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1、一例猪圆环病毒病的诊断与治疗【摘要】2011年12月15日至2012年1月15日,笔者在江苏省盐城市某猪场内实习时,该猪场发生一起仔猪传染病。通过临床症状诊断、病理解剖诊断、酶联免疫吸附法诊断等方法确诊为猪圆环病毒病。通过从抗病毒和抗菌结合、治标治本结合、中药西药结合三原则对病猪就行防治,取得了较好的效果。【关键词】猪;圆环病毒病;诊断;治疗DiagnosisandtreatmentofacaseofporcinecircovirusinfectionAbstractAnoutbreakwasoccurredinapigfarmbelongingtoYancheng,Jiangsuprovin
2、cewhereispracticedinDecember15,2011toJanuary15,2012.ItwasdeterminedasporcineCircovirusinfectionbasedonclinicalsigns,grosslesionsandELISAdetection.Sowemadeacomprehensivetreatmentincludingcombinedusageofanti-virusandanti-bacterialdrugs,addressingboththesymptomsandrootcauses,combinedusageofChinesetradi
3、tionalmedcineandwesternmedcines.Thecurativeeffectwasprovedtobeverygood.Keywords:pigporcinecircovirusinfectiondiagnosistreatment弓IQ文献综述1病原学及流行病学特征1.1病原1 .2流行病学2 侪大2.12.22.32.42.52.62.7仔猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)猪皮炎与肾病综合征(PDNS)繁殖障碍性疾病猪呼吸道复合体病(PRDC)猪增生性肠炎(PPE)增生性/坏死性肺炎(PNP)猪传染性先天性震颤(CT)3病理变化3.1断奶仔猪多系统衰竭综合征3. 2
4、猪皮炎与肾病综合征3.3猪呼吸病综合征4诊断4. 1临床症状诊断4. 2病理解剖诊断4.3酶联免疫吸附法(ELISA法)4. 4PCR方法5防治5. 1预防5. 2治疗正文1234病例介绍临床症状剖解变化诊断4.14.24.34.4临床症状诊断病理解剖诊断制备被检血清结果5治疗5.1治疗原则5.2治疗方法6总结参考文献致谢22233334444555o6777778Ill引言猪圆环病毒病是由猪圆环病毒2型(PCV-2)感染所致的一种新的病毒性传染病。该病发病率高、传播迅速、易发生继发感染,给养猪业造成严重的经济损失。现已被世界各国的兽医与养猪业者公认为是继猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)之后新发
