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1、骨髓检查,Bone Marrow Examination,Where?,血常规检查：RBC 1.81012/L；WBC 2.1109/L；PLT 45109/L,How?,Why?,骨髓检查将带给你答案！,骨髓检查,细胞形态学检查 造血干细胞培养 骨髓细胞学检查 细胞抗原检查 遗传学分析等骨髓检查 骨髓活检,形态学检查,细胞化学染色,概述（Introduction）骨髓:人体的造血组织，位于身体的许多骨骼内,是红细胞，粒细胞和血小板生成的唯一场所，同时也产生淋巴细胞和单核细胞。,血细胞生成与发育,血细胞的分化、发育、成熟具有一定的规律性，我们在辨认细胞时需要掌握下列几个方面：胞体 胞质 量、颜
2、色、内含物 胞核 大小、形状、结构、颜色、核膜、核仁 核质比,胞体：血细胞随着分化发育其体积逐渐变小（除外巨核细胞系；早幼粒大于原粒）,胞质(浆):血细胞随着分化发育其胞质 量 由少到多（淋巴除外）色 由深蓝到浅蓝或灰（红）颗粒 由无到有（除外红细胞系,浆细胞一般 无颗粒，小淋巴细胞可没有 颗粒。）,胞核:血细胞随着分化发育其胞核 体积由大到小（巨核胞核由小到大）形态由圆到不规则（红系核型规则而最终消失；淋巴细胞的核型改变不明显）染色质由疏松细致到紧密粗糙 颜色由染淡紫色到深紫色,核仁:血细胞随着分化发育其胞核内的核仁 从有到无。（除外淋巴系、单核系，一直有）,核质比：由大到小，即核大质少到核
3、小质多（除外巨核系）,一、骨髓细胞形态学检查临床应用1.用于造血系统疾病的诊断、辅助诊断及病情监控、疗效观察如：白血病、再障、巨幼细胞贫血、血小板减少性紫癜的诊断；缺铁性贫血的辅助诊断2.用于某些非造血系统疾病的诊断及辅助诊断如：原虫感染、代谢性疾病、转移性癌肿。,三、适应症、禁忌症，标本采集及送检（一）适应征：原因不明的发热、骨痛、恶病质；原因不明的肝、脾、淋巴结肿大；原因不明的外周血细胞数量、形态异常禁忌征：血友病患者、妊娠中晚期患者,（二）标本采集部位及方法：骨髓穿刺术 常用取材部位：成人：髂前、后上棘（较易掌握分寸）；胸骨（阳性率高，有一定危险性）体位：胸骨及髂前上棘穿刺时取仰卧位；髂
4、后上棘穿刺时取侧卧位。采集标本量:0.2ml以下,如需同时作细菌培养等其它检查，应先抽骨髓液涂片。,三、骨髓检查申请单的填写（详细）,各医院都有其自己设计印刷的骨髓检查申请单，格式大同小异，基本包括以下内容：1.病人基本情况 姓名、性别、年龄、职业、门诊号、住院号、通讯地址或工作单位、就诊或住院的科室、病室。,2.标本采集情况（1）骨髓来源：注明髂前（左、右）、髂后（左、右）、胸骨、脊突；（2）取材是否顺利；（3）其它取材部位，第几次送检，上次标本编 号等。3.临床诊断及送检目的。,4.主要症状及病史；主要体征：包括皮肤、淋巴结、肝、脾，其它。5.主要实验室检查记录，包括血液学方面及 其他与疾
5、病有关的各类检查结果的详细数 据。6.取材时间、送检时间、送检医师签名。,四、骨髓细胞形态学检查程序,染色；低倍镜检查；油镜检查；（细胞化学染色）；计算、结合临床资料总结分析得出诊断意见及建议。,低倍镜检查,1.观察骨髓涂片的取材、涂片及染色情况 取材满意的标准：骨髓小粒、脂肪滴、骨髓特有细胞2.判断骨髓增生程度共分五级；按照有核细胞与成熟红细胞的比,骨髓增生程度分级及临床意义,骨髓增生程度分级(高倍镜）,极度减低15/HP,增生减低520/HP,增生活跃2050/HP,明显活跃50100/HP,极度活跃100/HP,重要概念：,粒红比值：粒细胞的百分率总和与有核红细胞百分率总和之比。（M:E
6、或G:E）正常值：2-4:1,油镜检查：1、有核细胞分类计数并观察有无形态异常2、粒/红比值计算,正常骨髓象,0.取材满意、骨髓小粒丰富，图片及染色良好。增生活跃1.粒系增生活跃，占有核细胞的4060，各阶段细胞比例适当，其中原始粒细胞2%，早幼粒细胞5%，中、晚幼粒细胞约15%，杆状核粒细胞多于分叶核粒细胞。嗜酸性粒细胞5%，嗜碱性粒细胞1%。各阶段细胞形态无明显异常。,骨髓取材满意的指标*1.抽吸骨髓时病人有特殊的酸痛感。图2.骨髓液可见骨髓小粒和脂肪滴。图3.镜下可见骨髓特有细胞如:巨核细胞、浆细胞、成骨细胞等。4.中性杆状核/分叶核高于外周血中此比值。,（二）骨髓穿刺方法,干抽(dry
7、 tap)*指非技术原因，多部位、多次均抽不出骨髓液而言。常见于：骨髓纤维化；骨髓异常增生致骨髓填塞的白血病、真红等。,2.红系增生活跃，占有核细胞的20左右，各阶段细胞比例适当，其中原红胞：2%，早幼红细胞5，中、晚幼红细胞各约为10，细胞形态无明异常。成熟红细胸大小、形态及染色大致正常。粒/红约2-4:1。3.淋巴细胞占有核细胞20(小儿可达40)，单核细胞及浆细胞各4，大多为成熟阶段细胞，且细胞形态无异常。,正常骨髓象（低倍镜）,常用的化学染色,概 念,细胞化学染色是以细胞形态学为基础，结合运用化学反应的原理对血细胞内的各种化学物质（糖类、蛋白质、脂类、酶类、铁、核酸等）作定性、定位、半
8、定量分析的方法。,铁染色,细胞外铁：骨髓小粒中贮存在单核吞噬细胞系统内的铁（幼稚红细胞之外的铁）细胞内铁:幼稚红细胞以内的铁，细胞核周围正常值：细胞外铁：1+-2+铁粒幼红细胞：12%-44%,铁染色（iron staining）,用于小细胞低色素性贫血的鉴别诊断缺铁性贫血：内、外铁均减少铁粒幼细胞贫血：内、外铁均增多MA、HA、AA：正常或轻度增多,用途：鉴别急性淋巴系与非淋巴系白血病结果：粒系(+)；单核系()；淋巴系(),过氧化物酶染色(peroxidase，POX),中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP),鉴别：慢粒NAP，类白血病反应NAP 化脓感染NAP，病毒感染NAP,CML,类白,非特异酯酶染色(-NAE)：,用途：鉴别急粒与急单结果：粒系（-）或 弱（+）不被NaF抑制 单核、巨噬(+)，可被NaF抑制,糖原染色（过碘酸雪夫反应，PAS)：,粒系中原粒cell(-)，早幼粒cell强阳性，单核（），淋巴（-），少数（），红细胞（-）；巨核呈阳性反应。,PAS临床意义,AML-M6幼红细胞呈阳性反应,MA幼红细胞呈阴性反应,POX,NAP,铁染色,PAS,谢谢大家,HAVE A GOOD DAY!,
