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1、血涂片复审规则-应用和问题探讨,血细胞分析的意义,临床实验室工作之所以如此重要，其原因之一是由于所提供的检验信息占患者全部诊断、疗效等医疗信息的60以上，而血细胞分析则是每个患者必须检测的常规组合。,血细胞分析方法的变迁,传统的血细胞分析是采用手工方法 20世纪50年代,Coulter利用电阻抗原理设计制造出第一台血细胞计数仪，使这项常规工作进入自动化。70年代某些血细胞计数仪采用细胞化学染色技术,实现了自动WBC分类计数 现在一般认为，血细胞分析仪能够准确地进行细胞计数和成熟WBC分群,血涂片复审标准的制定,1981年 NCCLS制定H20P我国制定了相应指南,人工血涂片复审率,美国病理学家
2、学会问卷调查计划（263，2005）,研究方法,Berend Houwen在2002年春天邀请了来自6个国家17个实验室的专家举行了一次研讨会。,International Consensus Group for Hematology Review,成员：美国12 澳大利亚2 加拿大2 英国1 瑞士1 西班牙1,Mr.Patrick W.Barnes Barnes Jewish Hospital USAMs.Rhonda Becker Davis Medical Center University of California USAMr.Terry Fawcett Biospecifix Au
3、straliaDr.Bernard J.Fernandes Department of Pathology Lab Medicine Mt.Sinai Hospital CanadaDr.Berend Houwent Beckman Coulter,Inc.Ms.Linda Kemerer Grant/Riverside Methodist Hospitals USA,Dr.Elkin Simson Mt.Sinai Hospital USAMs.Vicky Soppa Mayo Foundation USAMr.Michael R.Suter OML Laboratories USADr.J
4、esus Villarubia Hospital Ramony Cajal Spain Ms.Debbie Wall Dynacare Laboratories Dynacare Northwest,Inc.USAMs.Jeri Walters Sinai Samaritan Medical Center East Campus USA,Ms.Bette A.Jamieson Department of Pathology The Childrens Hospital USAMs.Lynn Johnstone Health Alliance Laboratories USAProfessor
5、Samuel J.Machin Department of Haematology University College Hospital UKMs.Stefanie L.McFadden Laboratory Consultant USADr.Kirk W.Ready Chinook Health Region,Corp.Office CanadaDr.David Rosenfeld Liverpool Hospital AustraliaDr.Ramon Simon Beckman Coulter Eurocenter S.A.Switzerland,CELL-DYN4000,ADIVA1
6、20,SE9000 XE2100,LH750 GenS,仪器,条例,对于血细胞分析的每一个参数进行深入讨论，共同商议提出83条规则，并在15个实验室初步验证。（1000 80：20）,如果某条例被涉及而血涂片复审发现异常即为真阳性，未发现异常即为假阳性；,如果条例未被涉及而血涂片复审发现异常即为假阴性，未发现异常即为真阴性。,镜检阳性的标准,1、红细胞体积异常和/或不均一性、染色异常2+，发现疟原虫；2、大血小板2+3、见到血小板聚集4、Dohle小体2+5、中毒性颗粒2+6、空泡2+,1、原始细胞1%2、晚幼粒 2%。3、中幼/早幼1%4、异常淋巴细胞5%5、有核红细胞1%6、浆细胞 1%,
7、形态异常,数量异常,术语,二、国际规则的产生,样本总数：13298研究时间：2002-2005发表论文：自动化全血细胞计数和白细胞分群分析后行为的建议规则 Barnes PW,McFadden SL,Machin SJ etal.The international consensus group for hematology review:suggested criteria for action following automated CBC and WBC differential analysis.Lab Hematol.2005,11:83.,国际血涂片复审41条规则,15条与CBC参
