《动物胚胎植入课件.pptx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《动物胚胎植入课件.pptx（91页珍藏版）》请在三一办公上搜索。
1、哺乳动物妊娠识别和妊娠建立 Pregnant Recognition and Implantation of Mammalian Embryos基本概念常见动物妊娠识别机理常见动物胚胎附植过程影响胚胎附植的因素,概念孕体(conceptus)：来自受精卵的所有结构,即胎体、胎膜和胎水构成的复合体，在妊娠识别和附植过程中起着主导作用。母体(mother)：受孕母畜，接受孕体产生的化学信号而发生复杂的生理变化，以接受孕体的存在，并为孕体发育提供良好的子宫环境。妊娠识别（pregnant recognition）：在妊娠初期，孕体发出化学信号传递给母体，母体随即产生反应，以维持黄体存在和促进孕体的发
2、育，这一生理过程叫妊娠识别。附植（着床,implantation）：哺乳动物囊胚滋养层细胞与母体子宫上皮细胞之间逐步建立组织和生理上联系的过程。,常见哺乳动物妊娠识别机理(一)猪 时间:1112天 妊娠信号:E2 Estrogen is secreted in a biphasic pattern from Days 11 to 30.The initial surge of estrogen production by the conceptus occurs on Day 12.The second sustained period of estrogen secretion by the
3、 conceptus is necessary on Days 1520 for prolonged CL extension.The ERs expression only in the glandular and luminal uterine epithelium from Days 5 to 12 of the cycle or pregnancy.,妊娠识别机理(The endocrineexocrine theory of CL Maintenance):E2-子宫内膜细胞ERs结合-子宫内膜细胞PRLR-黄体和垂体前叶分泌的PRL与PRLR结合-子宫内膜细胞的钙循环发生变化-PG
4、F2由内分泌转化为外分泌-PGF2在子宫腔中分解.The other agents have been reported to have an impact on uterine regulation and CL function in the pig,including conceptus secretions,catecholestrogens(儿茶酚雌激素）,polypeptides,prostaglandin E(PGE)and interferons.,(二)反刍动物1.ewe,doe,cow时间：7-21天妊娠信号：IFN-，分子量为18kD,172AA,glycoprotein
5、溶黄体机理：空怀母畜在发情后12天 P4R,E2R 诱导OTR COX-2 花生四烯酸转化为PGF2 黄体溶解识别机理：a.IFN-抑制E2R的合成 b.IFN-促进P4R的合成 c.IFN-促进PGF2合成抑制因子基因的表达 d.IFN-调节PGE2与PGF2的合成比例IFN-表达时间：开始囊胚期，D15高峰,此外，孕体产生PGE，子宫内膜产生EPSI(Endometrial prostaglandin synthesis inhibitor)。分泌时间：囊胚，高峰D15-18。,3.马(20-21),PGF2时间:妊娠12-14天妊娠信号:E2(D16)或蛋白质(1-6KD）?识别机理:?
6、4.啮齿动物通过假孕促进胚胎着床。假孕(pseudopregnancy):交配刺激诱导PRL释放,使黄体期由原来的1-2天,延长到10-11天的现象。胚胎着床后由胎盘或蜕膜分泌PRL维持黄体功能。5.灵长类动物时间:囊胚之前?妊娠信号:CG机理:CG与黄体细胞上的LH受体结合,维持黄体功能。免疫？,End,胚胎附植（着床）（一）附植过程 1.猪 2.反刍动物 3.马属动物 4.啮齿动物 5.灵长类动物（二）影响附植的因素 1.母体的激素环境 2.胚胎激素 3.子宫的接受性(三)延迟着床,Reproductive Medicine and Biology 2006;5:1929.,A schem
7、atic representation of the implantation cascade in domestic animals.,In domestic animals,the trophoblast cells do not penetrate the uterine epithelium,but maintain an apicalapical union throughout the implantation process.,During implantation process in rodents and some primates,the trophoblast cell