5、现的引起猪免疫障碍的重要传染病。本病一年四季均可发生,主要危害612周龄的仔猪。但在实行早期隔离断奶的猪场,1014日龄的断奶猪也有该病的发生,病毒可随粪便和鼻腔分泌物排出体外,经消化道传播,也可能经胎盘垂直传染仔猪,发病率和死亡率不定。呈地方性流行时,发病率和死亡率均较低,但急性暴发时,发病率可达10%50%,病死率达20%30%。如与猪细小病毒或猪繁殖与呼吸综合征病毒、链球菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌等混合感染时,死亡率会更高;而猪皮炎肾病综合征(PDNS)主要危害生长育肥猪,死亡率为15%20%。耐过猪发育不良,成年猪一般为隐性感染,不表现任何症状和病变。文献综述猪圆环病毒(Porc
6、ineCircovirusPCV)属于圆环病毒科圆环病毒属,是迄今为止发现最小的一种脊椎动物病毒。根据其抗原性及基因组成不同,分为PCV-I及PCV-2两种血清型,两者基本上没有交叉反应。本文着重阐述PCv-2型。PCV-I为非致病性的病毒,PCV-2为致病性的病毒。本病最早发现于加拿大魁百克省,分离自断奶仔猪多系统衰竭综合征(POStWeaningMultisystemicWastingSyndrome,PMWS)病例。研究表明,PCV-2与多种疾病有关,它是PMWS的主要病原,且与母猪流产、先天性震颤(CT)、育肥猪的慢性呼吸道综合征(PRDC)、猪皮炎和肾病综合征(PNDS)等疾病有关,
7、世界各地都有PCV-2相关疾病的报道。目前将PCv-2引发的疾病统称为圆环病毒相关病(PCV-2associateddisease,PCVAD)0在德国、法国、新西兰、美国、加拿大、日本等国家和地区已有从PMWS猪中检测到PCV-2的报道。我国学者证实在我国猪群中有PCv-2的存在。该病对养猪业的影响越来越大,造成的经济损失越来越多1病原学及流行病学特征1.1病原猪圆环病毒(Porcinecirvirus)属于圆环病毒科成员,呈20面体对称、无囊膜。病毒直径为17nm,是迄今发现的最小的动物病毒。PCV具有PCV-I和PCV-2两种基因型。PCV-2具有致病性。PCV-I无致病性,广泛存在体内
8、及猪源传代细胞系中。本病毒能在PKT5细胞上传代生长,但不能引起细胞病变。感染的PK-15细胞虽然不产生病变,但感染的PKT5细胞内有许多胞浆内包涵体,少数感染细胞内有核内包涵体。PCV-2对外界的抵抗力较强,在PH3的环境中很长时间不被灭活。病毒对氯仿不敏感,在5670C处理一段时间,仍不失活。在高温环境(72)也能存活一段时间。病毒不凝集牛、羊、猪、鸡等多种动物和人的红细胞。1.2流行病学PCv-2对猪具有较强的易感性。猪是PCV-2的主要宿主,各年龄均可感染,但仔猪感染后发病严重,612周龄猪最多见,呈现多种临床表现。感染猪可以通过鼻液和粪便排毒,经口腔、呼吸道途径传播。怀孕母猪感染后,
9、也可经胎盘垂直传播感染仔猪,引发繁殖障碍。PCv-2是致病的必要条件,但不是全部条件,必须在其他因素参与条件下才能导致明显临床病症。这些因素包括:猪舍的温度不适、通风不良、不同日龄猪混群饲养、猪体免疫接种应激,以及其他重要病原体的混合感染,如猪流感病毒(SIV),猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV),脑心肌炎病毒、链球菌、猪肺疫支原体和肺泡子虫等,但PCV-2与其他病的协同机理上不能确定。2临床症状1.1 仔猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)主要发生于513周龄的,很少影响仔猪。主要临床症状是体重下降、消瘦、被毛粗乱、贫血、可视黏膜苍白、呼吸困难、黄疸。严重者下痢、咳嗽
