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1、球 菌,种类:革兰阳性 葡萄球菌属、链球菌属（链球菌、肺炎链球菌）、肠球菌属、微球菌属等革兰阴性 奈瑟菌属、布兰汉菌属,形态染色,革兰阳性球菌、葡萄串状排列无鞭毛、无芽孢、一般不形成荚膜,葡萄球菌革兰染色镜下图,染色性：形态：排列：,培养特性,生长条件需氧、兼性厌氧营养要求不高，普通培养基上生长良好耐盐，1015NaCl上能生长,培养特性,生长现象液体培养基：均匀混浊、少许沉淀固体培养基：中等大小菌落、圆形、凸起、边缘整齐、光滑、湿润的S型菌落,常用培养基及菌落特征,血平板（营养培养基）： 中等大小、光滑型菌落、脂溶性色素色素、透明溶血环（致病葡萄球菌）高盐甘露醇平板（选择鉴别培养基）： 淡橙
2、黄色菌落（致病葡萄球菌）卵黄高盐琼脂平板（选择鉴别培养基）： 菌落周围形成白色沉淀圈（致病葡萄球菌）,生化反应,触酶试验：+葡萄糖氧化发酵试验：发酵+甘露醇分解试验：+（致病菌株）,抗原构造,葡萄球菌A蛋白（SPA）存在于金黄色葡萄球菌细胞壁可与人和其它哺乳动物IgGFc段非特异性结合，应用于协同凝集试验抵抗吞噬细胞的吞噬多糖抗原具有型的特异性,有助于金葡菌感染的诊断,分类和分型,葡萄球菌包括32种及亚种根据产生色素的不同分类根据产生凝固酶与否进行分类按噬菌体分型法分类,葡萄球菌传统分类,金葡菌噬菌体分型,分型：分五个群，共22型意义：追踪传染源,抵抗力,是抵抗力最强的无芽孢细菌耐干燥对龙胆紫
3、敏感易形成耐药性：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）已成为医院感染最常见的致病菌,致病物质,凝固酶葡萄球菌溶素杀白细胞素肠毒素剥脱毒素毒性休克综合征毒素1,凝固酶,游离凝固酶：采用试管法检测结合凝固酶：采用玻片法检测金葡菌凝固酶试验均为阳性凝固酶试验是鉴定金葡菌的重要标志,游离凝固酶,协同因子,凝血酶,纤维蛋白原,纤维蛋白,血浆凝固,结合凝固酶（位于菌体表面）,纤维蛋白原,纤维蛋白,细菌凝集,所致疾病,侵袭性疾病化脓性感染：疖、痈、甲沟炎、中耳炎、脑膜炎、败血症等毒素性疾病：食物中毒、假膜性肠炎等,免疫性,有一定天然免疫力病后获得的免疫力作用不强、不持久,微生物学检验,细菌鉴定的基本程序,标
4、本采集,根据病种不同，采集不同标本 脓液、创伤分泌液、穿刺液、血液、尿液、痰液、脑脊液、粪便,检验程序,脓、穿刺液、尿液、痰,脑脊液,血液,粪便、呕吐物,增菌培养,分离培养,分离培养,分离培养,直接涂片染色,鉴定试验和药敏试验,菌落涂片染色,血浆凝固酶,耐热核酸酶,药敏试验,其它试验,报告,金葡菌脓标本检验程序,脓标本,分离培养(血平板),直接涂片染色,鉴定试验和药敏试验,报告,涂片染色,检验方法直接镜检,方法:取标本直接涂片,革兰染色后镜检初步报告: “查见革兰阳性葡萄串状排列球菌，疑似葡萄球菌” “查见革兰阳性球菌”,检验方法分离培养,脓、痰、脑脊液标本接种血平板菌落特征：光滑型、中等大小
