《《其它毒性》PPT课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《《其它毒性》PPT课件.ppt（41页珍藏版）》请在三一办公上搜索。
1、其它毒性试验,皮肤给药毒性试验 皮肤给药的急性毒性试验 皮肤给药的长期毒性试验 皮肤刺激试验 皮肤过敏试验 光敏试验,其它毒性试验,腔道用药毒性试验眼刺激试验 滴鼻剂和吸入剂急性毒性试验 滴鼻剂和吸入剂刺激试验 直肠、阴道用药急性毒性试验 直肠、阴道用药刺激试验,其它毒性试验,药物依赖性试验 身体依赖性试验 自然戒断试验 替代试验 催促试验 诱导试验 精神依赖性试验,皮肤给药急性毒性试验,目的:观察短期接触受试物后皮肤的毒性反应动物:家兔、豚鼠或大鼠，各半，家兔体重kg,豚鼠300g,大鼠200g左右,给药前24h将动物背部脊柱两侧毛脱掉,去毛范围约相当于体表面积的10%左右,(家兔约150c
2、m2左右,豚鼠、大鼠约40cm2左右）药物：膏剂、液体或粉末。粉末需用赋形剂（如羊毛脂、凡士林等）混匀，以保证受试物与皮肤有良好的接触,皮肤给药急性毒性试验,剂量：3个，组距0.650.85。家兔每组只，豚鼠或大鼠每组10只并设赋形剂或空白对照组方法：将受试物均匀涂敷于脱毛区，破损皮肤则在脱毛区划破皮肤后再涂敷受试物。24h后去除，每日观察，连续7-14天。观察动物体重、皮肤、毛发、眼睛和粘膜的变化，呼吸、循环、中枢神经系统、四肢活动等变化。若有死亡则进行尸检，当有肉眼可见病变，则需进行病检判断：试验结果与对照组比较判断,皮肤给药的长期毒性试验,目的：观察经皮渗透产生的异常反应和可逆程度，找到
3、靶器官动物：家兔(2kg,6只/组)，豚鼠(300g，10只/组)或大鼠(200g，10只/组)，各半。给药前24h动物背部脊柱两侧脱毛，面积同急毒受试物：同急性毒性试验剂量：个，要求同大鼠口服长毒试验，并设赋形剂或空白对照组，若用受试物剂量超过有效浓度20倍以上，仍未见动物有不良反应或死亡时，则只须设一个高剂量组,皮肤给药的长期毒性试验,方法：受试物均匀涂敷,每次至少接触h，临床用药疗程的倍以上时间连续给药。部分动物应于停药后继续观察-周，检测指标：除每日观察皮肤、临床变化及皮肤病理学检查外，其血液学、血液生化指标和病理学检查项目同大鼠长期毒性试验要求判断：实验结果应写明安全剂量、中毒剂量、
4、中毒表现、中毒靶器官及中毒的可逆程度等,皮肤刺激试验,目的：观察刺激反应情况动物：首选家兔(2kg左右)，其次为豚鼠(300g左右)。药前24h脱毛，家兔每侧脱约50cm2，豚鼠每侧脱约20cm2受试物：同急性毒性试验方法：只家兔或只豚鼠，在受试物区、对照区和破损皮肤区（脱毛后），一次或多次将受试物ml或1 g涂于受试物区，赋形剂则涂于对照区。24h后去除。观察1、24、48和72h涂抹部位有无红斑和水肿等，变化的恢复情况和时间,皮肤刺激试验,多次给药则每日涂抹一次，连续一周，其余均与一次给受试物的方法和要求一致结果评价：每只动物试验结果进行刺激反应评分，计算出平均分值进行刺激强度评价,皮肤刺