10、和中枢神经系统紊乱。1.2 猪皮炎与肾病综合征(PDNS)主要发生于1214周龄的猪,发病率一般小于5%,也有个别发病率高。病猪食欲减退,轻度发热,不愿走动,皮肤发生圆形或不规则形状的隆起,周围红色或者紫色而中央为黑色病灶,病灶出现在后驱和腹部,逐渐蔓延到胸部或耳部,融合成条带状和斑块状。2. 3繁殖障碍性疾病可发生于不同妊娠阶段,但多见于妊娠后期,出现流产、产死胎和木乃伊胎。死亡胎儿明显心肌肥大和心肌损伤,组织学变化是纤维素性或坏死性心肌炎。公猪精子活力低下叫2.1 猪呼吸道复合体病(PRDC)PRDC主要危害614周龄育成猪和1622周龄育肥猪,主要表现为生长缓慢、厌食、精神沉郁、发热、咳
11、嗽和呼吸困难。614周龄猪发病率可达2%-30%,死亡率为4%10%。眼观病变为弥漫性间质性肺炎,颜色灰红色。PRDC中的肺炎主要由于病毒和细菌的混合感染引起,如PeV-2、PRRSV、SIV、肺炎衣原体、胸膜肺炎和多杀性巴氏杆菌。2.2 猪增生性肠炎(PPE)已有越来越多的临诊观察和诊断表明,PCV-2感染可以引起肉芽肿性肠炎,猪只表现为腹泻、消瘦。2.3 增生性/坏死性肺炎(PNP)该病最早于1990年在加拿大首次报道。PNP的特征性组织病理学变化主要表现为肺泡中出现坏死细胞,大量巨噬细胞及蛋白样物质,坏死性细支气管炎;偶尔可见肺泡中出现大量多核巨细胞及单核细胞浸润引起的肺泡膈变厚的现象。
12、2.4 猪传染性先天性震颤(CT)CT(又名跳跳病、抖抖病)多见于1周龄内是仔猪。震颤为双侧性,影响骨骼肌肉卧下或睡眠时,震颤消失,外界刺激可引发或加重震颤,重症多死亡。耐过1周的乳猪能存活,3周龄时可康复或不完全康复,整个生长期和育肥期持续颤抖。3病理变化病理解剖变化因疾病类型不同而差异较大。2.5 断奶仔猪多系统衰竭综合征PMWS的猪死亡后,一般尸体消瘦,皮肤轻度到中度苍白,淋巴结肿大,切面发白,腹股沟、肠系膜、支气管等器官或组织的淋巴结病变尤为突出。肺质地坚实呈橡皮样,表面呈花斑状,灰棕色肺叶与正常的粉红色肺叶相间。有的病例肝表面呈花斑状,并有不同程度的萎缩,切面肉状、无充血、胆汁浓缩。
13、肾肿大、苍白,肾被膜下呈可见的白色病灶。盲肠和结肠粘膜充血或淤血。脾脏肿大,质地呈肉样变化。有的报道发现有明显的脾萎缩现象。2.6 猪皮炎与肾病综合征其特征性病理变化为全身性脉管炎和纤维蛋白坏死性肾小球肾炎。3. 3猪呼吸病综合征剖解病理性变化主要表现为大叶性肺炎、坏死性肺炎、胸膜肺炎、心包炎、浆膜炎、胸水和腹水增多等病理变化。4诊断3.1 临床症状诊断对猪场中的发病猪进行临床症状的检查,检测其体温、呼吸和心率并与猪的正常生理指标做比较,对猪群的精神状况、食欲、粪便等进行观察。最急性猪突然死亡,体温高达41.5,倦怠,不愿吃食,有的短期腹泻和呕吐。早期没有明显的呼吸症状,到晚期出现严重的呼吸困
14、难,病猪在出现症状后2436h内死亡。急性型体温高达40.541.0C。精神沉郁,严重呼吸困难,甚至张口呼吸,并有咳嗽。亚急性型和慢性型表现间歇性咳嗽,食欲减退。4. 2病理解剖诊断对病死猪进行解剖,检查肺、肾、肝、胃肠道及淋巴结的病理变化。肺脏肿胀,间质增宽,质地坚硬或似橡皮,其上散在有大小不等的褐色实变区。全身淋巴结,特别是腹股沟、纵隔肺门和肠系膜及颌下淋巴结显著肿大,切面为灰黄色。肾脏肿胀、灰白色。脾脏、肝脏轻度肿胀。胃粘膜水肿和非出血性溃疡,肠道尤其是回肠和结肠段肠壁变薄,肠管内液体充盈。4.1 酶联免疫吸附法(ELlSA法)可用于检测血清中的病毒抗体,包括多种ELlSA方法,虽然经常
