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1、实验二 刺激强度、频率对骨骼肌收缩的影响,1.实验目的：学习坐骨神经腓肠肌标本的制作，手术器械和刺激、记录仪器的使用。观察肌肉收缩的形式及频率与肌肉收缩反应之间的关系：1通过记录腓肠肌的收缩曲线，明确阈下刺激、阈刺激、阈上刺激以及最大刺激的概念。2通过记录腓肠肌的收缩曲线，观察不同刺激强度对骨骼肌收缩力的的影响。3通过记录腓肠肌的收缩曲线，观察不同刺激频率对骨骼肌收缩力的的影响，从而了解强直收缩的成因。4说明兴奋通过肌接头处的化学传递过程。,肌肉、神经和腺体组织称为可兴奋组织，它们有较大的兴奋性。不同组织、细胞的兴奋表现各不相同，神经组织的兴奋表现为动作电位，肌肉组织的兴奋主要表现为收缩活动。
2、因此，观察肌肉是否收缩可以判断它是否产生了兴奋。一个刺激是否能使组织发生兴奋，不仅与刺激形式有关，还与刺激时间、刺激强度、强度-时间变化率三要素有关，用方形电脉冲刺激组织，则组织兴奋只与刺激强度、刺激时间有关。用方形电脉冲刺激组织，在一定的刺激时间(波宽)下，刚能引起组织发生兴奋的刺激称为阈刺激，所达到的刺激强度称为阈强度，能引起组织发生最大兴奋的最小刺激，称为最大刺激，相应的刺激强度叫最大刺激强度；界于阈刺激和最大刺激间的刺激称阈上刺激，相应的刺激强度称阈上刺激强度。,刺激神经使神经细胞产生兴奋，兴奋沿神经纤维传导，通过神经肌接头的化学传递，使肌肉终板膜上产生终板电位，终板电位可引起肌肉产生
3、兴奋(即动作电位)，传遍整个肌纤维，再通过兴奋-收缩耦联使肌纤维中粗、细肌丝产生相对滑动，宏观上表现为肌肉收缩。肌肉收缩的形式，不仅与刺激本身有关，而旦还与刺激频率有关。当刺激频率较小，使刺激间隔大于一次肌肉收缩舒张的持续时间，则肌肉收缩表现为一连串的单收缩；增大刺激频率，使刺激间隔大于一次肌肉收缩的收缩时间、小于一次肌肉收缩舒张的持续时间，则肌肉产生不完全强直收缩；继续增加刺激频率，使刺激间隔小于一次肌肉收缩的收缩时间，则肌肉产生完全强直收缩。,3.实验动物蟾蜍或蛙4.实验器材肌槽、万能支台、蛙板、蛙类手术器械、肌肉张力换能器、RM6240多道生理信号采集处理系统。5.实验药品任氏液,6.实
4、验内容制作坐骨神经腓肠肌标本，观察该肌肉标本收缩的基本形式及刺激频率的变化对肌肉收缩反映的影响。1、破坏脑和脊髓 2.剥皮、剪除躯干上部及内脏 3.分离两腿 4.制作坐骨神经腓肠肌标本,（1）分离坐骨神经 取一条腿（腹面朝上），用玻璃分针沿脊柱旁游离坐骨神经并扎线固定脊柱端的坐骨神经、再循坐骨神经沟（股二头肌和半膜肌之间的裂逢处），找出坐骨神经的大腿段，用玻璃分针仔细剥离，剪断坐骨神经的所有分支，并将神经分离直至膝关节处。（2）分离腓肠肌 用玻璃分针或镊子将腓肠肌跟腱分离，并穿线结扎。在结扎远端用粗剪刀剪断跟腱，左手执线提起腓肠肌，以手术剪刀剪去其周围联系的组织，但保留腓肠肌起始点与骨的联系，
5、唯须注意勿损伤支配该肌的神经分支。（3）游离坐骨神经腓肠肌标本 将该后肢股部所有肌肉从膝关节起沿股骨剥离并剪去，并将股骨整个保留下来，然后用粗剪刀剪下一小段与神经相连的脊柱（约12个脊椎骨）在膝关节下将小腿剪掉，留下的即为坐骨神经腓肠肌标本。其各部连接关系如下：脊柱小块坐骨神经膝关节腓肠肌跟腱线（连接张力换能器）,将股骨段横放固定于肌肉槽内的侧孔。,（4）将腓肠肌跟腱的扎线固定在张力换能器悬臂梁上，不宜太紧，而且打结不能与张力片太近，此连线应与桌面垂直（5）把穿好线的坐骨神经轻轻提起，放在刺激电极上，应保证神经与刺激电极接触良好。,1、分离神经与腓肠肌应使用玻璃分针，不用金属器械和手接触，以免
6、影响兴奋性。2.实验中须经常用任氏液湿润标本。3.丝线对腓肠肌牵拉勿松亦勿过紧，保持自然拉长状态。4肌槽两根电极之间不能留存液体，以防短路。5每次电刺激后须让肌肉有相同的短暂休息(30s至lmin)，以免标本疲劳。,实验观察：（1）不同刺激强度对腓肠肌收缩的影响 打开计算机，点击RM6240多道生理仪菜单“实验 肌肉神经刺激强度与反应的关系常用实验”，系统自动设置好实验参数，弹出刺激器对话框，并处于示波状态。（2）退出刺激器对话框，在示波状态下调整走纸速度、灵敏度及采样频率为200ms/div、1.5g、500HZ。再调节张力换能器的零点（3）点开始记录，再点刺激器进行设置：选用强度自动递增，
7、调初始刺激强度为0.1V，选打标。设置好后点开始刺激，刺激器即自动按幅度递增的方式自动产生刺激。找现阈强度和最大刺激。最大刺激出现后点停止记录，再点刺激器对话框中的“停止刺激”键，退出实验，整个实验的波形就被记录下来，此时系统即处于分析状态，即可利用分析工具对波形进行剪切和处理，剪切完后把波形保存下来。再退出系统做下一个实验。,（2）不同刺激频率对腓肠肌收缩的影响 打开计算机，点击RM6240多道生理仪菜单“实验 肌肉神经刺激频率与反应的关系常用实验”，系统自动设置好实验参数，弹出刺激器对话框，并处于示波状态。（2）退出刺激器对话框，在示波状态下调整走纸速度、灵敏度及采样频率为200ms/div、1.5g、500HZ。再调节张力换能器的零点（3）点开始记录，再点刺激器进行设置：选用频率自动递增，调刺激强度为实验一的阈上刺激，选打标。设置好后点“开始刺激”，刺激器即自动按频率递增的方式自动产生刺激。在屏幕上可观察到从单收缩、不完全强直收缩和完全强直收缩，出现完全强直收缩后即停止记录，再点刺激器对话框中的“停止刺激”键，退出实验，整个实验的波形就被记录下来，此时系统即处于分析状态，即可利用分析工具对波形进行剪切和处理，剪切完后把波形保存下来。再退出系统,
