《药物杂质检查》PPT课件.ppt

《《药物杂质检查》PPT课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《《药物杂质检查》PPT课件.ppt（139页珍藏版）》请在三一办公上搜索。

1、第三二章 药物的杂质检查,一、药物的纯度,指药物纯净程度，反映了药物质量的优劣，含有杂质是影响药物纯度的主要因素。,第一节 概述,为什么要控制？,不同的效价不同的生物利用度副作用毒性,龙胆泻肝丸事件 中药关木通 马兜铃酸 肾功能衰竭,鱼腥草事件中药静脉注射剂残害中国人民达三十年之久,鱼腥草静脉注射剂含有的48种化学成分造成杂质过多，引起肾功能障碍。,二、药物中杂质的来源,二、药物中杂质的来源,1.生产过程中引入,2.贮藏过程中产生,水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、聚合、潮解和发霉等,易发生水解反应的结构：,酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等,易发生氧化反应的结构：,醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基

2、、双键等,三、杂质的分类,（一）药物中的杂质按结构分为：无机杂质、有机杂质,（二）药物中的杂质按性质分为：信号杂质、有毒杂质,（三）药物中的杂质按来源分为,1.一般杂质（general impurities）如氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、酸、碱、水分、易炭化物、炽灼残渣等。一般杂质的检查方法收载在中国药典的附录中。,2.特殊杂质（special impurities）：指某一个或某一类药物的生产或贮藏过程中引入的杂质。如：阿司匹林中的游离水杨酸 甾体激素中的有关物质。,为什么收载在各药品质量标准中？,特殊杂质检查方法收载在中国药典正文各药品的质量标准中。,四、药物纯度与化学试剂纯度的区

3、别,药物的纯度考虑杂质的生理作用，药物必须进行临床试验。药品只有两个等级：合格或不合格。,化学试剂有很多等级，如基准试剂、优级纯（GR）、分析纯（AR）、化学纯（CP）、色谱纯、光谱纯。,三、杂质限量,指药物中允许杂质存在的最大量，通常用百分之几或百万分之几来表示,杂质量 杂质限量杂质量,药品合格,药品不合格,二、药物的杂质检查法,1.对照法 限量检查法（Limit Test）,供试品,供试品溶液,对照品,对照品溶液,样品管 对照品管 合格,特点：不需知道杂质的准确含量,特点：不需知道杂质的准确含量，但可判断杂质是否超标,2.灵敏度法,系指在供试品溶液中加入试剂，在一定反应条件下，不得有正反应

4、出现。特点：不需对照物质,3.比较法,含量测定法：测定杂质的绝对含量，如测定吸光度、pH值等。特点：准确测定杂质的量，不需对照品,三、杂质限量的计算,97：71检查某药物中的砷盐，取标准砷溶液2ml（每1ml相当于1g的As）制备标准砷斑，砷盐限量为0.0001，应取供试品的量为 A.0.20g B.2.0g C0.020g D.1.0g E.0.10g,第三节 一般杂质检查,一、一般杂质检查规则,药品检验操作标准规定：,（1）仪器的配对性 如纳氏比色管应配对（2）对照品与供试品同步操作,1.遵循平行操作原则,2.正确的比色、比浊方法,3.检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复

5、查二份,二、氯化物检查法,为什么检查氯化物？,（一）原理 对照法,（二）检查方法 药典附录,反应需在硝酸酸性条件下进行。,（三）测定条件,（3）避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的形成。,（2）产生较好的乳浊；,（1）加速AgCl浑浊的形成；,（4）供试液和对照液稀释后，再加硝酸银溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀,5.避光、暗处放置5分钟后比浊，因氯化银见光易分解。,6.比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。,二、硫酸盐检查法,（一）原理 对照法,（二）测定条件,1.标准K2SO4溶液0.1mg/ml，50ml溶液中含0.10.5mg所显浑浊梯度明显，相当于标准K2SO4溶液15

6、ml。,2.反应需在盐酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀盐酸2ml为宜。为什么？,3.试剂：氯化钡 BaCL2,4.供试液和对照液稀释后，再加氯化钡溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀。,5.比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。,三、铁盐检查法,1.原理 对照法,（一）硫氰酸盐法 Ch.P（2005）、USP（29）,测定条件,（1）配制标准铁贮备液 FeNH4(SO4)212H2O（硫酸铁铵）,（2）反应需在盐酸酸性条件下进行。为什么？,（3）铁盐检查时，加过硫酸铵可氧化Fe2+为Fe3+。,（4）比色方法：同置于白色背景上，自上向下观察。,4.干扰及排除,（1）为了提高灵敏度