15、受到各种因素的影响,重复性、稳定性还需改进,但用细胞培养的病毒(PCv-2)作为抗原,用PCV-2特异性单克隆抗体作为竞争试剂建立的竞争ELISA方法检出率较高,竞争ELISA法的检出率为99.58%,而间接免疫荧光法的检出率仅为97.14%o该方法可用于PCV-2抗体的大规模的检测IL4.2 PCR方法包括常规PCR和复式PCR,常规PCR是一种快速、简便、特异的诊断技术。采用PCV-2特异或群特异的引物从病猪的组织、鼻腔分泌物和粪便进行基因扩增,以达到特异检测PCV-2的目的。复式PCR可同时检测2种或2种以上的病毒。给猪圆环病毒病和其他感染性疾病混合感染的快速诊断带来了方便。5防治4.3
16、 预防加强饲养管理,降低饲养密度,实行严格的全进全出制,减少环境应激因素,如温度变化、贼风和有害气体。疫苗接种。实施严格生物安全措施,避免鼠、飞鸟及其他动物接近猪,防止PCV-2和其他感染因子的混合感染。用早期发现的疑似猪进行检测、淘汰。避免从疫区引进猪只,严格控制来访者、车辆、货物进入猪场。可以根据不同生长阶段的猪只采取相应的管理措施。提高猪群的营养水平,由于PCV-2感染可以导致猪群的免疫功能下降,因此,通过提高猪群的蛋白质、氨基酸、维生素和微量元素等,可以在一定程度上降低PCV-2相关病的发生率和造成的损失。4.4 治疗本病没有有效的治疗方法,抗生素对患猪无效,但抗生素的使用和良好的饲养
17、管理,有助于控制二重感染。5. 2.1治疗原则做到早发现早隔离,早治疗。治疗时采用综合疗法。从3个原则出发:抗病毒和抗菌结合;治标治本结合;中药与西药结合。5.2.2治疗方法采用抗菌药物,减少并发感染。氟苯尼考、丁胺卡那霉素、磺胺类药物+增效剂拌料和饮水。黄黄多糖注射液配合维生素Bl+维生素B2+维生素C肌肉注射。同时小柴胡散拌料或饮水。肌肉注射免疫球蛋白、转移因子,同时银翘散口服”叫正文1病例介绍江苏省盐城市某猪场保育区共养殖断奶猪2000余头,2011年12月10日,12头45日龄小猪先后发病,起初按感冒治疗用药,症状有所缓解,一旦停药又复发,病后第三天仔猪开始出现死亡。由于病情加重,遂请
18、市兽医站医师前来诊治。经调查,仔猪出生第2d注射Iml左右旋糖酊铁,Md口服仔猪副伤寒活疫苗,25d注射猪瘟-猪丹毒-猪肺疫三联疫苗。发病率为0.6机2临床症状病猪精神沉郁,食欲不振,生长迟缓,进行性消瘦与贫血,喘气,皮毛粗乱、苍白,伴有黄疸,有的在耳部、腹部可见出血性紫红色斑块;患猪呼吸困难,咳嗽气喘。部分病猪有神经症状,沉陷肌肉震颤,关节肿胀,跛行,站立不稳,倒地,四肢呈划水状。随着病情的发展,病猪眼睑发紫,耳朵发青,身体发绢,最后窒息死亡。3病理变化全身淋巴结肿大,尤以腹股沟和肠系膜淋巴结肿大明显;关节液增多;喉头、扁桃体充血、水肿;上呼吸道内含有大量泡沫样的液体;脑膜充血、水肿,脑脊髓
19、液增多;肺脏肿大,肺部有局灶性炎症,并伴有充血、出血、淤血条纹和水肿,且切开泡沫,患有弥漫性间质性肺炎;肝脏边缘呈紫黑色、表面有许多散在的颗粒状的大小不一的白色坏死斑点;肾脏表面有针尖大小出血点,肾上腺肿大且切面散布坏死点。4诊断1. 1临床症状诊断对猪场中的发病猪进行临床症状的检查,检测其体温、呼吸和心率并与猪的正常生理指标做比较,对猪群的精神状况、食欲、粪便等进行观察。最急性猪突然死亡,体温高达41.5,倦怠,不愿吃食,有的短期腹泻和呕吐。早期没有明显的呼吸症状,到晚期出现严重的呼吸困难,病猪在出现症状后2436h内死亡。急性型体温高达40.5-41.O0Co精神沉郁,严重呼吸困难,甚至张
