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1、1,原理和方法,UFC系列培训,UF100Launched in 1995,UF50Launched in 1999,流式细胞技术,YELLOW IRISLaunched in 1987,Launched in 1993,Launched in 1990,图象处理技术,尿沉渣分析仪发展史,3,UF-100/50 特点,简化流程,提高效率 高质量的有效筛选 自动化,结果准确,重复性好 定量数据 标准化检测 迅速得到红细胞形态信息,4,系统和试剂样本用量和信号的产生微粒的识别数据的显示升级的软件,5,系统,6,UF-100,7,UF-50,8,彩色打印机打印出带有散点图和直方图的测试结果(选购),
2、气动单元,票据打印机可将测试结果打印在票据上。可接受不同尺寸的票据。(选购),9,UF-50与UF-100相同的打印机选购件与UF-100相同 LPU-2和 LPU-3气动单元(PU15)比 UF-100 气动单元(PU 13)小,10,试剂,11,UF-100 试剂,染液,稀释液,鞘液,12,UF-100 试剂CELLSHEATH:鞘液URINOPACK:稀释液URINOSTAIN:染液CELLCLEAN:清洁试剂UF CHECK:质控物,13,UF-50 试剂CELLSHEATH:鞘液URINOCATCH:稀释液URINOCATCH:染液CELLCLEAN:清洁液UF CHECK:质控物,
3、14,URINOCATCH:染液,9-氮杂菲(Phenanthridine)染色DNA和RNA激发波长480nm,荧光波长610nm发射荧光为:橙色对死细胞胞膜穿透性强羰花青(Carbocyanine)细胞膜、核膜以及线粒体等膜性物质被染色激发波长460nm,荧光波长505nm发射荧光为:绿色,15,UF-100 试剂消耗,CELLSHEATH(鞘液)20L每桶:400个循环URINOPACK(稀释液):5L每桶:3205个循环URINOSEARCH(染液)42mL每包:1050个循环(3包为1组)UF CHECK(质控物)50 ml每瓶:50个循环CELLCLEAN(清洁试剂)50 ml每瓶
4、:可做62次正常关机(shutdown),16,UF-50 试剂消耗,CELLSHEATH(鞘液)每次35 ml;570次/20L(桶)URINOCATCH:染液每次40 ml;700 次/28 ml(包)URINOCATCH;稀释液每次1560 ml;640次/1 L(瓶)UF-check(质控物)50 ml每瓶:50个循环Cellclean 清洁试剂)50 ml每瓶:可做62次正常关机(shutdown),17,UF-50 试剂消耗,开机自动清洗分析唤醒关机2 Hand outs,18,样本用量,19,样本用量,样本用量:手动模式:1 ml;进样器模式:4 ml吸引量:UF-100:手动模
5、式:800uL;进样器模式:800 L UF-50:手动模式:800uL;进样器模式:1500 L 分析量:9 l 尿液 整个测量过程为23秒.2秒用与细菌测量1秒不测量20秒进行其他微粒的测量=共测量7.8l,20,信号的产生,21,.,光电二极管,AMP,AMP,反射镜1,反射镜2,聚光镜,电极(+),挡光片,集光镜,点孔,分光镜,样本喷嘴,氩激光(波长 488nm),光电倍增管,AMP,电导传感器,电阻法信号,荧光信号,前向散射光信号,电极(-),UF-100的激光单元,Fl(荧光),染液灵敏度,高度,宽度,Flw(荧光脉冲宽度),包涵物的长度(incl.nucleus),可组合的区域,
6、Fsc(前向散射光),细胞的长度,Fscw(前向散射光脉冲宽度),细胞的容积,Imp(电阻抗法),电阻法信号,放大器,样本(尿液),电导传感器,鞘液,激光束,前向散射光信号,放大器,放大器,荧光信号,高度,宽度,高度,23,电阻法测量,在 UF-100中,EC,SRC and cast 的计数由一个很小的电阻信号触发。电阻法还用于将 casts从黏液中,将 SRC从 EC中区分出来。在 UF-50中,所有微粒的计数都由一个很小的 Fsc 信号触发。,24,微粒区分,25,定量参数:RBC(红细胞)WBC(白细胞)Epithelial cells(上皮)CAST(管型)BACT(细菌),26,打
7、标记参数:,Yeast(类酵母细胞)Crystal(晶体)Inclusion-CAST(病理管型)Small Round Cell(小圆细胞)Sperm(精子),检测信号,氩激光,Flow celle,激光镜,光电二极管,+,-,电极,前向散射光,Forward scatter light:,(Fsc)前向散射光强度反映了微粒的大小(直径),(Fscw)前向散射光引起的电脉冲时间反映微粒的长度,上皮细胞Epithelial cell,RBC,WBC,Cast,Bact,Fsc(强度),Fscw,x,y,x,y,x,x,y,y,光电倍增管,检测信号,+,-,荧光,荧光的强度(Fl)反映了微粒被染
8、色的能力,荧光信号引起的单个的电脉冲的时间(Flw)反映了被染色区域的长度,(Fl),(Flw),x,y,x,y,x,x,y,y,氩激光,Flow cell,激光镜,光电二极管,电极,光电倍增管,上皮细胞Epithelial cell,RBC,WBC,Cast,Bact,荧光,29,数据显示,.,RBC,小-中 大小,低荧光,Fl,Fsc,Fl,Fsc,中-大 大小,中-高荧光,Fl,Fsc,很小,大小(可组合区域),大,小,荧光,高,低,细菌,WBC,低荧光,Fl2,Fsc,Fl/Fsc-散射图,Fl/Fsc-散射图,小,.,上皮细胞,Flw,Flw,大,小,细胞的长度,长,短,Fscw,病