7、或供试管与对照管色调不一致时，可用正丁醇提取后，分取正丁醇层比色。,（2）具环状结构的有机药物，需经700800炽灼破坏处理后再依法检查。为什么？,五、重金属,什么是重金属？重金属指相对原子量较大的金属元素，如 汞、铅、镉等，但不是我们传统意义上的金属。人类至今在地球上总共发现了110种化学元素，仅金属就占了80多种。其中重金属是指在实验室条件下能与S2-作用显色的金属杂质，如铅、镉、汞等。砷虽不属于重金属，但因其来源以及危害都与重金属相似，故通常列入重金属类进行研究、讨论。,重金属的危害,痛不欲生的“骨痛病”镉中毒 骨质破坏“骨痛病”,餐厅免费“垃圾茶”重金属超标危害人体肝肾 中国质量万里行

8、促进会说，“垃圾茶”不仅农药残留和重金属含量都超出了标准。食用过量的铅会引发血液中毒，肝肾等脏器中毒，使这些器官的功能下降，还会造成神经系统损伤等。,铅盐检查法,（一）第一法 硫代乙酰胺法,1.原理 对照法,适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物。,2.测定条件,（1）本法用2ml pH3.5的醋酸盐缓冲液控制溶液pH值为33.5。为什么？,（1）供试品如有色，需经处理后方可检查。,外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液。,2.干扰及排除,（2）Fe3+干扰的排除,（3）若药物本身能生成不溶性硫化物时，可加入掩蔽剂消除干扰。如ZnSO4中重金属的检查，要在碱性下加KCN掩蔽Zn2+后，

9、再检查,（二）第二法 炽灼残渣法,适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸、乙醇及碱的有机药物。,500600炽灼后的残渣，经处理后，依一法检查。,1.原理 对照法,六、砷盐检查法,新华社电 1821年，法国皇帝拿破仑波拿巴在他的流放之所大西洋上偏远的圣赫勒拿岛去世。此后这些年来，人们一直对这位52岁枭雄的死因争论不休。一种说法认为,砷的毒害,砷为 银 灰 色金属样工业毒物，它以氧化或盐的形式存在，如:As2O3粉尘(砒霜)及其他砷盐形式。由于长期呼吸道吸人，皮肤直接接触，砷以无活性的形式或蓄积在皮肤、毛发、指(趾)甲及骨骼中而引起砷中毒，甚至在脱离接触后砷仍可残留在体内达数年之久。而导致皮肤癌、

10、肺癌等。,目前砷的测定方法有许多种,可以归类为容量法、光度法、电化学法、原子吸收法、中子活化法、微波发射光谱法、放射分析法、气相色谱法、动力方法、化学发光法。,和这些方法相比,砷斑法(即古蔡氏法,下称为砷斑法)实验仪器简单,所需药品的价格低廉,过程简便,精确度高。,（一）古蔡法 Ch.P（2005）、BP（2005）,遇HgBr2试纸生成黄色棕色的砷斑，与2ml标准砷溶液在相同条件下生成的砷斑比较,1.原理 对照法,2.测定条件,（1）标准砷溶液临用新配，1gAs/ml。,（2）酸为反应物，酸量应足够，所以加浓盐酸5ml。,（3）酸性氯化亚锡及碘化钾的作用?,A.还原As5+为As3+，加快反

11、应速度；,B.碘化钾被氧化生成的I2又可被氯化亚锡还原为I-，I-与反应中生成的Zn2+能形成稳定的配位离子，有利于生成砷化氢的反应不断进行；,C.氯化亚锡与锌作用，在锌表面形成锌锡齐，使氢气均匀而连续地发生；,（4）醋酸铅棉花的作用是消除锌粒及供试品中少量硫化物的干扰，醋酸铅棉花60mg装管高度6080mm。,（5）锌粒应无砷,（6）砷斑不稳定，应立即观察,4.干扰及排除,（1）供试品若为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐时，加HNO3，使氧化成硫酸盐，以除去干扰，如硫代硫酸钠中砷盐的检查。,（2）供试品若为铁盐，需先加酸性氯化亚锡试液，将Fe3+还原为Fe2+。如枸橼酸铁铵中砷盐的检查。,（3）

