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1、学习目标,1.掌握制剂含量概念；掌握片剂常规检查技术2.熟悉常用辅料干扰的排除方法；熟悉注射剂装量和装量差异检查法3.了解注射剂其他检查项目及含量计算方法4.学会片剂含量测定技术5.具有认真负责、严谨务实的工作态度，牢固树立药品质量第一的观念。,第一节：概述,为了防治和诊断疾病的需要；为了保证药物用法和用量的准确；为了增强药物的稳定性；为了药物使用、贮存和运输的方便；5. 为了延长药物的生物利用度；6. 为了降低药物的毒性和副作用。,（一） 定义,利用物理、化学或生物测定方法对不同剂型的药物进行检验分析，以确定其是否符合质量标准。,（二） 制剂分析的特点 （与原料药的区别）,1.性状的规定和描
2、述不同 药品的性状是药品质量的重要表征之一。外观性状是对药品色泽和外表感官的规定。原料药性状项下主要描述药物的外观、色、臭、溶解度、稳定性以及物理常数等。 药物制剂对影响药物内在质量的外观性状也有规定。如中国药典2015年版制剂通则中规定：片剂外观应完整光洁，色泽均匀，有适宜的硬度和耐磨性，以免包装运输过程中发生磨损或破碎。制剂如有包衣或者外壳，还应规定内容物的外观性状。,2.鉴别方法或有不同（1）先分离，再鉴别：如乙酰唑胺片的鉴别，先将供试品研细后，用氢氧化钠溶液溶解并滤过，取滤液再按原料药鉴别方法鉴别。（2）选用与原料药不同的方法加以鉴别：如乙酰螺旋霉素的原料药采用薄层色谱法进行鉴别，而片
3、剂增加了紫外分光光度法鉴别。,杂质检查的项目不同,一般原料药项下的检查项目不需重复检查，只检查在制备和储运过程中产生的杂质及制剂相应的检查项目。 如：盐酸普鲁卡因注射液“对氨基苯甲酸”阿司匹林片“水杨酸”,3.检验项目和要求不同,杂质限量的要求不同,阿司匹林 “水杨酸”0.1%阿司匹林片 “水杨酸”0.3%,含量表示方法及合格范围不同,原料% 片剂标示量的%阿司匹林 99.0 95.0105.0VitB1 99.0(干燥品) 90.0110.0VitC 99.0 93.0107.0肌苷 98.0102.0(干) 93.0107.0红霉素 920单位/g 90.0110.0,1、制剂含有附加剂，
4、干扰样品测定2、样品测定前往往需要一定的前处理3、应当结合原料药和辅料进行制剂分析4、需要更专属和更灵敏的测定方法5、制剂往往需要进行特殊检查6、应考虑复方制剂中各组分间的干扰7、往往需要进行阴性对照,4.含量测定方法或有不同（1）主药含量大，无其他成分，或其他成分对测定无干扰或干扰可以忽略不计，则一般采用与原料药相同的方法进行测定。如盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡因注射液均用亚硝酸钠法进行含量测定。（2）其他成分对主药的含量测定方法有干扰，则应先排除干扰，再采用与原料药相同方法进行测定。如乳酸钠注射液，即先将注射液的溶剂水用恒温干燥法除去后，再用与原料药相同的非水溶液滴定法测定。（3）考虑到附加成
5、分的干扰和主药含量多少等问题，选用与原料药不同的方法进行测定。如盐酸吗啡原料药采用非水溶液滴定法测定含量。其片剂和注射剂采用紫外分光光度法测定含量，其缓释片的测定方法则选用高效液相色谱法。,5.含量限度的的含义不同待测物质含量% = 100% 原料药的含量一般要达到99.5%以上，未规定上限，一般不超过101.0%。有时原料药也规定上限，如对乙酰氨基酚规定按干燥品记，含量应为98.0%-102.0%，其上限是指用质量标准规定的分析方法测定时可能达到的数值，代表限度或允许偏差，并非真实含量。,二、药物制剂的含量限度1.药物制剂含量限度的表示方法标示量%= 100%标示量是指单位药品中所含存物质的