5、激反应评分 刺激反应 分值红斑:无红斑 0 勉强可见 1 中度红斑 2 严重红斑 3 紫红色红斑并有焦痂形成 4水肿:无水肿 0 勉强可见 1 皮肤隆起轮廓清楚 2 水肿隆起约1mm并范围扩大 4,皮肤刺激强度评价 强度 分值 无刺激性 6.0,皮肤过敏试验,目的:观察免疫系统反应在皮肤上的表现动物：豚鼠各半(250-300g)。给药前24h背部两侧脱毛，脱毛区每侧约3 x 3 cm2受试物：若受试物是膏剂或液体，直接试验。若为固体粉末，则用水或赋形剂（如羊毛脂、凡士林、橄榄油等）混匀阳性致敏物：2,4-二硝基氯代苯配成1%的致敏浓度和0.1%的激发浓度,皮肤过敏试验,方法：分受试物组，空白对
6、照组，阳性对照组，每组10只（各半）ml()涂在左侧脱毛区，持续6h。第天和第14天，同法各重复一次ml()涂于右侧脱毛区，阳性对照用0.1%2,4二硝基氯代苯，h后去除，即刻观察，然后于24、48、72h再次观察过敏反应情况结果评价：结果按皮肤反应评分标准评分，根据试验组与对照组豚鼠皮肤反应的差别，判断受试物对皮肤过敏反应性质可用致敏率(红斑或水肿的动物例数/受试动物总数)判断致敏强度,皮肤过敏反应评分标准 皮肤反应 分值 红斑形成：无红斑 轻度红斑 中度红斑 重度红斑 水肿性红斑 水肿形成：无水肿 轻度水肿 中度水肿 重度水肿,致敏率分类 致敏率（%）反应强度 10 弱致敏性 2030 轻
7、度致敏性 4060 中度致敏性 7080 高度致敏性 90100 极度致敏性,光敏试验,有些受试物皮肤涂抹后遇光照可引起光敏反应若其化学结构或某些组成（包括药物和赋形剂）文献报导有光敏作用者应作光敏试验其化学结构和已知光敏剂相似者也应做光敏试验,皮肤给药毒性试验有关问题,设立赋形剂对照组，赋形剂各种指标、规格等均应符合药用规格受损皮肤的用药，急毒、长毒等毒性试验也宜以模拟破损皮肤进行高剂量符合制剂工艺要求，以剂型允许配制浓度和允许给药容量给药。不能将外用药厚厚地涂在皮肤上,眼刺激试验,目的：观察眼睛接触受试物后产生的刺激反应 动物：家兔只，体重23kg 受试物：液体或膏剂均可直接滴入或涂敷剂量
8、：用原液或原膏剂，不必稀释，每只眼睛滴入0.1ml或涂敷0.1g以内方法：滴入或涂敷于动物一侧眼结膜囊内，另一侧作为空白（或赋形剂）对照。给药后使眼睛被动闭合510分。记录给药后6、24、48、72h至7天眼的局部反应情况,眼刺激试验,临床用药超过一周的受试物要进行多次给药刺激试验，连续给药一周以上结果评价：将每只动物的眼角膜、虹膜和结膜的刺激反应的分值相加，即是一只受试动物眼刺激反应的总积分。把每个受试动物的刺激反应积分的总和除以动物数，就是该受试物对眼刺激性的最后分值，以此判定受试物刺激程度,眼刺激试验-角膜评分,无混浊 散在或弥漫性混浊，虹膜清晰可见 1 半透明区易分辨，虹膜模糊不清 2
9、 出现灰白色半透明区，虹膜细节不清，瞳孔大小勉强看清 3 角膜不透明，由于混浊，虹膜无法辨认 4,眼刺激试验-虹膜评分,正常 皱褶明显加深，充血，肿胀，角膜周围轻度充血，瞳孔 对光仍有反应 出血，肉眼可见坏死，对光无 反应（或出现其中一种反应）,眼刺激试验-结膜评分,.充血（指睑结膜、球结膜部位）血管正常 血管充血呈鲜红色 血管充血呈深红色，血管不易分辨 弥漫性充血呈紫红色.水肿 无水肿 轻微水肿（包括瞬膜）明显水肿，伴有部分眼睑外翻 水肿至眼睑近半闭合 水肿至眼睑超半闭合.分泌物 无分泌物 少量分泌物 分泌物使眼睑和睫毛潮湿或粘着 分泌物使整个眼区潮湿或粘着,眼刺激性评价标准 刺激程度 积
