2第二章白细胞参数检查128精选文档.ppt

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1、血液一般检查在临床上应用最广泛 红细胞参数检查 包括 白细胞参数检查 血小板参数检查,其中 红细胞计数(RBC)血红蛋白测定(Hb)白细胞计数(WBC)白细胞分类计数(DC)等四项应用最多,旧称为血常规。,血液一般检验的方法有两种:手工法:用显微镜单项计数;血液分析仪法:多项计数,三分群血液分析仪结果报告单,WBC 白细胞计数 LYM#淋巴细胞绝对值LYM 淋巴细胞百分比MID#中间细胞绝对值MID 中间细胞百分比GRAN#中性粒细胞绝对值 GRAN 中性粒细胞百分比 RBC 红细胞计数 Hb 血红蛋白测定,HCT 血细胞比容 MCV 红细胞平均体积MCH 红细胞平均血红蛋白含量MCHC 红细

2、胞平均血红蛋白浓度RDW 红细胞体积分布宽度PLT 血小板计数 MPV 血小板平均体积PCT 血小板比容 PDW 血小板体积分布宽度,三分群血液分析仪检测指标(21项),白细胞直方图 红细胞直方图血小板直方图,第二节 白细胞参数检查,外周血正常白细胞类型 中性粒细胞(N)70%粒细胞 嗜酸性粒细胞(E)嗜碱性粒细(B)单核细胞(M)淋巴细胞(L)30%,白细胞分三类五种,p42,第二节 白细胞参数检查,原始粒细胞 晚幼粒 早幼粒细胞 分裂池 杆状核 成熟池 中幼粒细胞 分叶核细胞 骨髓贮存池 进入外周血的粒细胞 50 50 在血循环中 粘附于小静脉和毛细血管壁上 循环池粒细胞 边缘池粒细胞 它

3、们之间可迅速地进行交换,以保持动态平衡,粒细胞发育过程,干细胞池,第二节 白细胞检查,感染、炎症、组织损伤或坏死、中毒、贫血;结缔组织病、骨髓抑制(电离辐射、细胞毒药物、免疫抑制剂、抗甲状腺药物)恶性肿瘤、白血病、骨髓增殖性疾病、淋巴组织增生病、,白细胞检查的选择,第二节 白细胞检查,一、白细胞计数【显微镜法原理】用稀醋酸溶液,将血液稀释一定倍数并破坏红细胞,混匀充入计数池,在显微镜下计数一定体积内的白细胞数,经过换算求得每升血液中的细胞数。,有二个计数池,每个计数池有9个大方格,每个大方格长、宽均是1mm,加特制盖片后高度为0.1mm。故1个大方格体积为0.1mm3。,计数板的结构,实验指导

4、p7,器材,【计算】,WBC/L=102010 6 4,四大格白细胞总数,=-109,20,四大格白细胞总数,4:算出每大格内平均白细胞数(0.1l)10:换算为1l的容积;20:稀释倍数10 6:换算成每升血中浓度,【结果报告】WBC:109/L,第二节 白细胞参数检查,【方法学评价】1.显微镜计数法:为血液分析仪校准的基本方法(严格规范下)。简单易行,不需昂贵仪器。但影响因素多:微量吸管、计数板、细胞分布范围、人为因素等,重复性差。2.血液分析仪法:快速、标准化、精确性高、适合大规模人群检查。但某些人为或病理因素可干扰白细胞计数。,第二节 白细胞参数检查,【质量控制】(一)计数误差1、技术

5、误差:是由于操作不正规或 使用器材不准确造成的误差。(1)器材:清洁、干燥、校准(2)标本要求:采血迅速,避免凝血,深度适宜,不能过度挤压,稀释度要准。(3)盖片放置方式:推式加盖玻片法,更能保证充液体积高度为0.1mm。,第二节 白细胞参数检查,(4)充池要求:(5)细胞分布较均匀,若每大格间细胞数相差8个时,应重新充池计数,二次重复计数结果相差不10%。,【质量控制】(一)计数误差 1、技术误差:,第二节 白细胞参数检查,(6)对压线细胞的计数原则:数上不数下 数左不数右,【质量控制】,第二节 白细胞参数检查,(7)白细胞稀释液不能破坏有核红细胞,因此在病理情况下周围血出现有核红细胞时,可