8、s dislodge the underlying uterine epithelium and gain access to the stromal compartment.The trophoblast will continue to migrate into maternal tissue until the gain direct access to the maternal blood(hemochorial placenta).,The trophoblast gains access to the underlying stroma by fusing with the ute
9、rine epithelium.Subsequent to fusion,the trophoblast cells will migrate into maternal tissue.,This is common in carnivores,where the trophoblast cell migrate between neighboring epithelial cells which are subsequently phagocytized and eventually form a endothelial placenta.,（一）附植过程对接（apposition）粘附（a
10、dhesion）侵入（penetration）1.猪在非腺体开口部:滋养层与子宫内膜绒毛交错连接妊娠（D13)，1824天在非腺体开口部这种连接完全建立。在腺体开口部:出现乳头状突起、盘状结构。,2.反刍动物（1）孕体初步固定时间：羊妊娠13天，牛妊娠18天过程：滋养层形成指状突起 深入子宫腺体开口部 固定孕体(2)胎盘子叶形成时间：绵羊妊娠14，牛妊娠16天 过程：滋养层细胞微绒毛与子宫内膜细胞突接触 在子宫阜部位两者出现粘连 形成胎盘子叶(3)双核细胞（binucleate cell)与合胞体（syncytium)时间：羊妊娠14天，牛妊娠17天过程：出现在子宫阜部位的滋养层 遍及整个滋养
11、层 与子宫上皮细胞融合 合胞体 功能：胎儿免疫保护，物质运输，分泌激素，？,致密基质,海绵基质,3.马属动物时间：妊娠24-40天过程：滋养层与子宫内皮细胞接触 绒毛膜环带形成 环带双核细胞吞噬子宫上皮细胞 进入上皮基质 形成内膜杯（妊娠38-130天）在内膜杯以外滋养层和上皮细胞之间有广泛的微绒毛连接,4.啮齿动物（D4-5)过程:胚胎体积增大，内膜水肿在胚胎接触部位子宫内膜出现蜕膜反应(Decidual Cell Reaction)基质细胞形成蜕膜细胞进入子宫基底膜形成蜕膜组织子宫内膜形成着床室 滋养层合胞体侵入子宫基膜,Endocrine Reviews,2004,25(3):34137
12、3,Developmental Biology 223,217237(2000),5.灵长类动物(D8-9)过程：胚体滋养层与子宫内膜细胞粘着 同时合胞体滋养层开始形成 子宫内膜发生蜕膜反应 合胞体滋养层侵入子宫基底膜 妊娠建立,Developmental Biology 223,217237(2000),影响胚胎附植的因素母体激素环境 P4：促进子宫发育，为胚胎发育提供营养 E2：参与子宫内膜的局部免疫调节 两者协同调节MUC1，LIF，HB-EGF PRL，OXT：参与调节妊娠识别，胚胎附植胚胎激素 妊娠信号，妊娠相关因子胚胎的接受性子宫内膜分泌的因子,延迟附植(Delayed impla
13、ntation,Diapause of embryo)1.Definition哺乳动物胚胎在母体内出现发育的暂时停滞现象,通常处于囊胚期。停滞时间:The roe deer(狍30-40）,armadillo(犰狳.700），marsupials(有袋类60-100）,carnivore（食肉类200-400）,the western spotted skunk（臭鼬）,the badger（獾）,mustelid（麝）,the mink（水貂）,the tammar wallaby（沙袋鼠）,2.Catogory兼性(facultative diapause):由外界环境引起的,并不固定。专
