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1、专题二细胞工程2.2动物细胞工程2.2.2动物细胞融合和单克隆抗体回顾：植物体细胞杂交技术的过程（画出流程图）一、动物细胞融合（又叫：细胞杂交）1. 概念：指 或动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称细胞杂交。2. 结果：融合形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为细胞。3. 动物细胞融合原理：细胞膜的。4. 诱导动物细胞融合的方法物理方法:化学方法:生物方法:。5. 过程：6. 意义：细胞融合突破了有性杂交方法的局限，彳 成为可能。这一技术成为研究、肿瘤和生物 培育的重要手段。二、单克隆抗体问题1：抗体由什么细胞产生？长期以来，人们是如何获得抗体的方法？问题2：这种抗体有什么缺点？
2、为什么？问题3：如何获得大量性质单一的抗体呢？1. 概念：由单一B淋巴细胞进行无性生殖形成的细胞所产生的化学性、强的抗体。2. 单克隆抗体的制备过程：第一步：将注射到小鼠体内进行免疫；第二步：从该小鼠脾脏中获得能够产生抗体的细胞，与小鼠的细胞在，或聚乙二醇的诱导下融合；第三步：在特定的 培养基中，筛选出细胞；第四步：克隆化培养杂交瘤细胞，进行抗体检测，从中挑选出的细胞群，继续培养；第五步：将该杂交瘤细胞在条件下大规模培养或注射到小 内增殖，然 后再从培养液或小鼠腹水中提取，分离纯化单克隆抗体;3. 单克隆抗体的应用（1） 单克隆抗体的优点：性质单一，强、高，并可能（2）作为诊断试剂：诊断病毒引
3、起的疾病和用癌细胞制备的单克隆抗体定位诊断.优点:（3）用于治疗疾病和运载药物：运用药物与单克隆抗体连接在一起制成”.优 点：。【总结归纳】植物体细胞杂交与动物细胞融合比较植物细胞杂交（番茄马铃薯植株）动物细胞融合（单克隆抗体制备）过程第1步原生质体的制备（酶解法）正常小鼠的处理（注射灭活抗原）第2步原生质体的融合（物化法）动物细胞融合（物化生法）第3步杂种细胞的筛选和培养杂交瘤细胞的筛选和培养第4步杂种植株鉴定提纯单克隆抗体（特异性强、灵敏度高）原理/理论基础细胞膜的流动性、植物细胞的全能性细胞膜的流动性、细胞增殖融合前处理酶解法除去细胞壁：纤维素酶、果胶酶注射特定抗原法免疫处理正常小鼠促融
4、因子物理法：电刺激、离心、振动 化学法：聚乙二醇物化法：与植物相同 生物法：灭活的仙台病毒意义和用途（1）克服有性远缘杂交不亲和性障碍（2）培育作物新品种制备单克隆抗体有助于疾病的诊断、治疗、预防【课堂反馈】一、选择题1. 科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A. 经过免疫的B淋巴细胞B.不经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞D.不经过免疫的B淋巴细胞2. 动物细胞融合的目的中最重要的是（）A. 克服远源杂交不亲和B.制备单克隆抗体C.培育新物种D.生产杂种细胞3. 植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符
5、的是（）A. 纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理一一酶的专一性B. 植物组织培养和动物细胞培养一一细胞的全能性C. 原生质体融合和动物细胞融合一一生物膜的流动性D. 紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养一细胞分裂4. 下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（）A. 培养中的人效应T细胞能产生单克隆抗体B.培养中的人B细胞能够无限地增殖C.人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株D.用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞5. 单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是（） A.特异性强、灵敏度高B.与抗癌药物结合可制成“生物导弹”C. 体外培养B淋巴细胞可
6、大量分泌单克隆抗体D. 由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌6. 关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是（）A.可以制成诊断盒.用于疾病的珍断B.可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗C.可以利用基因工程技术生产D.可以在生物体内生产，不能体外生产7. 用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（） A. 将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞B. 用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C. 用聚乙二醇（PEG）作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D. 筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体8. 动物细胞培养的
7、细胞来自于（）A.任何个体的细胞B.只能取自动物胚胎细胞C.只能取自幼龄动物的组织细胞D.胚胎或幼龄动物的器官和组织细胞9. 动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是（）A.动物细胞培养B.动物细胞融合C.单克隆杭体D.胚胎、核移植10.如用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能是（）A、乳腺细胞的B、卵细胞的C、胃腺细胞的D、囊胚时期的胚胎细胞的11. 研究单克隆抗体治疗癌症的思路是（）A.利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞B.以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞C.抗癌物质在克隆细胞中大量合成D.单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞结合12. 用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生
8、不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞（）A.容易产生各种变 B.具有更强的全能C.取材十分方便 D.分裂增殖的能力强13. 动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）诱导融合的方法完全相同 所用的技术手段不相同 所采用的原理完全相同 都 能形成杂种细胞A.B.C.D.14. （多选）下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，正确的是（）A. B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般不需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导B. 融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克隆抗体C. 体外培养时，一个效应B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖D. 单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强
9、，灵敏度高，优越性明显15. （多选）关于制备单克隆抗体的叙述不正确的是（）A.单克隆抗体产自淋巴细胞 B.单克隆抗体的制备要经过细胞融合C. 单克隆抗体的获得不需要使细胞癌变D. 必须同时在体内和体外培养挑选出所需抗体的细胞群16. （多选）对细胞全能性的表述不正确的有（）A.没有离体植物细胞也能表现出全能性 B.动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现C. 单克隆抗体的制备原理依据是细胞的全能性D. 花粉可培育成单倍体，是细胞全能性的体现 17 （多选）将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是（）A. B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体B.