6、使白细胞数偏高,应进行校正:,【质量控制】,WBC/L(真值)=X-,100+Y,100,X:校正前白细胞数 Y:分类100个白细胞时,遇到的有核红细胞数,第二节 白细胞参数检查,2、固有误差:在每次计数时,不可避免产生的误差,包括:计数域误差吸管误差 固有误差 计数室误差,第二节 白细胞参数检查,2、固有误差:1)计数域误差:由于每次充池后,细胞在计数池分布不可能完全相同所造成的误差,叫计数域误差。,一、白细胞计数,第二节 白细胞参数检查,2、固有误差:1)计数域误差:细胞在计数室内随机分布符合Poisson分布,其细胞计数的标准差(s)为:s=m,m为重复计数均值,细胞计数域的变异系数(C

7、V)为:CV(%)=s/m 100%=m/m100%=1/m 100%意义:CV可以通过计数细胞增多而变小。,第二节 白细胞参数检查,2、固有误差:1)计数域误差:,当白细胞15.010/L可适当增加稀释倍数。,第二节 白细胞参数检查,2、固有误差:1)计数域误差:,2)吸管、计数室误差:由于不精密所致。可通过计数次数越多,即使用吸管、计数室次数越多误差将减少。,第二节 白细胞参数检查,2、固有误差:1)计数域误差:2)吸管、计数室误差:,3)固有误差总变异系数的数学公式:,1002+4.62+4.72CV=nb nc np,nb 所数细胞总数nc 计数板使用次数np 吸管使用次数,第二节 白

8、细胞参数检查,(二)生理状况的影响:运动、劳动、冷热水浴、酷热、严寒可出现一过性增高,一日内可差1倍;吸烟者平均比不吸烟者高30%,所以,最好是定时检查,一、白细胞计数【质量控制】(一)计数误差,【参考区间】WBC:成人(4.010.0)109/L 新生儿(1520)109/L 6月2岁(1112)109/L GRAN:5070 GRAN:(2.07.2)109/L(绝对值),第二节 白细胞参数检查,一、白细胞计数,第二节 白细胞参数检查,白细胞是与红细胞相对而得名,是一种无色有 核细胞,呈球形,直径725 m。【原理】将血液制成血涂片用瑞氏染液染色 根据各种白细胞形态特征分类计数100个白细

9、胞 即可求出各种白细胞的相对比值或百分率。,二、白细胞分类计,第二节 白细胞参数检查,【粒细胞特点】1)这类细胞均含有特殊颗粒,故名粒细胞。2)由于这些颗粒对染料亲和力不同,可分为中性、嗜酸性、嗜碱性三种颗粒。根椐细胞内所含特殊颗粒而对粒细胞命名。,二、白细胞分类计数,第二节 白细胞参数检查,3)粒细胞因其成熟阶段不同,核形可分杆状和分叶核。,二、白细胞分类计数【粒细胞特点】,杆状核(st):为不完全成熟细胞。数量5%核凹陷超过假设圆直径的3/4,核径最狭窄处大于最宽处的1/3。呈马蹄形、S、V、W、U形等,,分叶核:核径最狭窄处小于最宽处的1/3。,第二节 白细胞参数检查,(二)外周血正常白

10、细胞形态 p57,二、白细胞分类计数,1.中性粒细胞(N),2.嗜酸性粒细胞(E),3.嗜碱性粒细胞(B),三种粒细胞的鉴别-鉴别要点 中性颗粒 嗜酸性颗粒 嗜碱性颗粒-颗粒数量 大量 大量 量少,大小及均匀 细小,均匀 粗大,均匀 粗大,大小不等分布排列 均匀,弥散 均匀,紧密 不均匀,排列稀疏颗粒形状 尘土状 球状折光 不规则块状掩盖核 不 不 可掩盖核,致核形不清化学性质 中性物质 碱性物质 酸性物质瑞氏染色 粉红或 桔红或 深紫红或颜色 淡紫红 浅咖啡色 紫黑色-,4.淋巴细胞(L),5.单核细胞(M),2,4,7,5,6,3,1,五种白细胞的比较细胞 直 径 核/浆 核 形 染色质

11、胞 浆N 1015 中 杆状/分叶 粗造不均 颗粒量多、细小均匀、染粉红色、散在分布E 1315 小 多分2叶 粗造 粗大、均匀、紧密排列,呈眼镜状有立体感、桔红色 1012 大 分叶不清 粗造 少量粗大、大小不均、紫黑色、常盖于核上 6 15 大 圆形/肾形 粗造成块 透明淡蓝色,无颗粒或少量大小不等紫红色的嗜天青颗粒 1525 中 肾形、马碲 疏松 半透明淡蓝色、淡灰,形、有折叠 网状 有较多细小尘土样紫红 色嗜天青颗粒,散在分布,第二节 白细胞参数检查,(三)外周血异常白细胞形态 1、异常中性粒细胞形态:p59中性粒细胞毒性变:见于严重细菌感染性疾病、中毒、大面积烧伤、恶性肿瘤等。,二、