6、理论值（即药物制剂的规格值）,2.药物制剂含量计算举例（1）异烟肼片：异烟肼片规格为50mg，表示每片中含异烟肼的理论值为50mg，即标示量为50mg。药典规定应为标示量的95.0%-105.0%。如果测定结果某批平均实际含量为49.5mg，含量占标示量的百分比为：标示量%=49.5/50=99.0%(2)盐酸普鲁卡因注射液：盐酸普鲁卡因注射液的规格为10ml：100mg。药典规定应为标示量的95.0%-105.0%。如果测定结果是9.90mg/ml,标示量%=99.0%,3.含量限度的范围 制剂由原料和辅料组成，杂质在允许范围内，同时由于生产制备测定过程相对复杂，客观存在一定偏差和变化。含量
7、限度一般为标示量的95.0%-105.0%如对乙酰氨基酚片的标示量应为95.0%-105.0%维生素B1的标示量应为90.0%-110.0%,片剂是指药物与适宜的辅料通过制剂技术压制而成的片状或异形片状的制剂。,第二节：片剂分析,性状鉴别试验剂型检查含量测定,要求外观完整光洁、色泽均匀，并具有适度的硬度。,一、性状,取一定量片剂，铺在白色板（或纸）上，在规定光源、光线与片剂的距离下用眼睛观察，检查色泽，黑点，色斑，麻点（坑），缺角，裂缝，花斑，油污等，进行程度和数量的登记。,二、鉴别试验,制剂经适当的前处理后，用合适的方法进行鉴别。前处理技术分析检测技术,化学方法：各种以化学反应为基础的容量分
8、析方法。生物测定法：主要是以抗原-抗体为反应原理的免疫分析法。酶联免疫吸附测定法(ELISA),物理方法光谱技术 UV IR Flu NIR MS NMR色谱技术PC TLC GC HPLC HPCE光谱和色谱联用技术GC-MS HPLC-MS CE-MS LC-NMR,三、剂型常规检查,重量差异含量均匀度崩解时限溶出度,药典附录,重量差异（weight variation）：是指按规定称量方法测定片剂每片的重量与平均片重之间的差异。,糖衣片、薄膜衣片应包衣前检查,1、重量差异,【几点说明】,1、片重差异不能完全反映药物的含量均匀度2、主要是在生产过程中引起的3、不适用于对含量较小片剂的检查,
9、（2）方法,取药品20片，精密称定总重量W总，计算平均重量W平，再分别称每片的重量，计算每片片重与平均片重差异的百分比，进而判断该片剂的重量差异是否合格。,中国药典的相关规定： 超出重量差异的不得多余2片，并不得有一片超出重量差异的1倍。,例题： 某片剂重约为0.25 g，20片的总重为4.989 g，各片的片重分别为0.238、0.254、0.247、0.263、0.271、0.258、0.262、0.249、0.236、0.252、0.248、0.246、0.251、0.261、0.239、0.248、0.256、0.269、0.241、0.246计算该片剂的重量差异是否符合规定？,含量均
10、匀度：是指小剂量的片剂、胶囊剂或注射用无菌粉末等每片（瓶）的含量偏离标示量的程度，从1985版开始收载。,凡是检查含量均匀度的制剂不再检查重量差异,2、含量均匀度,【几点说明】,1、小剂量：Chp2010 标示量25mg，主药含量 25（片剂）EP7 标示量2mg，主药含量22、透皮贴剂应作该项检查3、一些有效血药浓度范围窄的品种,含量均匀度的检查方法：,取供试品10片,测定每片以标示量为100的相对含量X,求平均值X平、标准差S和差值A,判断规则：,A+1.80S15.0 合格,A+S 15.0 不合格,A+1.80S 15.0, A+S15.0 复试,复 试,另取取供试品20片,求算30片
11、的平均值X平、标准差S和差值A,A+1.45S15.0 合格,A+1.45S 15.0 不合格,思考1、片剂含量均匀度计算中，15.0以及系数（1.80、1.45）是如何规定的？2、取样10片和20片的取样量是如何规定的？3、片剂的含量均匀度如何检查？如何判断？,利用该药品再弱碱性环境中发生一级电离，在240 nm处有最大吸收，利用UV测定其含量,Example:,98.6 95.4 102.3 99.4 97.2 94.2 93.4 95.1 94.7 101.3,A+1.80S=2.84+1.803.067=8.36,USP, Ph. Eup,取供试品10片,测定每片的真实含量X和X平,8