10、 B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖C. 骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖D. 骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体18. （多选）1975年米尔斯坦和柯勒成功地获得了单克隆抗体。下列细胞中与单克隆抗体的制备有关是（）A.效应B细胞B. T淋巴细胞C.骨髓瘤细胞D.杂交瘤细胞、非选择题19、下图为细胞融合的简略过程（只考虑两个细胞的融合），请据图回答：I.若A、B是基因型分别为rrHH、RRhh两个烟草品种细胞的花粉，且这两对 基因位于非同源染色体上，由于一对隐性纯合基因（rr或hh）的作用，在光照强 度大于800勒克斯时，都不能生长。（1）实验开始时必须用 除去不利于原生质体融合
11、的物质。（2）实验中除获得杂种细胞外，还有基因型为的融合细胞。（3）设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂种细胞，方法: （4） 将杂种细胞培养成杂种植株依据的理论基础。II.若该过程是制备治疗“SARS”病毒的单克隆抗体，A为人B淋巴细胞（染色体组成为2A+ XX=46），B为鼠骨髓瘤细胞（染色体组成为2A+XX=40）（5） 用单克隆抗体制成“生物导弹”主要利用了抗体的 特性。（6） A细胞来自于，杂种细胞C共有 个染色体组。（7） 杂交瘤细胞在体外培养时与植物组织培养的主要区别是培养基要用培养基。（物 理状态），培养基中除了添加必要的营养物质为还需加。20. 两场筹备了 10年
12、的“太空结 合”首次在神舟八号飞船上举行 了，“新人”之一是小白鼠B淋 巴细胞和骨髓瘤细胞，新人在 “产房”一一电融合仪内孕育新 生命。160min后，中国首批“太 空娃娃”终于顺利诞生。“太空 娃娃”诞生和地面实验如图所 示。请回答下列问题：小白鼠B淋巴细胞和骨髓瘤 细胞能融合在一起，体现了细胞 膜具有 的特点。(2) 若用于SARS的预防上，则宜采用细胞。科学工作者正在研究治疗癌症使用的生物导弹是。(3) B淋巴细胞和T淋巴细胞都是由 形成的。这种相同细胞的后代,在形态、结构和生理功能上产生稳定差异的过程，叫做。(4) 鼠的淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后，在培养时通过 (有丝/减数)分裂方式大
13、量繁殖。细胞中染色体数目与淋巴细胞相比有何特点？;要观察融合后的细胞 中的染色体形态、数目，可用一定浓度的处理。融合的细胞具有两种细胞的特性，即 和。21. 1975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。请观察下图，回答问题:培养基特殊成分主要作用次黄嘌吟骨髓瘤细胞不能利用氨基嘌吟阻断DNA合成胸腺嘧啶核苷脾细胞用于合成DNA(1) 单克隆抗体是指,其特点是。(2) 制备单克隆抗体的B淋巴细胞一般从 (器官)中采集。从表中看，用于筛选杂交瘤细胞的是特定的 培养基。(3) 大量制备单克隆抗体的方法主要有两种：体外培养法，可获得10g/mL的抗体；动物体内诱生法可获得520mg/m
14、L的抗体。你选择 的方法及原因。22、右图是制备分泌抗X抗体的过程，根据图解回答问题:（1）给小鼠注射抗原的目的是（2）在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂I带有抗X抗体L的细胞 %（B淋巴细胞，培养条件下只能存活几天）交瘤细胞具有 的特性。+骨RMK细胞（在正常培罪基中无限增殖,在选择培养基中死亡）（3）由图中可看出，单克隆抗融合放在多孔培养板中生长体制备过程运用了的动物细胞工程技术手段，前者常用的诱导剂与植物原生质体融合不同的是可用在盘荆岳养墓中只有杂交瘤细|胞生长3l t3Ej检测上清液中抗X抗体 并用阳性细胞克隆，0 胞C融合，可，（4）动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨 有所不同的是，还含有。（5）在动物细胞融合过程中，需要将所选取的组处理离体组织细胞使之分散开。（6）图中有两次筛选过程，其中步骤的目的是筛选出招共抗X抗体 的目的是筛选出