10、分无刺激性 轻度刺激性 中度刺激性 强度刺激性,滴鼻剂和吸入剂急性毒性试验,目的：观察一次滴入或吸入后所产生的毒性反应和死亡情况动物：大鼠、豚鼠或家兔。各半，大鼠、豚鼠体重在250-300g、家兔在2.5kg左右爱试物：液体或粉末剂剂量：个剂量，组距0.65-0.85为宜。设赋形剂或空白对照组。若大剂量组（超过临床预计用量的50倍以上）未出现死亡情况时，则只须设一个高剂量组,滴鼻剂和吸入剂急性毒性试验,方法：大鼠或豚鼠每组10只，家兔每组只，各半。滴入或吸入药后，至少接触小时，给药后即刻观察及7-14天观察动物全身状况、体重、呼吸、循环、中枢神经系统、四肢活动等变化，若出现死亡则病检结果判断：
11、试验结果与对照组比较。如能测出LD50值则按急性毒性试验要求计算,滴鼻剂和吸入剂刺激试验,目的：观察滴入或吸入后产生的刺激反应动物：同上述急性毒性试验受试物：液体或粉末剂分组：给药组、赋形剂组及空白对照组，每组家兔只，或大鼠或豚鼠只方法：将药滴入或喷雾于动物。和粘膜接触至少h。于24h处死动物，观察有无充血、红肿等现象。若有变化则需进行病检多次给药则每天滴入或吸入一次,连续天，于末次给药24h后处死动物结果判断：试验结果与对照组比较进行判断,直肠、阴道用药急毒试验,目的：观察直肠或阴道一次接触受试物后，由吸敷所产生的毒性反应和死亡情况受试物：栓剂、液体或膏剂。剂量：个，组距0.65-0.85，
12、须设赋形剂或空白对照组方法：家兔每组只，大鼠每组10只。将受试物置入h。即刻观察7-14天，观察全身状况，体重、呼吸、循环、中枢神经系统、四肢活动等变化。若出现死亡时应做病检结果判断：与对照组比较判断。必要时算LD50,直肠、阴道用药刺激试验,目的：观察直肠、阴道的刺激反应动物：同上述急性毒性试验受试物：栓剂、液体或膏剂 分组：给药组、赋形剂组和空白对照组。每组家兔只，大鼠只方法：受试物置入h，24h后处死动物。取出局部直肠或阴道组织。观察有无充血、红肿等现象，若有变化需进行病检,直肠、阴道用药刺激试验,多次给受试物则一般每日一次，连续天，于末次给药后24h处死动物并观察结果判断：试验结果与对
13、照组比较判断腔道用药毒性试验要特别注意既要符合剂型要求，又要考虑腔道可给容量,身体依赖性试验-自然戒断试验,连续给药后突然停药，观察戒断症状，与同类的代表药作对比，判断受试药的依赖性潜力动物：小、大鼠和猴。小鼠体重20-24g，每组20只，大鼠体重180-220g，每组10只,猴体重3-5kg，每组35只，各半剂量：23，须设赋形剂对照和阳性药对照(吗啡，苯巴比妥或巴比妥)。低剂量用ACD；高剂量组依赖性潜力低的药物应选用接近毒性反应的剂量，毒性低的药物选用MTD。药物可采用恒量或剂量递增的方式给予,身体依赖性试验-自然戒断试验,给药途径：12种给药途径，必须有一种与临床用药途径相同给药期限：
14、镇痛药在小、大鼠需给药30天，猴需给药90天；镇静催眠药在小、大鼠需给药6090天，猴需给药180天。每天上下午各一次,身体依赖性试验-自然戒断试验,观察指标：镇痛药在停药前24h及停药后48h内每隔4h观察记录外观体征和行为活动、植物神经系统机能变化，并称重。镇静催眠药在停药前一天及停药后的1至2周内每天观察动物的外观体征和行为活动及自发惊厥发生率外观体征和行为活动包括：应激性、神情过敏(猴)、饮食、睡眠、自发运动活动、攻击性、警觉程度、神经反射、竖尾、震颤、惊厥、呼吸、体温、体重植物神经系统机能变化：腹泻、流涎、流泪、恶心、呕吐、瞳孔大小,身体依赖性试验-自然戒断试验,资料记录及整理：动物