12、具环状结构的有机药物，要先行有机破坏后再进行检查。,（二）Ag-DDC法 检查、含量测定 Ch.P（2005）、USP（29）,对照法,Ag-DDC法检查装置,直接比色或于510nm波长处测定吸收度，进行比较。,用有机碱吸收反应产生的HDDC有利于反应的进行。USP（29）用吡啶，Ch.P（2005）用三乙胺。,检查不含金属的有机药物或挥发性无机药物中混入的无机杂质（金属氧化物或无机盐类）。,七、炽灼残渣检查法,1.原理 样品炭化后+H2SO4湿润700800炽灼至恒重炽灼残渣（硫酸灰分）限量一般为0.1%0.2%,2.操作方法,3.注意事项,（1）供试品的取样量应根据炽灼残渣限量和称量误差决

13、定。,（2）加硫酸处理是使杂质转化为稳定的硫酸盐，并帮助有机物炭化,八、溶液颜色检查法,控制药物中有色杂质限量的方法。,Ch.P（2005）采用三种方法检查。,第一法 目视比色法 即与标准比色液比较的方法，全波长范围定性观察,观察方法,标准比色液的配制,九、易炭化物检查法,检查药物中遇H2SO4易炭化或易被氧化呈色的微量有机杂质。,方法：H2SO4炭化后与对照液比较。,对照液：（1）“溶液颜色检查”项下的标准比色液；（2）由比色用氯化钴液，比色用重铬酸钾液，比色用硫酸铜液按规定方法配成的对照液；,比色：同置白色背景前，平视观察比较。,（3）高锰酸钾液,十、澄清度检查法,检查药物中的微量不溶性杂

14、质，用作注射剂的原料药一般应作此项检查。,1.检查方法 对照法,2.浊度标准液的配制,中国药典规定用浊度标准液作为澄清度检查的标准。,反应原理：乌洛托品在偏酸性条件下水解产生甲醛，甲醛与肼缩合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色浑浊。,1.00硫酸肼溶液与10乌洛托品溶液等量混合配制浊度标准贮备液 浊度标准原液 浊度标准液（5个级号）,3.判断 药典中规定的“澄清”，系指供试品溶液的澄清度相同于所用溶剂，或未超过0.5号浊度标准液。,4.溶剂：水、酸、碱、有机溶剂 有机酸的碱金属盐类药物强调用“新沸过的冷水”,十一、干燥失重测定法,干燥失重是指药物在规定条件下经干燥后所减失的重量，主要是水分，也包括

15、其它挥发性物质。测定方法：,（一）常压恒温干燥法,适用于受热较稳定的药物。干燥温度一般为105。,干燥失重：第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥1h后进行。,（二）干燥剂干燥法,适用于受热易分解或挥发的供试品。,干燥剂：无水氯化钙、硅胶、P2O5。,（三）减压干燥法,适用于熔点低，受热不稳定或水分难赶除的药物。,除另有规定外，压力应在2.67kPa（20mmHg）以下。,十二、残留溶剂测定法,（一）残留溶剂测定法 药品中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产中，以及在制剂制备过程中使用的，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。,药品中常见的残留溶剂（第一、第二、第三类溶剂）的残留限度应符合

16、规定。对其他溶剂，应根据生产工艺的特点，制定相应的限度，使其符合产品规范、药品生产质量管理规范（GMP）或其他基本的质量要求。,（二）检查方法 中国药典采用气相色谱法(GC)检查残留有机溶剂,色谱柱（1）毛细管柱（2）填充柱 直径为0.250.18mm的二乙烯苯乙基乙烯苯型高分子多孔小球或其他适宜的填料,2.色谱系统适用性试验：中国药典规定，在残留溶剂测定前应作色谱系统适用性试验。,（1）用待测物的色谱峰计算，毛细管色谱柱的理论板数应不低于5000，填充柱的理论板数一般不低于1000；,（2）待测物色谱峰与其相邻色谱峰的分离度应大于1.5；,（3）用内标法测定时，对照品溶液连续进样5次，待测物

17、与内标物峰面积之比的相对标准偏差应不大于5；若用外标法测定，待测物峰面积的相对标准偏差应不大于10,3.测定法,第一法 毛细管柱顶空进样等温法 当需要检查有机溶剂的数量不多，且极性差异较小时，可采用此法。,第二法 毛细管柱顶空进样系统程序升温法 当需要检查有机溶剂的数量较多，且极性差异较大时，可采用此法。,第三法 溶液直接进样法,十三、酸碱度检查法,1.概述 酸度：pH值低于7.0 碱度：pH值高于7.0 酸碱度：pH值在7.0上下两侧 酸碱度检查所用的水应是新沸并放冷至室温的水。,2.酸碱度检查法（1）酸碱滴定法 取一定量的供试品溶于一定体积的溶液中，加入一定量的指示液，用规定浓度的酸碱滴定

