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1、实验一 微生物学实验常用仪器洗涤及干热灭菌,目的要求实验原理实验材料实验程序结果与思考题,目 的 要 求,认识微生物实验所需要的各种器皿，了解常用工具和仪器的名称、用途。掌握对玻璃器皿的清洗、包扎方法与干热灭菌的操作过程。,实验原理,微生物学实验要求较高的无菌状态，因此，实验所用的器皿，大多数要进行消毒、灭菌从而用以培养微生物，所以对其质量、规格、洗涤和包扎方法均有一定要求。清洁的玻璃器皿是实验得到正确结果的先决条件，包扎方法要能保证防止污染杂菌。空的玻璃器皿一般用干热灭菌.,实 验 材 料,玻璃仪器：每人数：培养皿 3套；大试管 3只。每组数：三角瓶 6只；烧杯（500ml）2只；烧杯（10
2、00ml）1只；小试管 6只；吸管（0.2ml 2支，0.5ml 2支，1ml 2支，5ml 2支）共8支 每橱数：量筒（500ml）1只；洗涤用品：去污粉、肥皂、清洗剂、毛刷等。包扎用品：棉花、扎绳、包扎纸等。,实验程序（仪器的认识、清洗与包扎）,（一）学习下列常用仪器的种类、规格和应用范围：培养皿；试管；三角瓶；烧杯；吸管；量筒。（二）学习玻璃器皿的洗涤方法：（三）学习各种器皿的包扎：,由一底一盖组成一套，常用的培养皿皿底直径90 mm，高15mm,皿底皿盖均为玻璃制成。制成平板，可用于分离、纯化、鉴定菌种、活菌计数以及测定抗生素、噬菌体的效价等。,根据其大小和用途不同，有下列三种型号：(
3、1)大试管(约18mm180mm):可装倒平板用的培养基;可作制备斜面用（需要大量菌体时用）装液体培养基用于微生物的振荡培养。(2)中试管(1315)mm(100150)mm:装液体培养基培养细菌或做斜面用,用于细菌、霉菌、病毒等的稀释和血清学试验。(3)小试管(1012)mm100mm:一般用于糖发酵或血清学试验，和其它需要节省材料的试验。,三角瓶:100mL、250mL、500mL和1000 mL 用来装无菌水、培养基和振荡培养微生物等。烧杯:50mL、100mL、250mL、500mL和1000mL 用来配制培养基与各种溶液等。玻璃吸管:1mL、2mL、5mL、10mL,玻璃器皿的洗涤方
4、法:,1、新玻璃器皿的洗涤 在2%的盐酸溶液中浸泡数小时，用自来水冲洗干净。2、旧玻璃器皿的洗涤（1）试管、培养皿、三角瓶：洗衣粉和去污粉洗刷，自来水冲洗 A 装有固体培养基：刮掉，洗涤 B 带菌的器皿：2%来苏尔或0.25%新洁尔灭消毒液中浸泡24小时或煮沸0.5小时，然后洗涤 C 带病原菌培养物的器皿：先高压蒸汽灭菌，倒去培养物（2）玻璃吸管：吸管尖端与装在水龙头上的橡皮管连接，反复冲洗 a 吸过血液、血清、糖溶液或染料溶液等的玻璃吸管：立即投入盛有自来水的容器中浸泡，实验后集中冲洗。b 塞有棉花的吸管：用水将棉花冲出，然后冲洗 c 吸过含有微生物培养物的吸管：2%来苏尔或0.25%新洁尔
5、灭消毒液中浸泡24小时然后洗 d 吸管内壁有油垢：洗涤液中浸泡数小时，再冲洗,洗涤后，若内壁的水均匀分布成一薄层，表示完全洗净，若还挂有水珠，则需用洗涤液浸泡数小时，然后再用自来水冲洗。,洗净后的试管倒置于试管筐内，三角瓶倒置于洗涤架上，培养皿的皿底和皿盖分开，依次压着皿边排列倒扣在桌上,晾干.,培养皿的包扎：牛皮纸或旧报纸包紧，一般以58套培养皿包成1包吸管的包扎：1 在上端约0.5cm处，塞入一小段1.5 cm长的棉花（勿用脱脂棉），目的是避免将外界或嘴中杂菌吹入管内，或不慎将菌液吸出管外。2 45 cm宽的长纸条.试管和三角瓶等的包扎：,实验程序（干热灭菌的原理和操作方法）,干热灭菌是利
6、用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白质凝固就越快，反之含水量越少，凝固缓慢。与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度要高（160170），时间要长（12h），但干热灭菌温度不能超过180，否则，包器皿的纸或棉塞就会烧焦，甚至引起燃烧。,原理,实验程序（干热灭菌的原理和操作方法）,1装入待灭菌物品 将包好的待灭菌物品（培养皿、吸管等）放入电烘箱内，关好箱门。物品不要摆得太挤，以免妨碍空气流通；不要接触电烘箱内壁的铁板，以防包装纸烤焦起火。2升温 接通电源，拨动开关，打开电烘箱排气孔，让温度逐渐上升。当温度升至100时，关闭排气孔。3恒温 当温度升达到160170时，恒温调节器会自动控制调节温度，保持此温度2h。干热火菌过程，严防恒温调节的自动控制失灵而造成安全事故。4降温 切断电源、自然降温。5开箱取物 待电烘箱内温度降到70以下后，打开箱门，取出灭菌物品。,操作方法,结果与思考题,1、通过本次实验你认识了微生物学实验常用的哪些器皿？2、简述玻璃器皿洗涤的基本要求。3、简述干热灭菌的操作步骤。,