5、、脂溶性色素、透明溶血环（-溶血环）,检验方法分离培养,粪便标本高盐甘露醇平板菌落特征：光滑型、中等大小、淡黄色菌落,检验方法分离培养,血标本增菌（葡萄糖肉汤）分离培养（血平板）生长现象：混浊、胶胨状凝固、溶血,金葡菌的鉴定依据,血平板上金黄色色素、-溶血环血浆凝固酶 +发酵甘露醇 +耐热核酸酶 +,凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）,条件致病菌医院内感染的重要病原菌对多种抗生素耐药,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）是院内感染的重要病原菌之一，MRSA、MRCNS对多种抗生素耐药，MRSA不仅对青霉素类、头孢菌素类等内酰胺类抗菌药物耐药，同时也对四环素
6、、红霉素、氯霉素、克林霉素及庆大霉素等常用抗菌药物耐药，对利褔平和磺胺的耐药率也达30，但通常对万古霉素敏感。MRSA、MRCNS常常引起院内感染与播散，且难于治疗和控制，病死率高。,有资料表明两者的耐药谱及机理都有许多相似的地方，其传播方式是患者医护人员患者之间的传播，特别是医护人员手的传播，这些带菌者是有可能成为传染源，推测病房医护人员MRSA,MRCNS带菌可能是由于长期工作在病房，接触患者较多所致。,鉴定试验：血浆凝固酶试验,玻片法：检测结合型血浆凝固酶，简便快速试管法：检测游离型血浆凝固酶，灵敏,生理盐水,待检细菌,新鲜兔血浆,协同凝集试验,SPA,SPA,细胞膜,细胞质,细胞壁,链
7、球菌属,分布：自然界、人和动物肠道、健康人鼻咽部所致疾病：致病链球菌引起各种化脓性炎症、猩红热、风湿热等疾病。,生物学性状,形态染色培养特点生化反应抗原构造分类抵抗力,形态染色,革兰阳性球菌，链状排列，无鞭毛，无芽孢，可形成荚膜 在液体培养基中易形成长链 致病性强的菌株多为长链 在脓汁标本中多为短链,链球菌电镜图,链球菌革兰染色,培养特点生长条件,营养要求高，在含血液、血清培养基上生长良好需氧、兼性厌氧D群链球菌可在10、45 生长,培养特点生长现象,液体培养基：呈沉淀生长现象血平板：灰白色、细小、圆形、光滑的、有不同溶血现象的菌落,链球菌在血平板上菌落特征,分类根据溶血现象分类,甲型链球菌：
8、属条件致病菌乙型溶血性链球菌：致病力强丙型链球菌：无致病力,分类根据抗原构造分类,群特异性抗原（C抗原）：细胞壁多糖抗原，可将链球菌分为20群（A、B、C、D、E、D、E等），引起人类感染的链球菌90为A群。 型特异性抗原（表面抗原）：细胞壁蛋白抗原，有M、T、R、S四种，根据M抗原不同，可将A群分为100型。,生化反应,触酶试验（）A群链球菌：杆菌肽敏感试验（+）B群链球菌：CAMP试验（+）、马尿酸钠水解试验（+）D群链球菌：胆汁七叶苷试验（+）,肺炎链球菌生物学特性,形态染色：革兰阳性球菌，矛尖状，成双排列，在人和动物体内形成荚膜血平板上菌落特征：菌落细小、周围有草绿色溶血环，48小时后