9、理管型,Flw,Fscw,Flw,长包涵物,Fscw,Fscw,中等长度包涵物,无包涵物,长,长,管型(无包涵物),包涵物长度,中-短长度,Flw/Fscw-散射图,Fscw/Flw-散点图,34,微粒在散点图中的分布,第一屏:散点图上各种微粒分布的区域,第一屏:散点图上各种微粒分布的区域,第二屏:散点图上上皮细胞分布的区域,35,UF-100,1st screen(=UF/50 print out),36,UF-100,2nd screen(=UF/50 print out),37,First screen UF-50,38,Second screen UF-50,39,SYSMEX 尿分析
10、仪的软件升级,40,相关的参数和相映的改变,RBC(红细胞)RBC形态判别的基础RBC 形态的命名用户可定义的 RBC形态显示的界限Bacteria(细菌)Detection gates“UTI flag”,41,尿红细胞变形机理肾小球机械性损伤伴肾小管内pH、渗透压作用肾小管内不同渗透压作用,新参数用一定的Fsc 代替细胞的百分比,我们使用两个新的参数:1.大多数RBCs的大小2.大多数RBCs的大小变化,42,新参数:RBC大小,RBC P70 Fsc(红细胞整体大小)将70%非溶RBC所在区域的Fsc定义为界限正常红细胞:100 ch小细胞:80 ch,前向散射光强度(ch),RBC F
11、sc直方图,频率非溶红细胞数量,43,基于新参数的RBC形态的判别,RBC-P70 Fsc,100 ch,0 ch,80 ch,100 ch,250 ch,50 ch,Microcytic,Normocytic,Mixed,Mixed,Mixed,RBC-Fsc-DW,44,新参数:RBC 大小的变化,RBC-Fsc-DW(非溶血红细胞的Fsc除曲线的上部和下部20%外,非溶血红细胞分布的Fsc的宽度用直方图反映宽度的分布变化:50 ch一致:50 ch,RBC Fsc 直方图,45,基于新参数的红细胞形态的判别,RBC-P70 Fsc,100 ch,0 ch,80 ch,100 ch,250
12、 ch,50 ch,小红细胞,正常红细胞,未分类,未分类,未分类,RBC-Fsc-DW,(非溶血红细胞的Fsc变化),(红细胞整体大小),46,红细胞信息,UF-100 屏幕显示结果,红细胞信息(根据红细胞前向散射光强度直方图判断)Dysmorphic(不均一小红细胞)?=提示红细胞源于肾小球Isomorphic(正常均一红细胞)?=提示红细胞非来源于肾小球Mixed(混合型)?=RBC前向散射光直方图显示出一个混合型细胞分布,RBC 直 方 图,48,细菌系统法则UTI 标记,三个参数决定 UTI-标记1.细菌的平均大小(Fsc mean)2.细菌的数目(三个范围)3.白细胞的计数,=Neg
13、ative,Bact_Mfsc(ch.),Bact count(/mL),WBC count(/mL),10/mL,20/mL,2,573/mL,8,040/mL,18 ch,=Negative,Bact_Mfsc(ch.),Bact count(/mL),WBC count(/mL),10/mL,20/mL,2,573/mL,8,040/mL,18 ch,=Low reliable,=Negative,Bact_Mfsc(ch.),Bact count(/mL),WBC count(/mL),10/mL,20/mL,2,573/mL,8,040/mL,18 ch,=Low reliable,
14、=Negative,Bact_Mfsc(ch.),Bact count(/mL),WBC count(/mL),10/mL,20/mL,2,573/mL,8,040/mL,18 ch,=Low reliable,如何激活使用此法则,Service Change System settings(UF-100)Service Settings System(UF-50)BACT RULE:USEDBACT alogorithm:NEW Settings(Data)Criteria Negative LimitsBACT system rule:YES-BACT flag is obtainedSe
15、ttings(Data)Criteria Review LimitsBACT system rule:YES-When BACT flag is“*”then review.,BACT Flag follows BACT system rule,which threshold is in service program.Flags:none,*or+,使用此法则但不显示“*”标记,Service Change System settings(UF-100)Service Settings System(UF-50)BACT RULE:USEDBACT ana:NEW(note:UF-50 is
16、 not available.)Settings(Data)Criteria Negative LimitsBACT system rule:YES-BACT flag is obtainedSettings(Data)Criteria Review LimitsBACT system rule:NO-Even BACT flag is“*”“review”flag is not displayed.,BACT Flag follows BACT system rule,which threshold is in service program.Flags:none,*or+,如何恢复老的细菌分析,Service Change System settings(UF-100)BACT RULE:NOT USEDBACT ana:OLD(note:UF-50 is not available.),BACT Flag follows negative and review limit settings in user settings.Flags:none,+or+&review,Analysis algorithm of BACT#/uL follows the one of ver.12 or former.,