12、白细胞分类计数,中毒颗粒,中毒颗粒,毒性指数:计数100200个中性粒细胞,同时记录有中 毒颗粒的细胞。有中毒颗粒的细胞数毒性指数-所数中性粒细胞总数,毒性指数=1为极度,示病情严重=0.75为重度=0.50为中度 0.25为轻度,大小不均:,空泡变性:,杜勒体,核棘突:,鼓槌状小体,退化细胞,Auer小体,皮杰核畸形:中性粒细胞核呈肾形,染色质浓缩、深染,不分叶,核固缩:核呈均匀而深紫色的块状物。,核碎裂:核碎裂 数块,(1)异型淋巴细胞:由于某种原因如病毒感染或变应原的刺激,使淋巴细胞增生,并发生了某些形态变化,称异型淋巴细胞。异型淋巴细胞多为T淋巴细胞,其形态变异系增生亢进,甚至发生母细

13、胞化的结果。正常2%,病毒感染(肝炎、风疹等)2%,但5%;传染性单核细胞增多症时常10%,为其诊断指标之一。,2.淋巴细胞变异:p65,第二节 白细胞参数检查,二、白细胞分类计数,按其形态可分为三型:型(空泡型)-浆细胞型:型(不规则型)-单核细胞型:型(不成熟型)-幼稚型,未成熟细胞型。,浆细胞型,幼稚型,单核细胞型,型,型异淋,(2)具有卫星核的淋巴细胞,即在淋巴细胞主核旁边另有一个游离的小核。见于:接受较大剂量的电离辐射之后,或其他理化因子、抗癌药物等对细胞造成损伤时。常作为致畸、致突变的客观指标之一。,第二节 白细胞参数检查,二、白细胞分类计数,第二节 白细胞参数检查,(四)白细胞分

14、类计数(DC)的方法 1、血片检查的内容:(1)对周围血进行形态观察:(2)进行白细胞分类计数:求出各种白细胞的百分比,(3)有无异常细胞:高雪氏细胞,恶性网状细胞。(4)周围血中有无寄生虫:原虫,黑热病小体,二、白细胞分类计数,第二节 白细胞参数检查,2、分类的操作过程:实验指导 p32 推片 染色 低倍镜观察,选择细胞分布均匀、染色好的部位 转油镜下计数100200个白细胞,求出各种白细胞所占百分比。,二、白细胞分类计数,(四)白细胞分类计数(DC)的方法1、血片检查的内容:,第二节 白细胞参数检查,2、分类的操作过程:血片各部位细胞分布情况:头体部:以淋巴细胞较多尾部和两侧:以中性粒、单

15、核细胞较多,片尾部:异常大的细胞较多.,二、白细胞分类计数,(四)白细胞分类计数(DC)的方法1、血片检查的内容:,%=某白细胞的数量/计数白细胞总量100%绝对数(10 9/L)=WBC某种白细胞分类计数比值,(2)部位的选择:一般选择片头至片尾的2/3区域计数较好,即体尾交界处,按一定方式,有规律的移动视野,依次、随机、迂回、不重复视野。,第二节 白细胞参数检查,【方法学评价】:1、显微镜法:是经典的白细胞分类法,能够准确地根据细胞形态特征进行分类计数,并可发现血细胞形态、结构、染色、分布是否有异常,是白细胞分类计数的参考方法;但其耗时,且影响因素较多,精确性及重复性较差,不适于大量健康人

16、群的筛检。,二、白细胞分类计数,p46,第二节 白细胞参数检查,【方法学评价】:2、血液分析仪:三分类:是以较低廉的成本筛检正常人群的白细胞,但是不能准确提供异常白细胞分类结果。五分类:由于综合应用了电阻抗、光学、细胞化学、荧光分析等技术,能准确地把白细胞分为嗜中性、嗜酸、嗜碱粒细胞及淋巴细胞和单核细胞。,二、白细胞分类计数,第二节 白细胞参数检查,【质量控制】1、计数误差(1)涂片制备和染色(2)观察部位 细胞在涂片中分布不匀,胞体大的细胞和幼稚细胞分布在涂片尾部,胞体小的细胞分布在片头,如淋巴细胞和嗜碱性细胞。所以分类的最佳部位是体尾交界处。,二、白细胞分类计数,第二节 白细胞参数检查,(