9、，由于菌落自溶，呈现“脐窝状”生化反应：Optochin敏感试验（+） 胆汁溶菌试验（+） 菊糖分解试验（+）动物试验：小白鼠毒力试验（+）,临床意义A群链球菌,致病物质:致热外毒素：致热、细胞毒作用、使皮肤产生红疹、抗原性强溶血素：溶解红细胞、破坏血小板和白细胞，分为溶血素O和溶血素S两种侵袭性酶：透明质酸酶、链激酶、链道酶，有利于细菌在体内扩散M蛋白：具有抗吞噬作用；与肾小球基底膜有共同抗原成分，与超敏反应有关,链球菌溶素O,对氧敏感、抗原性强，刺激机体产生抗O抗体，抗O试验可用于风湿热等链球菌感染所致超敏反应性疾病的辅助诊断,临床意义A群链球菌,所致疾病化脓性感染：扁桃体炎、丹毒、蜂窝织
10、炎、淋巴管炎、败血症等猩红热风湿热、链球菌感染后肾小球肾炎,临床意义其他链球菌,B群链球菌：条件致病菌，是新生儿败血症和脑膜炎主要致病菌肺炎链球菌：引起大叶性肺炎等疾病甲型链球菌：条件致病菌，在一定条件下引起亚急性细菌性心内膜炎。变异链球菌：与龋齿有密切关系,链球菌常规检验,标本采集,根据临床标本不同采集不同标本,细菌鉴定的基本程序,脓、痰、咽拭,脑脊液,血液,增菌培养,分离培养,直接涂片染色,观察菌落及溶血现象,触酶试验（）,Optochin敏感试验,肺炎链球菌,草绿色链球菌,杆菌肽,胆汁七叶苷,A群链球菌,D群链球菌,肠球菌,6.5NaCl,血清学 分类,检验方法直接镜检,方法:取标本直接
11、涂片,革兰染色后镜检初步报告: “查见革兰阳性球菌” “查见革兰阳性矛尖状双球菌，有荚膜，疑似肺炎链球菌” 荚膜肿胀试验可确诊， “找到肺炎链球菌”,检验方法分离培养,脓、痰、脑脊液标本接种血平板，进行分离培养菌落特征： 甲型链球菌：针尖样菌落、周围有草绿色溶血环； 乙型链球菌：灰白色小菌落、周围有透明溶血环； 丙型链球菌：灰白色菌落、无溶血环 肺炎链球菌：灰白色扁瓶小菌落、周围有草绿色溶血环，培养较久形成脐窝样菌落,检验方法增菌培养,增菌培养基：葡萄糖肉汤、硫酸镁肉汤血液与培养基比例：1：10，即5ml标本，50ml增菌液。拮抗剂：硫酸镁（拮抗多种抗生素）、对氨基苯甲酸（拮抗磺胺）等培养时间
12、： 常规培养：1824小时至1周； 亚急性细菌性心内膜炎：观察7天至1月,链球菌鉴定,细菌形态及染色性菌落特征鉴定试验 杆菌肽敏感试验 CAMP试验 胆汁七叶苷试验 Optochin敏感试验 血清学分群快速胶乳凝集试验,肺炎链球菌与甲型链球菌的鉴别,乙型溶血性链球菌的鉴定,-溶血环包括A、B、C、D、F、G群C群可采用血清学鉴定其它群采用生化反应或其他鉴定试验,非-溶血性链球菌鉴定,包括肺炎链球菌牛链球菌无乳链球菌草绿色链球菌营养变异链球菌,草绿色链球菌鉴定,溶血或不溶血，胆汁七叶苷阴性，包括变异链球菌群唾液链球菌群血液链球菌群咽峡炎链球菌群,鉴定依据,A群链球菌杆菌肽敏感试验（+）B 群链球菌CAMP试验（+）、马尿酸钠水解试验（+）D群链球菌胆汁七叶苷（+）、6.5氯化钠生长（）肺炎链球菌Optochin敏感试验（+）、胆汁溶菌试验（+）、形态和菌落特征典型甲型链球菌 Optochin敏感试验（）、胆汁溶菌试验（）,肠球菌,革兰阳性球菌，短链排列营养要求高在10、45、pH9.6条件下均可生长血平板上溶血现象不定触酶试验（-）胆汁七叶苷试验（+）6.5NaCl生长试验（+）PYR试验（+）血清学分类属D群,肠球菌临床意义,引起的医院感染仅次于葡萄球菌肠球菌感染以粪肠球菌为主以尿路感染多见有不同程度耐药,肺炎链球菌电镜图,肺炎链球菌光镜图,肺炎链球菌Grams染色镜检图,