14、性(obligate diapause):在每个妊娠期都出现的。3.Stage of embryo hatched blastocyst,Wombat.,Koala,Red-necked Wallaby,Red Kangaroo,Nine-Banded Armadillo,BOBCAT,wolf,Eastern Spotted Skunk,Badger,Mustelid,America mink,Mink,Table 1 Characteristics of facultative vs obligate diapause of mammalian embryos.,End,配子与胚胎生物工程
15、,也称为胚胎生物技术。指对动物的卵子、精子和胚胎在体外人工控制的环境条件下进行各种操作与处理。如胚胎移植、体外受精、性别鉴定、胚胎分割、核移植（克隆）及转基因等。,胚胎移植（embryo transfer,ET）,将优良性状的种母畜与种公畜配种（或输精）后的早期胚胎取出，或利用其他生物技术手段获得的胚胎，移植到另一头同种的生理状况相同的母畜体内，使其继续发育到产出后代的技术。,牛胚胎移植示意图,(donor),(recipient),麻醉剂,胚胎移植的意义,1.充分发挥优秀母畜的繁殖潜力；2.加速品种改良；3.代替种畜引进；4.诱发单胎动物产双胎；5.保存品种资源；6.克服不孕症；7.防止传染
16、病的传播。,胚胎移植的生理学基础,1.发情后母畜生殖器官的孕向发育；2.早期胚胎的游离现象；3.胚胎的免疫特性；4.胚胎在受体子宫内发育过程中遗传特性不变。,胚胎移植的基本原则,1.胚胎移植前后的生理环境应一致；2.对胚胎发育的要求，不能超出功能黄体的期限；3.对胚胎质量的要求，应为A、B级胚胎。,胚胎移植的基本条件,1.有较高理论和技术水平的科技队伍及必要的工作条件；2.有充足的胚胎来源；3.有足够数量的受体母畜。,胚胎移植的技术程序,1.供、受体母畜的准备；2.供体母畜的超数排卵；3.胚胎的收集；4.胚胎的检查；5.胚胎移植。,超数排卵,指母畜发情的适当时间，用促性腺激素处理，使卵巢上有比
17、自然情况下较多的卵泡发育并排卵的方法。,（发情911天）FSHPG法牛超数排卵,早FSH1.5mg（国产，7.5mg/瓶）晚FSH1.5mg,早FSH1.0mg 晚FSH1.0mg,早FSH0.6mg+PGF24ml（0.4mg）晚FSH0.6mg,早 FSH0.4mg 晚FSH0.4mg,2448h发情后配种或输精两次，每隔6h输一次(为0d)（细管：1000万精子，颗粒1200万精子）,第67d冲洗子宫（尾椎麻醉：盐酸利度卡因100mg/5ml2）,桑椹胚早期囊胚,FSHCIDRPG法牛超排,发情周期任意一天埋置CIDR,10d后取出CIDR，埋入第二个CIDR（为第0d）,第5d 早FS
18、H 晚FSH,第6d 早FSH 晚FSH,第7d 早FSH 晚FSH,第8d早 FSHPGF2（取出CIDR，注PGF2）晚FSH,2448h发情，配种或输精（为第0d）,第67d冲洗子宫，获桑椹胚早期囊胚,*澳大利亚产FSH总剂量306mg；日本产FSH24AU（量递减）,PMSG法牛超数排卵（一）,PGF2消除黄体,发情第1617d，注射PMSG15003000IU,隔日注射 hCG10001500IU,2448h发情，配种或输精（为第0d）,第67d冲洗子宫，获得桑椹胚早期囊胚,PMSG法牛超数排卵（二）,发情周期第1113d，注射PMSG（5IU/Kg体重）,48和60h后分别注射PG
19、F2（24ml）一次,2448h发情，配种或输精（为第0d）,第67d冲洗子宫，获得桑椹胚早期囊胚,同时注射抗PMSG,FSHPG法羊超数排卵,早 FSH（国产，7.5mg/瓶）晚FSH,早 FSH 晚FSH,早 FSH+PGF22ml 晚FSH,2448h发情，配种或输精两次（为第0d）,发情周期第1213d（绵羊）、1618d（山羊）,第6d冲洗子宫，获得桑椹胚早期囊胚,同时静脉注射LH100150IU,*国产FSH总量为150300IU,FSHCIDR法羊超数排卵,发情周期任意1d阴道埋置CIDR（为第1d）,第10d换第二个CIDR,第16、17、18d 早FSH 晚FSH,第19d早
20、 FSH（取出CIDR）晚FSH,2448h发情，配种或输精（为第0d）,第6d冲洗子宫，获桑椹胚早期囊胚,第4d注射progcstin,*进口FSH经产羊总剂量7.04mg/只，育成羊5.28mg/只，等量注射,PMSG法羊超数排卵,发情周期的 1213d（绵羊）、第1618d（山羊）注射PMSG8001500IU,2448h发情，配种或输精（为第0d）同时注射hCG500750IU,第6d冲洗子宫，获得桑椹胚早期囊胚,胚胎收集,手术法冲胚示意图,上图：由子宫角向输卵管伞部冲洗（上行法）中图：由输卵管伞向子宫角输卵管接合部冲洗（下行法）下图：由子宫角上端向基部冲洗（下行法）,牛非手术法收集胚胎示意图,不同发育阶段的正常牛胚胎,发情后天数,发育阶段,牛的异常胚胎示意图,原核胚8细胞胚胎,桑椹胚早期囊胚,孵 化 囊 胚,麻醉剂,End,