17、3)计数范围和移动规律(4)计数白细胞的数量 被计数的细胞占总计数细胞的比例越大,所计数细胞的总数越多,误差就越小即增加计数细胞,扩大计数范围,可缩小误差。,二、白细胞分类计数,【质量控制】1、计数误差(1)涂片制备和染色(2)观察部位,第二节 白细胞参数检查,(4)计数白细胞的数量 表2-41 被计数的细胞占总计数细胞的比例越大,所计数细胞的总数越多,误差就越小即增加计数细胞,扩大计数范围,可缩小误差。当病人白细胞极少(一张片100个WBC),可数 50个细胞,再算出百分数,同时应注明计数细胞数。或数2张片子,并注明。,【质量控制】1、计数误差,第二节 白细胞参数检查,(5)注意事项 观察全

18、片:低倍镜油镜 异常和幼稚细胞的记录:发现幼稚或异常白细胞,应分类,并包括在分类计数的100白细胞中(百分率中)。发现有核红细胞,应报告分类100个白细胞所见有核红细胞数X:100(不含于分类的100白细胞中)。,二、白细胞分类计数【质量控制】,第二节 白细胞参数检查,注意其他血细胞形态:如遇到不能确认的细胞,应另列入分类不明一项,如实报告,并保留血片。,二、白细胞分类计数【质量控制】,(5)注意事项 观察全片:低倍镜油镜 异常和幼稚细胞的记录:,第二节 白细胞参数检查,二、白细胞分类计数,【质量控制】2、质量考核与评价 目前仍缺乏统一的质量控制方法,关键在于熟练操作技术,严格控制各个操作环节

19、,尽量减少误差。常用重复计数后计算的S或CV来表示 总之:计数细胞的总数越多,误差就越小。即增加计数细胞,扩大计数范围,可缩小误差。,第二节 白细胞参数检查,经验控制:(1)与红细胞数相对比较,周围血红细胞/白细胞=500600:1,二、白细胞分类计数【质量控制】,第二节 白细胞参数检查,经验控制:(2)将白细胞计数结果与血涂片中白细胞分布情况对照。,WBC(109/L)血片中WBC数/HP 47 24 79 46 1013 610 1318 1020,第二节 白细胞参数检查,二、白细胞分类计数,【参考区间】%绝对值中性杆状核 Nst 1%5%0.040.05中性分叶核 Nsg 50%70%2

20、.007.00嗜酸粒细胞 E 0.5%5%0.020.50嗜碱粒细胞 B 0%1%00.10淋巴细胞 L 20%40%0.804.00单核细胞 M 3%8%0.120.80,第二节 白细胞参数检查,三、白细胞计数和分类计数的临床意义 由于中性粒细胞占白细胞总数的50%70%所以中性粒细胞的变化直接影响白细胞总数的变化。二者之间有着密切的关系和相同的意义,但二者增减不绝对一致,要具体分析。,第二节 白细胞参数检查,三、白细胞计数和分类计数的临床意义,分析白细胞分类变化意义时,必须计算各类型白细胞的绝对值才有诊断参考价值。各类型白细胞绝对值白细胞计数值白细胞分类计数百分率。,【生理变化】(1)年龄

21、的变化:WBC:新生儿期(15 20)10 9/L(个别3010 9/L)3 4天降至1010 9/L 3个月后逐降至成人水平。,第二节 白细胞参数检查,(一)中性粒细胞1.中性粒细胞数量变化的临床意义(WBC、GRAN#、GRAN),【生理变化】(1)年龄的变化:DC:初生期外周血白细胞主要为中性粒,6 9天N下降至与淋巴大致相等,以后L增高,整个婴儿期L可达70%。2 3岁后L逐下降,N上升,至4 5岁,二者相等,形成第二次交叉。至青春期,N与成人相同。,第二节 白细胞参数检查,1.中性粒细胞数量变化的临床意义,【生理变化】(2)日间变化:一日内最高值与最低值可相差一倍左右。(3)运动、疼

22、痛和情绪影响:因体内白细胞重新分布和骨髓释放增加,使WBC,以N为主。(4)吸烟者平均高于非吸烟者30%,第二节 白细胞参数检查,1.中性粒细胞数量变化的临床意义,【生理变化】(5)妊娠期:妊娠5个月WBC可达15109/L,以中性粒细胞增多;妊娠最后1个月WBC 常波动于(1217)109/L分娩时可达34109/L分娩后 2 5天内恢复正常,第二节 白细胞参数检查,1.中性粒细胞数量变化的临床意义(WBC、GRAN#GRAN),【病理变化】(1)增多:成人10109/L新生儿20109/L 为白细胞增多2岁以内12109/L WBC30109/L,提示可能为白血病。,第二节 白细胞参数检查

