实验1微生物学实验常用仪器洗涤及干热灭菌.ppt

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1、实验一 微生物学实验常用仪器洗涤及干热灭菌,目的要求实验原理实验材料实验程序结果与思考题,目 的 要 求,认识微生物实验所需要的各种器皿,了解常用工具和仪器的名称、用途。掌握对玻璃器皿的清洗、包扎方法与干热灭菌的操作过程。,实验原理,微生物学实验要求较高的无菌状态,因此,实验所用的器皿,大多数要进行消毒、灭菌从而用以培养微生物,所以对其质量、规格、洗涤和包扎方法均有一定要求。清洁的玻璃器皿是实验得到正确结果的先决条件,包扎方法要能保证防止污染杂菌。空的玻璃器皿一般用干热灭菌.,实 验 材 料,玻璃仪器:每人数:培养皿 3套;大试管 3只。每组数:三角瓶 6只;烧杯(500ml)2只;烧杯(10

2、00ml)1只;小试管 6只;吸管(0.2ml 2支,0.5ml 2支,1ml 2支,5ml 2支)共8支 每橱数:量筒(500ml)1只;洗涤用品:去污粉、肥皂、清洗剂、毛刷等。包扎用品:棉花、扎绳、包扎纸等。,实验程序(仪器的认识、清洗与包扎),(一)学习下列常用仪器的种类、规格和应用范围:培养皿;试管;三角瓶;烧杯;吸管;量筒。(二)学习玻璃器皿的洗涤方法:(三)学习各种器皿的包扎:,由一底一盖组成一套,常用的培养皿皿底直径90 mm,高15mm,皿底皿盖均为玻璃制成。制成平板,可用于分离、纯化、鉴定菌种、活菌计数以及测定抗生素、噬菌体的效价等。,根据其大小和用途不同,有下列三种型号:(

3、1)大试管(约18mm180mm):可装倒平板用的培养基;可作制备斜面用(需要大量菌体时用)装液体培养基用于微生物的振荡培养。(2)中试管(1315)mm(100150)mm:装液体培养基培养细菌或做斜面用,用于细菌、霉菌、病毒等的稀释和血清学试验。(3)小试管(1012)mm100mm:一般用于糖发酵或血清学试验,和其它需要节省材料的试验。,三角瓶:100mL、250mL、500mL和1000 mL 用来装无菌水、培养基和振荡培养微生物等。烧杯:50mL、100mL、250mL、500mL和1000mL 用来配制培养基与各种溶液等。玻璃吸管:1mL、2mL、5mL、10mL,玻璃器皿的洗涤方

4、法:,1、新玻璃器皿的洗涤 在2%的盐酸溶液中浸泡数小时,用自来水冲洗干净。2、旧玻璃器皿的洗涤(1)试管、培养皿、三角瓶:洗衣粉和去污粉洗刷,自来水冲洗 A 装有固体培养基:刮掉,洗涤 B 带菌的器皿:2%来苏尔或0.25%新洁尔灭消毒液中浸泡24小时或煮沸0.5小时,然后洗涤 C 带病原菌培养物的器皿:先高压蒸汽灭菌,倒去培养物(2)玻璃吸管:吸管尖端与装在水龙头上的橡皮管连接,反复冲洗 a 吸过血液、血清、糖溶液或染料溶液等的玻璃吸管:立即投入盛有自来水的容器中浸泡,实验后集中冲洗。b 塞有棉花的吸管:用水将棉花冲出,然后冲洗 c 吸过含有微生物培养物的吸管:2%来苏尔或0.25%新洁尔

5、灭消毒液中浸泡24小时然后洗 d 吸管内壁有油垢:洗涤液中浸泡数小时,再冲洗,洗涤后,若内壁的水均匀分布成一薄层,表示完全洗净,若还挂有水珠,则需用洗涤液浸泡数小时,然后再用自来水冲洗。,洗净后的试管倒置于试管筐内,三角瓶倒置于洗涤架上,培养皿的皿底和皿盖分开,依次压着皿边排列倒扣在桌上,晾干.,培养皿的包扎:牛皮纸或旧报纸包紧,一般以58套培养皿包成1包吸管的包扎:1 在上端约0.5cm处,塞入一小段1.5 cm长的棉花(勿用脱脂棉),目的是避免将外界或嘴中杂菌吹入管内,或不慎将菌液吸出管外。2 45 cm宽的长纸条.试管和三角瓶等的包扎:,实验程序(干热灭菌的原理和操作方法),干热灭菌是利

6、用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关,在菌体受热时,当环境和细胞内含水量越大,则蛋白质凝固就越快,反之含水量越少,凝固缓慢。与湿热灭菌相比,干热灭菌所需温度要高(160170),时间要长(12h),但干热灭菌温度不能超过180,否则,包器皿的纸或棉塞就会烧焦,甚至引起燃烧。,原理,实验程序(干热灭菌的原理和操作方法),1装入待灭菌物品 将包好的待灭菌物品(培养皿、吸管等)放入电烘箱内,关好箱门。物品不要摆得太挤,以免妨碍空气流通;不要接触电烘箱内壁的铁板,以防包装纸烤焦起火。2升温 接通电源,拨动开关,打开电烘箱排气孔,让温度逐渐上升。当温度升至100时,关闭排气孔。3恒温 当温度升达到160170时,恒温调节器会自动控制调节温度,保持此温度2h。干热火菌过程,严防恒温调节的自动控制失灵而造成安全事故。4降温 切断电源、自然降温。5开箱取物 待电烘箱内温度降到70以下后,打开箱门,取出灭菌物品。,操作方法,结果与思考题,1、通过本次实验你认识了微生物学实验常用的哪些器皿?2、简述玻璃器皿洗涤的基本要求。3、简述干热灭菌的操作步骤。,

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