12、5X平 X 115%X平 合格,如有一片超出X平的75125 不合格,如有一片超出X平85115，但未超过X平的75125 复试,复 试,另取取供试品20片,测定每片的真实含量X和X平,如有一片超出X平的75125 不合格,如有一片超出X平的85115，但未超过平均含量的75125 合格,药典附录,用崩解仪测定,定义 固体制剂在规定的介质中崩 解溶散并通过筛网（2 mm） 所需时间的限度,3、崩解时限,测定方法： 取片剂6片，分别放于吊蓝的玻璃管中，开动崩解仪，每片均应在15 min内全部崩解。 糖衣片在水溶液中60 min内崩解。 肠溶衣片先在盐酸溶液（91000）中2 h不得有裂缝，再在磷
13、酸盐缓冲液（pH 6.8)中1 h应全部崩解。,泡腾片，取1片放于装有200 ml 15 25水的 250 ml烧杯中，应有气泡放出，当气泡停止时，片剂崩解、融解或分散。应当按同法检查6片，均应在5 min内崩解。,片剂 崩解时限,普通片剂肠溶衣片糖衣片泡腾片,15 min60 min60 min5 min,溶出度：是指药物从片剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速度和程度，难溶性药物均应作此项检查。凡是检查溶出度的制剂不再进行崩解时限的检查。,转篮法样品置于溶出度仪的转篮中,桨 法样品放于容器中用搅拌桨搅拌,小杯法样品放入250ml烧杯中用搅拌桨搅拌,4、溶出度,转篮法,取六份样品置于溶出度仪的转
14、篮中，将转篮降至1000 ml烧杯中，注入经脱气处理的溶剂900 ml，控制温度为370.5，按规定转速旋转到45 min时，在规定取样点取样，立即经0.8m（0.45m）的微孔滤膜过滤，测定每片的溶出度。,桨 法,基本装置同转篮法，使用搅拌桨搅拌，测定时将供试品分别放入1000 ml烧杯中，启动搅拌桨，45 min时取样测定，立即经0.8m 的微孔滤膜过滤，测定每片的溶出度。,小杯法,基本装置同转篮法，使用搅拌桨搅拌，测定时将供试品分别放入250 ml园底烧杯中，加入经脱气处理的溶剂启动搅拌桨，45 min时取样测定，立即经0.8m 的微孔滤膜过滤，测定每片的溶出度。,结果判断,测定每片的溶
15、出量X及X平,设定溶出限度值Q = 70%标示量,如果有1片 Q，但Q-10%，并且X平Q 合格,如果有1片 Q-10%，需复试,复试： 另取6片进行溶出度测定，如果12片中仅有12片 Q-10%，但是X平 Q， 合格,释放度检查了解和自学内容,1、释放度的概念2、对不同制剂（缓释制剂、控释制剂、肠溶制剂、透皮贴剂）如何进行释放度检查？,四、含量测定分析,1、掌握常见的附加成分对药物含量测定的干扰及其排除方法。2、熟悉仪器分析方法测定药物含量的一般实验步骤、操作和结果计算。,糖类化合物,淀粉糊精蔗糖乳糖,干扰氧化还原反应,1、避免使用强氧化剂滴定2、应做阴性对照实验3、更换其他的测定方法,1、
16、哪些容量分析法属于氧化还原反应？,2、这几种糖类化合物为何能干扰氧化还原反应？,硬脂酸镁,Mg2+EDTA容易生成较为稳定的络合物而干扰。通常采用酒石酸与Mg2+络合形成稳定的化合物而排除,C36H70O42-+HClO4发生化学反应，消耗滴定溶剂的量，干扰非水滴定。 通常采用有机溶剂萃取的方法采用加草酸的方法采用其他测定方法，如UV等,排除方法,（二）分析方法及计算一般取10片或20片精密称定总重量，计算平均片重，称取片粉，然后按照规定的方法进行操作；如为糖衣片，先去除糖衣，再按素片含量测定测定方法进行操作。1.滴定分析法（1）操作步骤：取规定数量的片剂-精密称定并计算平均片重-研成细粉-精
