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1、医学微生物学实验三,主要内容:,上次实验结果观察细菌生化反应结果分析细菌的致病作用病原性球菌形态及培养特性,上次实验结果观察,平板划线分离及菌落观察,菌落形态观察:菌落的色泽、大小;表面光滑或粗糙、边缘整齐否;隆起度、透明度等 不同形态菌落代表不同的细菌,斜面移种法及色素观察,观察细菌在斜面上所形成的菌苔。绿脓杆菌产生水溶性色素,使整个培养基变绿。金葡菌产生脂溶性色素,培养基不变色。,细菌生化反应结果分析,H2S产生试验(史氏痢菌、乙型副伤寒),硫酸亚铁半固体,乙型副伤寒,黑色沉淀物,细菌生化反应结果分析,葡萄糖发酵试验 乙型副伤寒(产酸产气)培养基红黄色,有气泡 史氏痢菌(产酸不产气)培养基
2、红黄色,无气泡,细菌生化反应结果分析,吲哚试验(史氏痢菌、乙型副伤寒),蛋白胨水,史氏痢菌,吲哚试剂,玫瑰吲哚,细菌的致病作用,细菌的毒力物质,1、侵袭力 菌体结构 侵袭性物质2、毒 素 内毒素 外毒素,细菌的侵袭力的构成,1、菌体表面结构 荚膜 微荚膜及糖萼 菌毛或非菌毛粘附素2、侵袭性物质 侵袭性蛋白及侵袭性酶类,细菌所产生的毒素,1、外毒素:主要由G+菌产生的能分泌到菌体外的具有毒性的蛋白质。2、内毒素:G-菌细胞壁脂多糖成份,菌体裂解后释放出。,内毒素与外毒素的比较,细菌致病作用的实验内容,肺炎球菌荚膜观察血浆凝固酶实验内毒素发热反应外毒素的毒性作用,试管法 玻片法,肺炎球菌荚膜的观察
3、,荚膜的致病作用,抗吞噬作用粘附作用抗有害物质损伤作用,血浆凝固酶,是致病性葡萄球菌产生的一种侵袭性物质具有抗吞噬作用及血清中杀菌物质对细菌的杀灭作用使感染局灶化。,血浆凝固酶的种类及检测方法,游离血浆凝固酶 试管法检测结合血浆凝固酶 玻片法检测,内毒素的发热试验,试验动物:家兔(正常)菌液:加热杀死的伤寒杆菌培养液结果观察:注射前后体温的变化注意事项:体温计使用,内毒素检测方法鲎试验,试剂:鲎试剂 内毒素、生理盐水 试验结果观察:鲎试验(+):出现凝固,外毒素的毒性作用,实验试剂:破伤风杆菌培养物 破伤风抗毒素 实验动物:小白鼠 试验结果观察:细菌培养物小鼠强直性痉挛,病原性球菌,常见病原性球菌的种类,革兰阳性球菌 葡萄球菌 链球菌 肺炎球菌,革兰阴性球菌 淋球菌 脑膜炎球菌,病原性球菌的生物学特点,细菌检测及鉴定常用方法,镜检(G+球菌)培养(G+球菌)生化反应(G-杆菌)血清学诊断动物实验核酸诊断等快速诊断,病原性球菌实验内容,病原性球菌的形态观察 葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌病原性球菌的培养特性 普通平板菌落形态的观察 血平板上溶血特性的观察,金黄色葡萄球菌血平板,乙型溶血性链球菌血平板,