23、,1.中性粒细胞数量变化的临床意义(WBC、GRAN#GRAN),急性中毒:急性化学药物中毒、代谢性中毒 急性大出血:严重组织损伤或急性溶血:白血病及恶性肿瘤:,第二节 白细胞参数检查,【病理变化】(1)增多:急性感染或化脓性炎症:,三、白细胞计数和分类计数的临床意义 1.中性粒细胞数量变化的临床意义,(2)减少:WBC4109/L称为白细胞减少。中性粒细胞绝对值1.5109/L,称粒细胞减少症;粒细胞0.5109/L,为粒细胞缺乏症。,第二节 白细胞参数检查,1.中性粒细胞数量变化的临床意义,(2)减少:1)感染:某些病毒性感染、某些革兰阴性菌感染(伤寒、副伤寒)、某些原虫感染(疟疾、黑热病

24、)。2)血液系统疾病:3)理化损伤:4)单核-巨噬细胞系统功能亢进:如脾亢、门脉性肝硬化、淋巴瘤等疾病。5)免疫性破坏增加:,第二节 白细胞参数检查,1.中性粒细胞数量变化的临床意义,第二节 白细胞参数检查,2、中性粒细胞的核象变化:核象变化是指外周血中性粒细胞核的分叶状况,反映粒细胞的成熟程度。,p61,第二节 白细胞参数检查,2、中性粒细胞的核象变化:,第二节 白细胞参数检查,2、中性粒细胞的核象变化 核左移:外周血杆状核或杆状核以上的幼稚粒细胞增多,超过5%时称核左移。,第二节 白细胞参数检查,核左移:再生性左移:核左移伴WBC增多,表示机体反应性强,骨髓造血功能旺盛。常见于各种病原体所

25、致的感染,特别是急性化脓性感染时,其次见于急性中毒、急性溶血、失血、类白血病反应等,白血病时也可引起核左移,为骨髓病理造血,不表示骨髓造血功能旺盛。,2、中性粒细胞的核象变化:,第二节 白细胞参数检查,核左移:退化性左移:核左移伴WBC减少或正常,表示机体反应低下,骨髓造血功能减低或粒细胞成熟障碍,见于再生障碍性贫血、粒细胞减少症、败血症、伤寒等。,2、中性粒细胞的核象变化:,核左移白血病,第二节 白细胞参数检查,核右移:外周血分5叶核以上的中性粒细胞超过3%称核右移。常伴WBC减少,表示造血功能衰退或造血物质缺乏。见于巨幼红细胞性贫血、恶性贫血、应用抗代谢药物等。在炎症恢复期,可出现一过性右

26、移为正常现象。在病程中,突然出现核右移提示预后不良。,2.中性粒细胞的核象变化:,巨型变和分叶过多,(二)嗜酸性粒细胞(E)见后嗜酸性粒细胞直接计数,第二节 白细胞参数检查,(三)嗜碱性粒细胞 增多:指外周血嗜碱性粒细胞绝对值0.1109/L。辅助诊断超敏反应性疾病,如荨麻疹等;慢性粒细胞白血病与类白血病的鉴别:前者嗜碱性粒细胞增多,后者则正常。慢性粒细胞白血病急性变时嗜碱性粒细胞也增多,此特点与急性白血病不同。减少:一般无临床意义。,第二节 白细胞参数检查,p51,(四)单核细胞:增多,指外周血单核细胞绝对值0.8109/L。见于 血液病,如急性单核细胞性白血病、淋巴瘤、恶性组织细胞病等;感

27、染性疾病,如结核病、感染性心内膜炎、带状疱疹病毒感染、疟疾、黑热病等;急性感染恢复期等。减少一般无临床意义。,第二节 白细胞参数检查,生理变化:整个婴儿期,外周血淋巴细胞较高约占70%,约45岁后淋巴细胞比值逐渐与成人接近。,第二节 白细胞参数检查,(五)淋巴细胞,病理变化:(1)增多:是指外周血淋巴细胞绝对值超过正常:成人4109/L,4岁以上小儿7.2109/L,4岁以下的婴幼儿9109/L。不包括因中性粒细胞减少致淋巴细胞相对性增多。某些传染病:某些慢性感染:结核病恢复期 淋巴细胞白血病、淋巴瘤 肾移植术后发生排斥反应,第二节 白细胞参数检查,(五)淋巴细胞,(2)减少:是指周围血淋巴细胞绝对值低于正常。主要为放射线损伤、免疫缺陷性疾病、应用糖皮质激素后。,第二节 白细胞参数检查,(五)淋巴细胞,

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