8、数,7条与LDC参数（包含绝对值）,2条与网织红细胞,10条与WBC报警,7条与仪器报警（包含RBC、PLT）,国际血涂片复审41条规则,规则序号 参数 发生条件14 应对动作13Rule parameter and/or action1,2,3,规则特点,应对特点,2条涉及人工分类（16，26）33条涉及涂片镜检22项按SOP规定,真阳性11.20%假阳性18.60%真阴性67.30%假阴性2.90%，即血涂片复审率为29.80%（复审率=真阳性%+假阳性%），有2.90%的标本漏检。,三、国际规则的意义,血涂片复审41条国际规则发布的同时，在该论文中阐明了规则产生的思路和原理，为各实验室制
9、定血涂片复审规则提供了理论和和实践依据，具有普遍的指导和推广意义。,全国血液学复检专家小组.全国血液学复检专家小组工作会议纪要暨血细胞自动计数复检标准释义.中华检验医学杂志.2007,30(4):380-382,湖北省临床检验中心关于印发湖北省临床实验室血液学复检规则的通知鄂临检发20106号,丛玉隆,王昌富,乐家新.血细胞自动化分析后血涂片复审标准制定的原则与步骤.中华检验医学杂志.2008,31(7):729-731.,1、血涂片复审标准的制定原则,1、仪器识别能力和实验室要求的差异，决定复审规则的不同,3、在保证筛选质量的基础上，尽量使复审率降低。,2、复审范围要涵盖仪器的所有参数以及形
10、态学特征。,4、假阴性,2、血涂片复审标准的制定步骤,假 阳性 24.94%假 阴性 3.84%复审率 37.03%,02.WBC30.0占 5.50%；03.PLT1000占5.70%；16.Ret#首次结果0.10占8.92%；20.任何计数结果伴PLT聚集报警占5.59%；21.除PLT聚集外的PLT和MPV报警占5.09%;22.出现IG阳性报警:5.59%;24.不典型和/或变异L报警:5.34%镜检2.巨大血小板:0.50%镜检3.血小板聚集:1.33%镜检11.嗜碱细胞:1.67%；,(1)某血细胞分析仪血涂片复审规则初次验证,假 阳性 12.68%假 阴性 5.50%复审率 2
11、3.02%,02.WBC30.0:1.42%;03.PLT1000:2.92%22.出现IG阳性报警:5.59%;24.不典型和/或变异L报警:5.34%25.出现Blasts阳性报警:2.09%镜检2.巨大血小板:1.33%;镜检3.血小板聚集:1.50%;镜检11.嗜碱细胞:2.00%;,(1)某血细胞分析仪血涂片复审规则调整后验证,假 阳性 17.75%假 阴性 15.36%复审率 30.97%,未成熟粒细胞示警WBC1%镜检嗜酸细胞：5%单核细胞：8%,(2)某血细胞分析仪血涂片复审规则初次验证,假 阳性 12.81%假 阴性 1.95%复审率 29.35%,未成熟粒细胞示警WBC2%
12、镜检嗜酸细胞：10%单核细胞：12%,(2)某血细胞分析仪血涂片复审规则调整后验证,1.不同仪器有不同规则(1)XE-2100血细胞分析复检标准制定协作组.SysmexXE-2100自动血细胞分析和白细胞分类的复检规则探讨.中华检验医学杂志.2008,31(7):752,四、血涂片复检规则的应用,住院患者随机血细胞随机血细胞分析标本的血涂片复审率46.69%,XE-2100复检协作组成员单位：解放军总医院临床检验科；四川大学华西医院实验医学科；复旦大学附属华山医院检验科；日本Sysmex医用电子（上海）有限公司,(2)王厚芳,孙芾,于贵杰等.国际血细胞复检规则在贝克曼-库尔特系列血细胞分析仪上
13、的应用及改进方案.中华检验医学杂志,2008,31(7):758-762.,门诊随机血细胞分析标本的血涂片复审率分别为29.1%,北京和睦家医院检验科；北京大学人民医院检验科；浙江省温州医学院第一附属医院检验科,(3)使用其它检测系统的复检要求,二分群血液分析仪：100%显微镜WBC分类及血细胞形态检查；,三分群血液分析仪：为1-10条；,五分类血液分析仪：为1-8和11-16条。6-16项为首次复查要求，第二次检查如间隔时间短，结果变化较少，复查可根据情况决定。,(1)不同检测原理仪器和方案的比较研究,2.实验室建立和验证本室规则,(2)血涂片复审原始/幼稚血细胞的临床诊断性试验研究,复审血
14、涂片的百分比,规则参数首要和/或次要和/或第三和/或第四111MCV105fl和成人和24hour行动一行动二行动三复片复片看大的细胞如果没有大细胞如果没有新鲜血，形态改变要新鲜血报告单注明,3.血细胞分析仪的新功能 与国际复审规则一致的界面,五、值得注意的的问题,1.临床结合,临床医生提出阅片必须镜检，白血病患者（不论初诊还是复诊）血细胞分析标本必须镜检。一组4840病例临床研究，平均每天进行大约1000个CBC和LDC，大约14%的标本，即140个标本需要显微镜观察，但其中有130个标本是临床医生事先就提出需要人工分类计数。,2.逻辑错误,血涂片复审固然是自动化血细胞分析后的质量保证措施，
15、但是显微镜检查为定性或半定量分析方法，对于仪器法定量分析的项目是否适合以镜检“验证”，比如以“红细胞明显大小不等”验证“RDW增大”、“低色素红细胞30%”验证“MCHC减低”科学与否？,3.方法局限,各种方法对于血小板减少症的检测结果（xs，109/L）,血小板减少时各种方法与流式细胞术的相关性（r）,选择在血液学实验室工作10年的中级技术人员1人（乙）；在基础检验室工作或在非基础检验及血液学实验室工作10年的中级技术人员各1人（丙或丁）；在本院血液学实验室接受过1年训练或未接受血液学检验训练、工作3年的基础检验室初级技术人员各1人（戊或庚，检验专业学士学位）。,以曾接受省部级医院血液细胞形态学实验室培训6月以上、在血液学实验室工作20年以上的高级技术人员（甲）,谢谢大家！,
