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1、高锰酸钾法测饮料中的总糖,一、原理,还原糖在碱性溶液中使铜盐还原成氧化亚铜，在酸性条件下，氧化亚铜能使硫酸铁还原为硫酸亚铁，再用KMnO4溶液滴定硫酸亚铁，即可标出还原糖的量。本法为国标GB5009.7-85方法，适用于所有食品中还原糖的测定及通过酸水解或酶水解转化为还原糖的非还原性糖类物质的测定。准确度和重现性均优于直接滴定法,二、试剂,1、碱性酒石酸铜甲液：称取15克硫酸铜(CuSO4.5H20)及0.05克次甲基蓝，溶于水中并稀释至1000毫升。2、碱性酒石酸铜乙液：称取50克酒石酸钾钠及75克氢氧化钠，溶于水中，再加入4克亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000毫升，贮于橡胶塞玻璃瓶
2、内。3、盐酸4.20%的氢氧化钠溶液。5.甲基红指示剂。6.5%的硫酸铁溶液。,三、操作,1.样品处理处理CO2：吸样液50ml，水浴加热于100ml容量瓶，加水至刻度定容可测还原糖及蔗糖。,2.样品测定,取50ml处理的样液于400ml烧杯加A、B液各25ml加热在4min左右沸腾再煮2min趁热抽滤用60水洗烧杯和沉淀直到洗液不成碱性将抽滤的纸（或者石棉）及Cu2O转入原来烧杯用25ml硫酸铁溶液冲洗古氏坩埚使冲洗液全部洗入原烧杯中加水25ml使Cu2O溶解用0.1N KMnO4标液滴定至微红色，同时用50ml水按上述方法做空白实验。,四、注意事项：,（1）煮沸后的溶液显红色不显兰色，则表
3、示糖量高，可减少取样体积。（2）在洗涤Cu2O的整个过程中应使沉淀上层保持一层水层，以隔绝空气，避免Cu2O被空气中的氧所氧化。（3）严格控制在4分钟内煮沸（4）此法适用于各类食品中还原糖的测定，有色样液不受限制，准确度高，重现性好。准确性和重现性都优于直接滴定法，但操作复杂、费时，需使用特制的高锰酸钾法糖类检索表。,（5）此法以测定反应过程中产生的定量的亚铁离子为计算依据，因此在样品处理时，不能用乙酸锌和亚铁氰化钾作诶澄清剂，以免引入亚铁离子。（6）当样品中的还原糖有双糖时，由于这些双糖的分子中仅有一个还原基，测定结果将偏低。,五、计算,1.样品中还原糖质量相当于氧化亚铜的质量：m=(V-V
4、0)C2.5143.08/10001000-（1）式中m为样品还原糖相当于氧化亚铜的质量（mg）V为滴定样品时，消耗的高锰酸钾标准溶液的体积（ml）V0为滴定空白时，消耗的高锰酸钾标准溶液的体积（ml）C为高锰酸钾标准溶液的浓度(mol/L)143.08为氧化铜的摩尔质量(g/mol),根据（1）式中计算所得氧化亚铜质量，由下列（2）（3）（4）（5）式回归方程可分别得出氧化亚铜相当于还原糖的质量(mg)m1=0.4388x-0.4805-(2)m2=0.4865x-0.7268-(3)m3=0.6856x-0.3087-(4)m4=0.4545x-0.0327-(5)式中m1为氧化亚铜质量相当于葡萄糖的质量（mg）式中m2为氧化亚铜质量相当于果糖的质量（mg）式中m3为氧化亚铜质量相当于乳糖的质量（mg）式中m4为氧化亚铜质量相当于转化糖的质量（mg）,2.还原糖：miX=m(V2/V1)1000 100%式中X为还原糖含量（%）mi为m1或 m2或m3或m4m为样品质量(g)V1为样品处理总体积(ml)V2为测定用样品溶液总体积(ml),思考题,1.直接法测糖与高锰酸钾法测糖有什么区别？,