17、密称取供试品适量-溶解-滴加指示剂-滴定-判定终点-记录消耗滴定液体积-根据滴定度计算。（2）计算公式：每片的实际含量=VTF*平均片重/m标示量%=VTF*平均片重/(m*标示量）,2.紫外-可见分光光度法（1）操作步骤 ：取规定数量片剂-精密称定并计算片重-研成细粉-精密称取供试品适量-溶解定容-过滤-定量稀释-测定吸光度A-根据吸收系数、标示量计算含量。（2）吸收系数法计算公式：每片的实际含量=A/E/100*V*D*平均片重/m标示量%=A/E/100*V*D*平均片重/（m*标示量）(3)含量测定实力见课本（P76）,第三节：注射剂分析,性状鉴别试验剂型及安全性检查含量测定,一、性状
18、检查,2010版Chp附录“制剂通则”,二、鉴别试验,与片剂基本相同的方法进行,三、剂型检查及安全性检查,1、装量检查2、渗透压摩尔浓度3、可见异物4、不溶性微粒的检查5、无菌检查6、热原或细菌内毒素的检查,1、溶液型注射剂的装量检查： 保证注射液的注射用量不少于标示量,取样方法,2.0 ml 取供试品5支250 ml 取供试品3支50 ml 最低装量检查法检查,具体检查方法 用相应体积的干燥注射器抽取溶液，注入经标化的量具内，在室温下检视；油溶液或混悬液应先加热摇匀后用注射器抽取置于容器中放冷至室温后再进行检视。,2、渗透压摩尔浓度,渗透溶剂通过半透膜由低浓度向高浓度扩散的现象。渗透压阻止渗
19、透所施加的压力测定法测量溶液的冰点下降凡处方中添加了渗透压调节剂的制剂均应控制渗透压静脉输液及椎管注射用注射液,3、可见异物,检查注射液中是否含有不溶性异物 主要检查：50 m的微粒 更小的微粒：不溶性微粒的检查 灯检法和光散射法,实验设备：装有日光灯的伞棚式装置，背景用黑色布,自 检,抽 检,灯检法,无色透明容器包装的无色注射溶液用1000lx2000lx的光照射透明塑料容器或棕色透明容器包装的注射剂照度为2000lx3000lx混悬型注射液或乳状液照度应为4000lx,Type No. Sample No. per Detection time,12 ml5 ml10 ml20 mlOve
20、r 50 ml,20020020020020,64331,18 s16 s15 s21 s15 s,具体的操作方法 取规定的支数置于伞棚的边缘，用手拿安踣的颈部，使药液转动，用目视检测，样品和眼睛的距离为2050 cm。检查不得发现有肉眼可见的白块和纤维等异物；不合格率5。如超过规定，则应当加倍抽检样品。 样品贮存期的不合格率7,油性针剂：先在 80水浴加热30 min，再放冷至2030进行检查，检查时间比水针剂延长一倍。,固体粉针：需要先假如规定的溶剂溶解后按照水针相同的方法进行检查。,光散射法,测定溶液中不溶性物质引起的光散射能量，并与规定值相比较。,4、不溶性微粒,在可见异物检查合格后，
21、用以检查静脉用注射剂及供静脉注射用无菌原料药中不溶性微粒的大小及数量。,光阻法显微计数法,光阻法,当液体通过一个狭小的检测区时，由于液体中微粒的阻挡，使得入射光减弱，使传感器输出的信号减弱，这种信号的变化与微粒的截面积成正比，由此可以检测出微粒的大小和数量。 不同规格制剂的检查方法有所不同,结果判断,1、标示量100 ml的静脉注射液,每ml中10m不得超过25粒，含有25m不得超过3粒。,2、标示量100 ml的静脉注射液、无菌粉末等,每个供试容器中10m不得超过6000粒，含有25m不得超过600粒。,显微计数法,取样品25 ml，置于滤器中，缓缓抽滤至干，再用25 ml水洗涤并抽至干。用
22、平头镊子将滤膜移至陪氏载片上，将载片置于显微镜下并放大100倍进行观察，检测有效过滤面积上的最长直径10m和25m的微粒数。不同规格制剂的检查方法有所不同,结果判断,1、标示量100 ml的静脉注射液,每ml中10m不得超过12粒，含有25m不得超过2粒。,2、标示量100 ml的静脉注射液、无菌粉末等,每个供试容器中10m不得超过3000粒，含有25m不得超过300粒。,保证注射剂等无菌产品无菌,注意事项,100级洁净度空间进行，单向流空气区域,需用相应的溶剂或稀释液作阴性对照,五、无菌,直接接种法适用于非抗菌作用的药品,间接接种法适用于具有抗菌作用的药品,薄膜过滤法,当供试品对检查有干扰时