18、液测定酸碱性杂质的限量，判断供试品是否符合规定,（2）指示剂法 在一定量的供试品中加入规定指示液，根据指示液的颜色变化来控制酸碱性杂质的限量,（3）pH值测定法 常用于制备注射剂原料药中酸碱性杂质的控制,第三节 特殊杂质检查方法,一.利用药物和杂质在物理性质上的差异（一）臭味及挥发性的差异（二）颜色的差异（三）溶解行为的差异（四）旋光性质的差异（五）对光吸收性质的差异紫外分光光度法，红外法,（六）吸附或分配性质的差异薄层色谱法,杂质对照品法,供试品自身对照法,对照药物法,2.高效液相色谱法,二.利用药物和杂质在化学性质上的差异,（一）酸碱度的差异（二）杂质与一定试剂反应产生沉淀（三）杂质与一定

19、试剂反应产生颜色,甲氨蝶呤药物损害事件,卫生部、国家食品药品监管局日公布上海医药（集团）有限公司华联制药厂生产的鞘内注射用甲氨蝶呤和阿糖胞苷引起的药物损害事件调查情况。该厂在生产部分批号甲氨蝶呤和阿糖胞苷过程中混入了硫酸长春新碱,今年、月份，国家药品不良反应监测中心分别接到上海、广西、北京、安徽、河北、河南等省、区、市的报告，反映部分医院在使用上海医药（集团）有限公司华联制药厂部分批号的鞘内注射用甲氨蝶呤和阿糖胞苷后，一些白血病患者出现行走困难等神经损害症状。国家食品药品监管局和卫生部联合发出通知，暂停生产、销售和使用华联制药厂部分批号的甲氨蝶呤和阿糖胞苷。,药物杂质研究思路,杂质研究的基本目

20、的：只要能用科学的数据证明药品中的杂质被控制在安全、合理的范围内。,什么是有关物质？,概念：指有机杂质，包括工艺中引入的杂质和降解产物，可能是已知的或未知的、挥发性的或不挥发性的，这类杂质的化学结构与活性成分的分子式类似或具渊源关系，故通常又可称之为有关物质。,司可巴比妥的合成途径,在质量标准中普遍采用的杂质检测方法主要有高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography；HPLC）薄层色谱法(Thin Layer Chromatography；TLC)、气相色谱法(Gas Chromatography；GC)毛细管电泳法（Capillary Elec

21、trophoresis；CE）,由于各种分析方法均具有一定的局限性，因此在进行杂质分析时，应注意不同原理的分析方法间的相互补充与验证，如HPLC与TLC,分析方法的验证,杂质检测方法的验证应参照相关的技术指导原则进行，重点在于专属性和可定量性的验证。,专属性 系指在其它成分（如杂质、降解产物、辅料等）可能存在下，采用的方法能正确测定出被测物的特性。,为验证杂质分析方法的专属性，对于原料药，可根据其合成反应原理，采用各步反应的中间体（尤其是后几步反应的中间体）验证该方法对制备工艺中产生杂质的分离能力。,选用合适的酸、碱、光、热、氧化反应等加速破坏性试验来验证分析方法的专属性,强制降解试验对于未知

22、杂质的分离度考察是非常必要的，其目的主要是提供关于杂质（特别是降解物）与样品的分离情况、样品稳定性及降解途径等重要信息。,检测限 是反映分析方法灵敏度的一个重要指标，所用分析方法的检测限一定要符合质量标准中对杂质限度的要求，最低检测限不得大于该杂质的报告限度。,定量方法,杂质对照品法加校正因子的主成分自身对照法不加校正因子的主成分自身对照法峰面积归一化法。,杂质限度的制订,在质量标准的制订过程中应充分论证质量标准中是否载入某一杂质及其限度制订的合理性。,有机杂质的限度确定,在制订质量标准中杂质的限度时，首先应从安全性方面进行考虑，尤其对于有药理活性或毒性的杂质；其次应考虑生产的可行性及批与批之间的正常波动；还要考虑药品本身的稳定性。,创新药物,由于在创新药物的研究过程中，需通过一系列的药理毒理及临床研究来验证该药品的安全有效性，而研究所用的样品本身就包含了一定种类与数量的杂质。如果在这些研究中并未明显反映与杂质有关的毒副作用，即使有些杂质的含量超出了附件1或2的报告限度，从安全性方面考虑，也可认为该杂质的含量已经过了安全性的验证。,在某些情况下，将杂质的限度降到符合附件1或2的要求，可能比提供该杂质的安全性数据更为简单。如果能有比较充足的文献数据证明该杂质的安全性，也可不降低该杂质的限度。,