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1、2024孕前血浆和红细胞叶酸浓度测定的意义神经管畸形(neuraltubedefect,NTD)是最常见的中枢神经系统先天性畸形,我国每年有8万10万NTD患儿出生,NTD在各种出生缺陷中占首位1o叶酸是体内重要的甲基供体,可影响许多基因功能的表达,叶酸缺乏可导致胚胎NTD和先天性心脏畸形2。调查资料显示,中国膳食中叶酸摄入量一般均达不到推荐摄入量。由于营养结构的原因,我国人群体内叶酸普遍处于低水平状态。研究证实育龄妇女服用叶酸补充剂和改善营养状况对胎儿NTD有明显的预防作用3-4。本研究通过测定152例孕前补充和未补充叶酸妇女的血浆及红细胞叶酸浓度,以了解其孕前叶酸营养状况,并对叶酸补充情况
2、和血浆及红细胞叶酸水平进行相关性分析。一、资料与方法1.研究对象选择2009年1月1日至2009年12月31日间在本院孕前咨询门诊就诊的孕前妇女152例作为研究对象。研究对象均为从事家务劳动、销售、文职等轻体力劳动者,无毒物及放射线接触史,无急慢性病史及胃肠道手术史,均于本院门诊行血尿常规、肝肾功能及尿人绒毛膜促性腺激素试纸检测,除外妊娠、心肝肾及血液系统疾病。所有研究对象均签署书面知情同意书后纳入研究。2 .研究方法:(1)调查对象、调查方法及调查内容:采用面对面的调查方法收集研究对象的一般情况、孕产史、疾病史。询问研究对象服用叶酸补充剂(叶酸片,麦迪海药业生产。4mg片)的情况,包括服用日
3、期及剂量,并测量身高、体重,计算体重指数。(2)分组:对照组为未服用叶酸补充剂者,共77例。研究组75例,要求服用叶酸期间无漏服,按补充叶酸天数和剂量分组如下:组1至采集标本日已补充叶酸30d,平均(18.04.8)d,剂量为0.4mgd,共28例；组2至采集标本日已补充叶酸3160d,平均(47.06.5)d,齐IJ量为0.4mgd洪13例组3至采集标本日已补充叶酸6190d,平均(79.08.5)d,剂量为0.4mgd,共24例；组4至采集标本日已补充叶酸3160d,平均(42.06.1)d,剂量为0.8mgd,共10例。血浆和红细胞叶酸测定:空腹采集研究对象肘静脉血6ml,分别置于2个乙
4、二胺四乙酸(ethylenediaminetetraaceticacid,EDTA)真空抗凝管中,3ml用于血浆叶酸测定,3ml用于红细胞叶酸测定。血浆叶酸的测定:取3mlEDTA真空抗凝管中标本,3000rmin离心IOmin,分离血清,采用化学发光法测定血浆叶酸浓度5。红细胞叶酸的测定:取3mlEDTA真空抗凝管中全血标本测定红细胞压积,将全血标本中加入一定比例的红细胞溶解素以制备成溶血产物,采用化学发光法测定溶血产物中的叶酸浓度。并结合红细胞压积换算出红细胞叶酸值。计算公式为:红细胞叶酸=溶血产物叶酸21-血浆叶酸X(I-红细胞压积100)(1-红细胞压积/100)。使用仪器为美国贝克曼
5、库尔特公司生产的DXI800型全自动化学发光法免疫分析仪,叶酸浓度试剂及红细胞溶解素均为同一公司生产的配套试剂盒。3 .统计学分析:应用SPSS13.0统计软件处理数据。正态分布的计量资料以均数标准差(xs)表示,多组间数据的比较采用单因素方差分析,两两比较采用t检验;两变量间相关性分析采用Spearman等级相关分析。P0.05为差异有统计学意义。二、结果1.一般情况：152例研究对象的年龄2240岁,平均(29.03.4)岁;14.5%(22152)居住于郊区或农村,85.5%(130/152)居住于市区;高中及以下文化程度者占19.7%(30/152),大专及以上文化程度者占80.3%(
6、122/152);吸烟者占3.3%(5152),不吸烟者96.7%(147152);体重指数为16.339.0,平均21.42.9;15.8%(24/152)有生育史;2.0%(3152)有畸形儿生育史(心脏畸形、无脑儿和21-三体各1例)；50.7%(77/152)未服用叶酸补充齐J,49.3%(75152)服用了叶酸补充剂。2.孕前叶酸补充情况及血浆和红细胞叶酸浓度:152例研究对象的平均血浆叶酸浓度为(25.0811.56)nmolL;红细胞叶酸浓度为(916.25365.04)nmolL,其中55.9%(85/152)的研究对象红细胞叶酸浓度906nmolL,即预防神经管畸形的最佳浓度