23、,检查方法,直接接种法：按照Chp规定取样后，分别接种于需氧菌、厌氧菌培养基6管（3035），其中1管接种金黄色葡萄糖球菌1ml作为阳性对照，另接种5管于真菌培养基（2025），共培养14天。,判断结果：（1）阳性对照应在4872h内有菌生长；（2）需氧菌、厌氧菌和真菌培养管应当澄 清并没有细菌生长；（3）如有1管浑浊并正是有细菌生长，应取2倍供试品重新试验。,薄膜过滤法：取规定的供试品，加入0.9的无菌NaCl溶液或其他适宜溶剂100 ml，混匀后通过装有孔径不大于0.45m的薄膜过滤器，再用0.9的无菌NaCl溶液冲洗至对阳性菌群正常生长，将需氧菌、厌氧菌培养基，真菌培养基以及阳性对照分别
24、加到薄膜过滤器内。按照规定的温度下培养35天。,判断结果：（1）阳性对照应在2448h内有菌生长；（2）需氧菌、厌氧菌和真菌培养管应当澄 清并没有细菌生长； （3）如有1管浑浊并正是有细菌生长，应取2倍供试品重新试验。,六、热源或细菌内毒素检查 热源是指药品中含有的能引起体温升高的杂质。,细菌内毒素是由脂多糖组成的细菌细胞壁组分，是热源的主要来源。,热源家兔法细菌内毒素鲎试剂法,检查方法,家兔法： 取家兔3只，测定其正常体温后15 min内，自耳缘静脉缓缓注入规定剂量并温热至38的供试品，然后每隔30 min测量体温一次，共测6次，以6次中最高的一次体温（Tmax）减去正常体温（Tnor），即
25、为家兔升高的体温（T升）。,判断标准 如果有一只家兔T升0.6如果3只家兔T升0.6，但T升总和1.3如果3只家兔T升0.6，但T升总和1.3复试中T升0.6的家兔仅有一只并且8只家兔T升总和3.5,合格,复试,鲎试剂法,凝胶法：凝胶限度和凝胶半定量光度测定法：浊度法和显色基质法,鲎试剂法,检查方法：取装有0.1 ml鲎试剂溶液的1075 mm的试管8支，其中2支加入0.1 ml按最大有效稀释倍数稀释的供试品溶液，2支加入0.1 ml内毒素溶液作为阳性对照管，2支加入0.1 ml细菌内毒素检查用水作为阴性对照管，2支加入供试品阳性对照溶液作为阳性对照管，混匀后，封闭管口，垂直放于371的恒温箱
26、中，保温602 min后，将试管取出，缓缓倒转180度，判断结果。,结果判断倒转180度，若管内凝胶不变形，不从管壁脱落为阳性（）倒转180度，若管内凝胶变形，并从管壁脱落为阴性（）供试品2管均为（）则认为合格供试品2管均为（）则认为不合格供试品中1管为（），1管为（），则另取4支复试，4支中有1管为（）则不合格试验中的阳性对照管检查结果应为（），阴性对照管应为（）,四、含量测定分析,主要考虑附加剂和溶剂对含量测定的影响，注射用水、溶剂油、抗氧化剂等。,（一）抗氧化剂的干扰与排除,亚硫酸钠亚硫酸氢钠硫代硫酸钠焦亚硫酸钠维生素C,加入掩蔽剂加酸使其分解加入弱氧化剂氧化利用紫外吸收特性,干扰氧化还原滴定法,1、加入掩蔽剂,亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠碘量法、亚硝酸钠法、铈量法丙酮或甲醛等掩蔽剂来消除干扰,亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠2、加酸分解消除干扰HCl、H2SO43、加入弱氧化剂来消除干扰HNO3、H2O2,Na2SO3+H2O2=Na2SO4+H2ONaHSO3+H2O2=NaHSO4+H2ONa2SO3+2HNO3=Na2SO4+H2O+NO2NaHSO3+4HNO3=Na2SO4+2H2O+H2SO4+4NO2,4、利用不同的UV吸收特性来消除干扰,254、306 nm,243 nm,
