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1、,-钙卫蛋白检测及应用,钙卫蛋白的诊断价值,肠道炎症的一种标志物；钙卫蛋白浓度的正常化是炎性肠病完全痊愈的一项重要指标。作为总胃肠道疾病人群中筛查炎症性肠病和癌症的患者的重要指标；评估和监测炎症性肠病的活动性，便钙卫蛋白对活动期CD敏感,且与UC的内镜下诊断和组织学诊断吻合性较好；便钙卫蛋白与溃疡性结肠炎(UC)内镜分级标准具有较好的相关性,可客观反映UC的炎症活动情况,比血清学指标ESR和CRP更敏感和特异；,钙卫蛋白的诊断价值,作为标志物预测溃疡性结肠炎(UC)与克罗恩病(CD)次年复发的敏感性分别为89%和87%;特异性分别为 82%和43%。鉴别炎性肠病(IBD)与肠易激综合征(IBS
2、)以及的一种敏感性及特异性均较好的生物标志物；作为一个非危险性和非侵害性的客观而敏感的肠炎诊断方法，便钙卫蛋白在区别小儿功能性腹痛与炎性肠病（IBD）、鉴定炎性活动性和在鉴定和评估小儿炎性肠病的治疗措施中尤其突显了其临床应用价值。方便无创的检查方法,可以弥补内镜检查痛苦大、价格高、不宜反复检查的不足。,临床应用的确定,2005年3月14-17日在伯明翰召开的英国肠胃病学学会（BSG）年会，专题讨论了炎性肠病（IBD）-钙卫蛋白-肠激惹综合征（IBS），将钙卫蛋白作为一个新的有用的诊断参考标志，用于：区别IBD和IBS 评估IBD炎性活动性 评估IBD黏膜治愈情况,临床应用,粪钙卫蛋白作为儿童肠
3、炎的一个标志物 粪钙卫蛋白正常化可作为一项病人炎性肠病黏膜治愈的预测和标志指标 Test的临床应用,儿童肠炎的一个标志物,Test在区别小儿功能性腹痛与IBD方面和鉴定小儿炎性肠病活动性与评估小儿炎性肠病的治疗措施中很有意义，因为该实验操作简单、无创伤，可以避免使用许多内窥镜。尤其是对于儿童在使用内窥镜时一般都需要麻醉，这个实验检测方法显得更具有特殊意义。便钙卫蛋白对小儿炎性肠病的诊断结果与用于结肠和小肠炎性疾病最好的侵入性诊断技术的结果高度相关。,炎性肠病黏膜治愈的预测和标志指标,Roseth AG等人研究发现粪钙卫蛋白正常化可作为一项炎性肠病病人黏膜治愈的预测指标。Arnott IDR等综
4、合近年来的研究认为：临床缓解不能作为克罗恩氏病（Crohns disease，节段性回肠炎）最佳的治疗目标，因为现有的抗炎治疗常常留有低级的黏膜炎性，并有复发的可能。粪钙卫蛋白作为黏膜炎的指标，其浓度的正常化可作为炎性肠病治愈和黏膜炎痊愈的更严格的鉴定指标。Gaya DR et al等认为粪钙卫蛋白给评估克罗恩氏病活动性带来了光明的前途。,Test的临床应用,Fagerhol MK，Bjarnason I，Aadland E和TibbleJA等临床研究证实便钙卫蛋白的水平反应IBD疾病的活动性，Test可以用于鉴定IBD的治疗效应和检测复发，并证实该检测试剂盒可用作目前临床肠疾病常用的红细胞沉
5、降率(ESR)实验的筛选实验，筛选出需进一步检查的病人，避免内窥镜等昂贵的并有侵入性的检查措施。Bjarnason I等临床研究证实该试剂盒可作为腹泻或腹部不适的一项新的诊断工具，在区别克罗恩氏病和肠激惹综合征的敏感性和特异性分别是100%和97%。Aadland E等研究证实该试剂盒检测胃和结肠直肠癌的敏感性分别是100%和90%，即比便潜血实验的敏感性高很多。近年来，越来越多的临床医学家研究表明了便钙卫蛋白在炎性肠病中的鉴别与诊断价值，很多文章也见诸相关国际期刊。,国外相关论述,美国梅奥医院Pardi等的研究显示,便钙卫蛋白(calprotectin)是鉴别炎性肠病(IBD)与肠易激综合征
6、(IBS)的一种敏感性及特异性均较好的生物标志物。(Gut 2005,54321)多种实验室生物标志物被用于诊断IBD,并作为评价其活动度和严重度的指标,亦可预测缓解期患者的复发危险。如果一个标志物能可靠地把活动期IBD与其他炎症或非炎症引起的症状区分开,或能把克罗恩病(CD)与溃疡性结肠炎(UC)区分开,那么它就可以用于指导治疗。此外,简单、廉价、具有敏感性和特异性好的标志物,可有助于在临床上和试验中监测灵敏度。,国外相关论述,Costa及其同事研究了便钙卫蛋白作为标志物在预测UC和CD复发中的作用。钙卫蛋白可代表50%60%的嗜中性粒细胞溶质蛋白,排出体外后可在粪便中保持稳定数天,且对其进
7、行化验相对简单。Costa等对38例处于缓解期的CD患者和41例UC患者(缓解期平均5个月)进行研究。结果显示,基线便钙卫蛋白水平高于150 g/g,对预测次年UC和CD病情复发的敏感性分别为89%和87%;特异性分别为82%和43%。,国外研究结果总结,以往的研究已显示,便钙卫蛋白对活动期CD敏感,且与UC的内镜下诊断和组织学诊断吻合性较好。该研究结果也是对诊断IBD生物标志物的补充。,国内研究进展,北京大学第三医院消化科刘文斌，吕愈敏，杨雪玲等评估了粪便钙卫蛋白测定作为一种非侵入性方法判断溃疡性结肠炎(UC)活动性的价值,并与目前临床最常用的客观指标红细胞沉降率(ESR)和C-反应蛋白(C
