对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、手消消毒效果效果的平均杀灭对数值一览表，见表5,杀灭数值对比图，见图1。表5凝胶对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、手消消毒效果效
17、果的平均杀灭对数值一览表消毒凝胶有效成分杀灭对数值（KL）于金黄色匍的球函日色念垛国以乙醇和正丙醇为主要有效成分的消毒凝胶1.705.595.61以乙醇为主要成分凝胶0.754.033.74以三氯羟基二苯酸为主要有效成分的消毒凝胶1.254.004.08以二氯羟基二苯醛和乙醇为主要有效成分的消毒凝胶2.305.545.56以葡萄酸酸氯己定和乙醇为主要有效成分1.405.715.54火时数47M*tt“esiMm小*ti打b-*m?!M*+*%;IfM,图1不同成免洗手消毒凝胶的微生物的杀灭对数值3结论3.1 实验结果对比经试验，5种分别以葡萄糖氯己定（9gLllgL）和乙醇（54%66%）、乙
18、醇（54%66%）和正丙醇（9%11%）、乙醇（70%80%）、三氯羟基二苯酸（0.5%0.6%）和乙醇（50%60%）、三氯羟基二苯酸（0.18%0.22%）为主要成分的复方或单方免洗手消毒凝胶对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌作用3min,各凝胶对两者的平均杀灭率达到99%以上，平均杀灭对数值大于3。各凝胶对手的自然菌杀灭作用，以单一成分的乙醇消毒凝胶作用稍差，对自然菌的杀灭对数值小于1,另单一成分的三氯羟基二苯醛消毒凝胶作用次之，平均杀灭对数值虽大于1但较复方成分的消毒凝胶剂作用稍弱。3.2 选择使用建议3.2.1 醇类消毒剂广泛应用于人、药厂及实验消毒。一定浓度的醇类消毒剂渗透压与细菌渗透压
19、接近，醇类消毒剂进入细菌内部可使其蛋白脱水、变形、凝固，从而最终杀灭细菌。根据国家卫健委发布新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案（试行第五版）中明确表明酒精能够破坏病毒脂质包膜。同时在接触到病毒包膜表面的糖蛋白时，可以使蛋白质脱水变性，致使病毒失活，可作为预防新冠肺炎的首选消毒成分。本研究的单方乙醇消毒剂对手自然菌的杀灭效果相对其他消毒剂效果略差。3.2.2 葡萄糖酸氯己定消毒剂葡萄糖酸氯己定易溶于水、乙醇，具有相当强的广谱抑菌、杀菌作用，对革兰阳性菌及阴性菌均有效，常用于手、皮肤消毒及冲洗创口。葡萄糖酸氯己定与乙醇配伍可起到协同作用，增强杀菌效果。但此类消毒剂的有效成分对新冠肺炎病毒的杀灭作用有待
20、进一步证实。3.2.3 三氯羟基二苯酸消毒剂三氯羟基二苯酸，又名“三氯生”、“三氯新”、“玉洁纯”、“玉洁新”。三氯羟基二苯酸是一种广谱抗菌剂，被广泛应用于肥皂、牙膏等日用化学品之中。本研究以三氯羟基二苯酸为成分的单方或复方对微生物的杀灭率高，但据其他研究报道三氯羟基二苯酸对人体皮肤、黏膜具有一定的局部刺激作用，应避免大剂量长期接触，尤其不建议消费者使用含有三氯羟基二苯酸的免漂洗产品卬。参考文献1侯丽,周莹,党好.两种消毒凝胶对手部皮肤消毒效果的比较J.中国消毒学杂志,2015,32(01):95-96.2中华人民共和国卫生部通告卫通(2012)6号J.中华人民共和国卫生部公报,2012(03):2.3杨华明,易滨.现代医院消毒学M北京；人民军医出版社：2002:13-140.|4张鹏,张维,齐丽娟,等.三氯生的急性毒性、局部毒性及亚慢性经皮毒性试验研究UL毒理学杂志,2014,28(05):413/15.