20、口呼吸,并有咳嗽。亚急性型和慢性型表现间歇性咳嗽,食欲减退。4. 2病理解剖诊断对病死猪进行解剖,检查肺、肾、肝、胃肠道及淋巴结的病理变化。肺脏肿胀,间质增宽,质地坚硬或似橡皮,其上散在有大小不等的褐色实变区。全身淋巴结,特别是腹股沟、纵隔肺门和肠系膜及颌下淋巴结显著肿大,切面为灰黄色。肾脏肿胀、灰白色。脾脏、肝脏轻度肿胀。胃粘膜水肿和非出血性溃疡,肠道尤其是回肠和结肠段肠壁变薄,肠管内液体充盈。根据以上临床症状和剖检眼观病理变化初步诊断为猪圆环病毒病,再通过实验室诊断。5. 3实验室诊断通过前腔静脉或耳静脉采集12头猪血液,倾斜摆放采血器,置于3537C培养箱中23小时。将析出的血清后置于灭
21、菌离心管中。100Ormin离心5min。除去沉淀,保留上清液。低温保存送相关部门检测。应用ELISA方法对12头病猪的血清样品进行了猪圆环病毒2型的抗体检测,共检出阳性10份,可疑2份,总阳性率为83.3机5治疗5.1 治疗原则做到早发现早隔离,早治疗。治疗时采用综合疗法。从3个原则出发:抗病毒和抗菌结合;治标治本结合;中药与西药结合。6. 2治疗方法对于有临床症状猪只进行隔离治疗:(1)葡萄糖生理盐水、利巴韦林、头袍拉定、地塞米松混合静注;(2)抗病毒多肽和复方磺胺间甲氧喀咤钠,肌肉注射,每天一次;(3)病重猪注射精制高免血清或植物血凝素,每天一次,连用三天。(4)小柴胡散拌料和饮水。采取
22、以上措施后猪场的猪只发病及死亡得到了有效控制,且未出现新病例,收到了较好的效果。死亡率为16.7%,治愈率为83.3机6总结猪圆环病毒常破坏猪的免疫防疫系统,使病猪抵抗力降低,并可引发免疫抑制,易继发其他疾病而加重病情。疫苗接种是防止猪圆环病毒病的重要手段,猪场应制定合理的免疫程序和防疫制度并严格执行,定期监测猪群抗体水平,对所有的饲养设备及环境彻底消毒。猪场出现大批发病时,要及时隔离并进行实验室检验,确诊后对症治疗,对于未发病的猪只应该在饲料和饮水中添加增强免疫力的药物,以免疫情蔓延,造成重大损失。参考文献1苏双,孙健,卜春,等.猪圆环病毒2型感染的流行病学与病因J.猪病防治,2010(7)
23、:18-19.2杨冬玲.猪圆环病毒2型感染的诊断与防治J.猪病防治,2011(9):38-39.3姜平.兽医全攻略猪病M北京:中国农业出版社,2009:88-91.4李东华,刘建设.猪圆环病毒症状及防控J.畜牧兽医杂志,2012(31):135.5尹业师,黄伟健,陈琼,等.猪圆环病毒感染的病理组织学和致病机理研究进展J.动物医学进展,2006,27(11):18-21.6邹斌.猪病防治实用手册M.内蒙古:内蒙人民出版社,2009:82.7吴缘,王燕丽,李俊荣.用ELISA法对金华地区猪圆环病毒的血清学检查J.黑龙江畜牧兽医,2011(5):117-118.8梁立,李继昌.猪圆环病毒PCR检测方法的建立J.畜牧兽医科技信息,2010(10):29-30.9李永刚.猪圆环病毒的预防与治疗J.山东畜牧兽医,2011(32):36.10李少梅,李少芳,邱务喜.规模化猪场猪圆环病毒病的诊断与临床控制J.畜牧兽医科技信息,2012(2):71-72.致谢