15、应写明种属、性别、生产合格证号、记录体重、实验室温度及湿度受试物应写明生产批号、配制方法戒断症状用记分法统计，对检测指标和体重、惊厥发生率等应设计合理的图表显示。实验结果进行统计处理,身体依赖性试验-替代试验,给予动物代表药(如吗啡、巴比妥或苯巴比妥)产生身体依赖性后，停止给药，替之以受试药，观察记录动物是否发生戒断症状及发作程度动物：参照“自然戒断试验”剂量：参照“自然戒断试验”给药途径：腹腔注射、灌胃或“药掺食”(drug admixed food,DAF)法给予代表药使产生身体依赖性，然后停止给代表药，以同样给药方式给予不同剂量的受试药,观察及记录替代期间动物的戒断行为和体重变化,身体依
16、赖性试验-替代试验,镇痛药的观察期为停止吗啡前24h和停药后48h内，每4h观察一次；镇静催眠药的观察为停止代表药前一天和停药后的12周内，每天观察一次采用12种给药途径，必须有一种与临床用药途径相同观察指标：参照“自然戒断试验”资料记录与整理：参照“自然戒断试验”,身体依赖性试验-催促试验,短时期内给予动物大剂量受试药，然后注射受体对抗剂，观察和记录是否出现戒断症状及其程度。此法只适用于有竟争性受体对抗剂的阿片类药物动物：参照“自然戒断试验”剂量：除低剂量组一般采用临床剂量的1至2倍外，余同“自然戒断试验”给药途径：猴的实验应采用与临床给药途径相同；大、小鼠的实验选用二种给药途径，其中必须有
17、一种与临床用药途径相同,身体依赖性试验-催促试验,给药期限：猴连续给药3060天，上、下午各一次，大、小鼠连续给药35天停药后给予阿片受体对抗剂，常用钠洛酮，亦可用环丙羟丙吗啡。观察给受体对抗剂后12h内动物出现的戒断症状及体重变化观察指标：参照“自然戒断试验”。小鼠适应观察记录跳跃次数资料记录及整理：参照“自然戒断试验”,身体依赖性试验-诱导试验,应用各种诱发惊厥的方法如听源性发作和戊四唑惊厥，对镇静催眠药产生身体依赖性的动物，在断药期间阈下刺激强度就可出现反跳性兴奋，诱发惊厥动物：大、小鼠。应预先挑选对各种阈下刺激无惊厥反应鼠剂量：参照“自然戒断试验”，阳性代表药为苯巴比妥或巴比妥,身体依
18、赖性试验-诱导试验,给药途径：二种，有一种同临床途径给药期限：30天，每天二次，上、下午各一次观察指标：听源性发作实验在停药后的一周内每天记录发作率和体重；戊四唑实验在停药24h后记录一次发作率和体重资料记录及整理：参照“自然戒断试验”,精神依赖性试验,采用”自身给药“测定iv药物对动物的强化效应动物：200250g的健康大鼠，各半剂量：12个剂量组，加上一个阳性药对照组(阿片类-盐酸吗啡，镇静催眠-苯巴比妥钠或戊巴比妥钠)，每组10只动物。方法：戊巴比妥钠麻醉下行颈外静脉插管术，将插管一端固定于血管内，另一端与恒速泵及药液输入系统相连。术后第二天开始对大鼠进行自身给药训练，直至动物建立自身给药(踏板)行为,精神依赖性试验,观察指标：包括形成自身给药行为的潜伏期、每个实验期内大鼠的自身给药次数、行为变化、自身给药行为随药物浓度变动的变化程度、消退反应、与其它药物的相互替代等资料记录及整理：参照“自然戒断试验”,