8、RP)进行比较，同时检查血红蛋白、白蛋白、ESR和CRP,记录患者1周内的临床表现。疾病活动性根据内镜和组织学标准判断。取结肠镜正常的61例门诊患者粪便样本作为对照.结果活动期UC组粪便钙卫蛋白水平(515g/g)显著高于缓解期(7.5 g/g,P0.01)和正常对照(5.7 g/g,n=61,P0.01),后两者之间差异无统计学意义(P0.05);缓解期与活动期各级(、期)差异有统计学意义(P0.01);粪便钙卫蛋白水平与活动期UC内镜分级显著相关(r=0.876,P0.01),CRP和ESR与内镜分级的相关系数分别为r=0.725(P0.01)和r=0.302(P0.01),低于粪便钙卫蛋
9、白。结论粪便钙卫蛋白与UC内镜分级标准具有较好的相关性,可客观反映UC的炎症活动情况,比血清学指标ESR和CRP更敏感和特异;而且是一种方便无创的检查方法,可以弥补内镜检查痛苦大价格高、不宜反复检查的不足.具有临床推广价值。,国际上应用现状,便钙卫蛋白对炎性肠病的发展、治疗效应、痊愈的鉴定和诊断价值已经越来越受到医学家们的关注。目前，美国、英国、加拿大、法国、德国、瑞士等二十多个国家已将便钙卫蛋白作为总胃肠道疾病人群中筛查炎症性肠病和癌症的患者的重要指标、炎性肠病活动性、痊愈的重要标志，广泛应用于临床。,钙卫蛋白快速检测卡,钙卫蛋白快速检测卡是一种用于快速检测粪便中钙卫蛋白的半定量免疫层析方法
10、。检测粪便中的钙卫蛋白可区分不同的肠内器官疾病（如慢性炎症疾病、传染性疾病、息肉、结肠癌）和肠内功能性疾病（如肠易激综合征）。检测钙卫蛋白也是疾病活性监测（如M.Crohn或息肉切除术后）、复发的早期检测和治疗疗效监测的理想标志物。使用三种检测线能使内科医生区别钙卫蛋白阳性的不同程度。,检测技术背景,钙卫蛋白(MRP 8/14)是一个由两个钙结合蛋白组成的异聚体(MRP8 and MRP 14)出现在嗜中性细胞的细胞质，并通过单核细胞膜上表达。它由在嗜中性粒细胞中近60%可溶胞质蛋白组成并且在嗜中性粒细胞中扮演一个中心防卫的角色。在嗜中性粒细胞激活或单核的内皮粘附之上，钙卫细胞被释放并且能在血
11、清、体液或粪便作为潜在有用的临床炎症的标志物进行检测。这个急性时相反应蛋白在粪便显示出很好的稳定期（室温下稳定1个星期）并且已经确定为炎症性肠病的标志物(IBD)。它能可靠分辨出肠内器宫疾病（如慢性炎症疾病、传染性疾病、息肉、结肠癌）和肠内功能性疾病（如肠易激综合征）。,检测原理,采用胶体金免疫层析法，通过包被3条不同浓度的抗体线，根据样品与不同浓度的检测线结合，可实现半定量检测。,检测性能,钙卫蛋白是监测疾病活性监测（如M.Crohn或息肉切除术后）和复发的早期检测的理想标志物。它在检测结肠直肠癌(CC)和息肉显示出高的灵敏度(CRC大肠癌：灵敏度100%，息肉：灵敏度88%)。钙卫蛋白可进
12、一步适用于鉴别器官的腹泻和功能性腹泻。,试剂盒的组成,试剂盒组成：由检测卡、样品稀释液 组成,储存条件和样本类型,试剂储存：2-30 检测使用标本：粪便,操作步骤,挑取粪便标本用缓冲液稀释标本并混匀吸取稀释后样品滴加入检测窗10分钟后观察结果,结果观察,阴性：只在对照质控区（R和C）位置出现两条红色条带。在检测区（T）内无红色条带出现。阴性结果表明：样本中的钙卫蛋白含量低于15g/g，提示样本中的钙卫蛋白处在正常水平。,结果观察,阳性：对照质控区（R和C）和检测区（T）位置都出现红色条带。其中质控区（C）条带比对照区（R）条带颜色深。（1）当样本中钙卫蛋白浓度大于15g/g，且小于60g/g时
13、，检测区（T）出现一条红色条带，且检测区（T）比对照区（R）的显色强度弱；提示样本中的钙卫蛋白处在正常水平，但存在肠易激综合症风险。（2）当样本中钙卫蛋白浓度等于60g/g时，检测区（T）与对照区（R）的显色强度一致；（3）当样本中钙卫蛋白浓度大于60g/g，检测区（T）的显色强度比对照区（R）深；提示存在肠炎疾病风险。,结果观察,无效：对照质控区（R和C）位置任何一条没有出现红色条带。无效结果表明：可能原因是不正确的操作过程或试剂已变质损坏。对无效结果应重新试验，重新试验时应严格按照说明书操作。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。,产品优势,采用胶体金免疫层析法，操作简便、快速有三条检测线，可实现半定量检测 使用粪便检测，标本无需特殊处理作为溃疡性结肠炎UC的重要标志物，其稳定性优于其他粪便标志物，检测更有意义高灵敏度、高特异性,谢谢观看！,欢迎您的加入,此课件下载可自行编辑修改，供参考！感谢您的支持，我们努力做得更好！,