7、6。对照组和研究组1的平均红细胞叶酸浓度为(722.98244.29)nmolL和(796.51174.39)nmolL,分另(J比906nmolL(预防NTD的最佳浓度)低20.2%和12.1%o3.叶酸补充情况与血浆叶酸及红细胞叶酸浓度的关系:叶酸补充的分组情况为等级非正态分布变量,采用SPearman等级相关性分析。结果显示,叶酸补充情况与血浆叶酸浓度和红细胞叶酸浓度呈正相关(rs=0.300,P=0.009;rs=0.882,P=0.000),显示叶酸补充剂服用剂量越大,或者服用天数越长者血浆和红细胞叶酸浓度就越高。三、讨论对血浆内叶酸含量的测定是评价叶酸营养水平最普遍的方法。但是,由
8、于血浆叶酸水平对叶酸摄入量的变化和叶酸代谢的暂时变化较为敏感,因此,低血浆叶酸水平不总能反映体内贮存的耗竭刀。测定红细胞中叶酸含量则是评价机体叶酸贮存的最精确方法,因为红细胞携氧参与体内代谢反应的重要故如果体内叶酸不足时,最先在红细胞内得到体现。叶酸缺乏时,先是血液中叶酸水平降低,红细胞叶酸含量减少,然后才是组织中的叶酸含量的降低。红细胞中的叶酸水平是反映机体叶酸储存状况的最精确的指标。红细胞叶酸浓度反映了体内组织中叶酸的贮存情况和参与代谢的叶酸水平,更能代表机体的叶酸营养状况同时也与NTD和多种出生缺陷的发生有更加密切的关系8。红细胞对叶酸有富集作用,红细胞叶酸浓度更能反映一段时期内的叶酸摄
9、入情况,而血浆叶酸则更易受当前饮食等一过性因素影响,因此红细胞内叶酸检测优于血浆叶酸检测。红细胞叶酸浓度检测能检出更多的低叶酸孕妇,使其能及时补充缺乏的叶酸,对预防NTDs降低出生缺陷有更积极作用。当红细胞叶酸浓度906nmolL时,NTD和各种出生缺陷的患病率明显降低,故国际上常把其作为预防NTD的最佳红细胞叶酸浓度。本研究中对照组和研究组1平均红细胞叶酸浓度均显著低于906nmolL这一预防NTD的最佳浓度。研究结果中未补充叶酸补充剂的研究对象,其红细胞叶酸浓度低于无锡等地区的研究报道(449.89nmolL),但高于河北省的报道(841.34nmolL),这与我国妇女血液叶酸浓度呈现出的
10、南方高于北方的趋势相吻合9-10。由于本研究中研究对象均来源于北京地区而我国农村和经济欠发达地区妇女接受预防出生缺陷知识教育和得到叶酸补充剂的机会较少11,所以推测我国孕前妇女整体的血液叶酸浓度可能低于本研究结果。美国2001年至2002年全国健康和营养调查显示,美国妇女的血浆叶酸平均浓度已经达到29.2nmolLz红细胞叶酸浓度为1134.26nmolL12。本研究提示,我国孕前妇女的血液叶酸浓度仍远低于美国和加拿大等发达国家,非常有必要对孕前妇女采取常规补充叶酸的措施,并且必须有足够的剂量和补充时间。膳食中的叶酸分为叶酸和叶酸盐。来自天然食物的叶酸盐结构复杂,在体内必须首先转变为简单结构的
11、叶酸才能被利用,其生物利用率约为标准叶酸的50%13o而叶酸在天然食品中几乎不存在,只能来源于人工合成。由于叶酸补充剂比食物中的叶酸能更好地被机体吸收利用,所以,建议最迟从妊娠前3个月开始补充叶酸0.4mgd,并持续整个妊娠期。是否服用叶酸补充剂是血浆与红细胞叶酸浓度最主要的影响因素。本研究提示,依靠服用叶酸补充剂来达到预防NTD的最佳红细胞叶酸浓度需要一定的服用时间,这可能与红细胞的更新周期及细胞表面转运相关载体的活性有关。同时,本研究结果显示每日补充叶酸0.4或0.8mg,持续30d以上,即可达至J906nmolL这一预防NTD的最佳浓度,与我国制定的补充叶酸需从妊娠前3个月开始的方案不符
12、,分析原因可能与本研究调查的人群有关。本研究对象中85.5%居住于市区,大专及以上文化程度者占80.3%,不吸烟者96.7%,体重指数平均21.42.9o本研究人群绝大多数居住在城市,有较好的营养状况、较高的文化程度、较少的不良嗜好,体重指数在合理范围,显示这一人群更注意生活品质。而以上因素均与血浆和红细胞叶酸浓度有关。郝玲等9的研究发现,农村育龄妇女的血浆叶酸缺乏率高于城市。CroZier等14对6129例年龄2034岁的育龄妇女进行营养和健康调查,结果提示研究对象的饮食结构与其红细胞叶酸浓度有明显的相关性。vanDriel等152009年对336例育龄妇女的研究提示,体重指数与血浆和红细胞
13、叶酸浓度有明显的相关性。Summers等16对美国非裔健康育龄妇女的研究发现,低血浆和红细胞叶酸水平与吸烟等不良生活方式有关。由于本研究为回顾性分析,研究对象中服用0.8mg叶酸补充剂的人数较少,且服用时间均为3160d,故每日服用0.8mg叶酸补充剂,不同的服用天数对血浆和红细胞叶酸浓度的影响有待于前瞻性临床试验进一步研究。综上所述,孕前妇女的血浆和红细胞叶酸浓度受多种因素的影响。对孕前妇女同时进行血浆和红细胞叶酸浓度的测定可准确地反映其叶酸营养状况,使临床医师能根据血液叶酸水平对孕前妇女进行个体化和有针对性的补充叶酸指导,从而有效地预防NTD及其他相关出生缺陷的发生。同时,血浆及红细胞叶酸浓度可作为服用叶酸补充剂的效果评价指标之一。
