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1、微生物的分类,微生物：包括细菌、支原体、衣原体、螺旋体、放线菌、立克次体、病毒及真菌。微生物的生物学性状包括：形态结构、染色特性、生长繁殖与培养、理化性状、分类等。,细 菌,细菌 广义所有原核细胞型微生物（细菌、支原体衣原体、立克次体、螺旋体、放线菌）共性：有细胞壁、原始核质、二分裂、对抗生素敏感 狭义专指其中的细菌,细菌的大小与形态,观察细菌常用光学显微镜，其大小用测微尺在显微镜下进行测量，以微米(m)为单位。不同种类的细菌大小不一，同一种细菌也因菌龄和环境因素的影响而有差异。细菌按其外形，主要有,球菌杆菌螺形菌,球状、杆状和螺旋状,双球菌 分裂后两个球菌成对排列的为双球菌.如肺炎双球菌,（
2、1）双球菌,一、球 菌,脑膜炎奈瑟菌,双球菌,双球菌,(2)链球菌 分裂是沿一个平面进行，分裂后细胞排列成链状.如乳链球菌,链球菌,链球菌,链球菌,(3)葡萄球菌 分裂面不规则，多个球菌聚在一起，像一串串葡萄。如金黄色葡萄球菌,葡萄球菌,葡萄球菌,葡萄球菌,(4)四联球菌 分裂是沿两个相垂直的平面进行，分裂，分裂后每四个细胞在一起呈田字形.如四联微球菌,四联球菌,四联球菌,四联球菌,(5)八叠球菌 按三个互相垂直的平面进行分裂后，每八个球菌在一起成立方体形.如藤黄八叠球菌,八叠球菌,八叠球菌,二、杆菌,不同杆菌的大小、长短、粗细很不一致。,杆菌的形态多样,梭状芽孢杆菌,杆菌的形态多样,分枝杆菌
3、,双歧杆菌,球杆菌,链杆菌,棒状杆菌,分枝杆菌,三、螺形菌,弧 菌,螺 菌,革兰氏染色法由Gram发明，沿用至今已有100多年历史。是临床细菌学中最简单、最重要的方法之一。染色后把细菌分成革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。,细菌的革兰氏染色,1.鉴别细菌2.选择药物参考 G+菌的敏感药物：青霉素 G-菌的敏感药物：链霉素、氯霉素3.与致病性有关 G+菌的致病物质：产生外毒素 G-菌的致病物质：产生内毒素,革兰染色的意义,1.涂片（layering a film）2.干燥（air-dry）3.固定（heat-fixing）4.初染（first stain）5.媒染（stain with iodine）
4、6.脱色（decolorize）7.复染（counter-stain）,方法,涂片,第一步 涂片,临床标本和液体培养物：直接涂片固体培养基上的细菌和不易涂开的标本：取一滴生理盐水置玻片中央，取菌在盐水中磨匀，成1cm2的涂面。,技巧：涂片时从中心向外研磨，用力要均匀，厚度以把涂片放到纸上，透过涂片刚好看到下面纸上的字为宜。,第二步 干燥,涂片最好在室温下自然干燥或将标本面向上，置于火焰上部的热气烘干，切不可在火焰上烤干,第三步 固定,将已干燥的涂片通过火焰3次，以玻片触及手背皮肤热而不烫为度。,目的：1.杀死细菌2.使细菌附着于玻片上3.维持细菌原有形态4.改变细菌对染料的通透性,第四步 初染
5、,滴结晶紫染液于玻片上，使细菌涂层被全部覆盖，1分钟后，细流水冲洗，甩干。,注意：染液必须用水冲洗，而不能直接倒去，以防染液沉渣留在玻片上。,第五步 媒染,滴加碘液于玻片上，1分钟后，流水冲洗，甩干。,在这一步中，碘液作为媒染剂，它的主要作用是促进染料与细菌的结合，也就是初染时结晶紫与细菌的结合，所以媒染剂又叫助染剂。,第六步 脱色,滴加95%酒精数滴于玻片上，轻轻摇动，不断补充酒精，脱色至流下来的液体无紫色为止，约半分钟，流水冲洗，甩干。,这一步在操作中最为关键，脱色时间应以标本涂片厚薄灵活掌握，一般以流下的酒精无紫色为宜。,第七步 复染,加稀释石碳酸复红数滴，一分钟后流水冲洗，用滤纸吸干玻片表面的水。,染色片制备好后，在油镜下观察结果,正常情况下，细胞的成分与大多数背景染成粉红色，革兰氏阳性菌染成蓝紫色，革兰氏阴性菌染成红色。,结果,革兰氏阴性菌,革兰氏阳性菌,革兰氏阳性菌,革兰氏阴性菌,革兰阳性菌,革兰阴性菌,看完了！休息，休息吧！,
