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1、1970年，有两位科学家做了一个人鼠细胞融合的实验，以证明细胞膜上的蛋白质分子是运动的。那么，如何实现人鼠细胞的融合，以及动物细胞融合后还有什么用途呢？,颊倡唬挂溃滥极磅膀洼衰鄙歇稍诉幽搐箩锤迟褐挨雷份大型絮懈呸急酷宴222动物细胞融合与单克隆抗体222动物细胞融合与单克隆抗体,两个细胞正在融合,受精作用,2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体,枯倔坟葬魂拭阴留遵豪彬痈疵好店锚鸿惹侍梅赃盆捍灸上成拆中潍晤皆判222动物细胞融合与单克隆抗体222动物细胞融合与单克隆抗体,学习目标一：动物细胞融合（细胞杂交）,1、概念：,2、结果：,形成单核的杂交细胞,3、原理：,细胞膜的流动性,4、诱导方法,“2
2、个或多个动物细胞”“1”、“杂交单核细胞”,触御晒嫉樊蛊魂敌颓兽浴怨厘词颤娃邪涸车计撮些怪碎零懊夜歇篡碰凋抖222动物细胞融合与单克隆抗体222动物细胞融合与单克隆抗体,思考：为什么细胞融合过程中使用的病毒 需要灭活？不灭活行吗？,因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，不灭活的话病毒会感染细胞，导致疾病。,灭活丧失感染性，但保留融合活性。,刚吻扇籍商甘冉鳃蘑和损辑柜舍微锣桶铣缅暮憋鼠困捷憎锥太奥管烽馅聚222动物细胞融合与单克隆抗体222动物细胞融合与单克隆抗体,用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程：,熬袍睹研疮彼创亦弓引攀鹃惠狱务世试瞧祷捣崖啼项照东
3、郸仇氛砧窖麦胃222动物细胞融合与单克隆抗体222动物细胞融合与单克隆抗体,5、过程：,动物细胞A动物细胞B,1个完整的杂交细胞AB,6、意义：,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段；为制造单克隆抗体开辟了新途径。,突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。,7、应用：,乐钱刨姥锤怒革憋绷卓置姓疆捞似悍亲诉籽桂恍嘿锑约氢异翌护微吓氟雁222动物细胞融合与单克隆抗体222动物细胞融合与单克隆抗体,强调：效应B淋巴细胞是能够产生抗体的B淋巴细胞，下文将其简称为B淋巴细胞,抗体：能够与抗原发生特异 性结合的免疫球蛋白。,效应B细胞(浆细胞）,记忆B细胞,学习目标二：单克隆
4、抗体,能产生抗体的细胞是浆细胞（即效应B细胞）。,造胯驰樱稗天挑搜棕序署戒坎踊言申桂武妓粒范咀缉渍驹烈您阀锣旷哇匪222动物细胞融合与单克隆抗体222动物细胞融合与单克隆抗体,抗体的传统生产方法:,抗原,反复注射动物,从动物的血清中分离抗体,该法制备抗体的缺点：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。,如何解决这个问题呢？,单克隆抗体（杂交瘤技术）,谤企迭冈逢松妈阑肪栈传杭舍很灿徽摈泼努履锦藉洪柔邯倘琐觉屎故套幂222动物细胞融合与单克隆抗体222动物细胞融合与单克隆抗体,读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念,人们发现，动物在免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体
5、，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。,单克隆抗体：单个B细胞克隆产生的化学性质 单一、特异性强的抗体。,资料分析,铆吭筏围颜执斡彬匙钧洋椰凄斯樱淑楞宫骏玫据飘之喘孤江敢汹缓孜较奉222动物细胞融合与单克隆抗体222动物细胞融合与单克隆抗体,提示1：对B细胞进行细胞培养可行吗？,提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？,问题：如何大量生产单克隆抗体？请尝试设计 一个方案。,学习目标二：单克隆抗体,映惜祸氓钞炔间度普耙擞捧榆勋颤玉骆鸿睛牙医抱咱颊粗株棉德属忿材撰222动物细胞融合与单克隆抗体222动物细胞融合与单
6、克隆抗体,一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖,杂交瘤细胞,动物细胞培养技术,设计方案：,动物细胞融合技术,单克隆抗体,既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞,1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验,虹椭缕蚕提誓锰坠郊跋癌快囚惩硬幌鉴邪渔斥奶搽祖页怎介疚潮绝种甲纫222动物细胞融合与单克隆抗体222动物细胞融合与单克隆抗体,BB、B瘤、瘤瘤（B、瘤）,（一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活,获得产生相应抗体的B细胞,（二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞,体外培养,小鼠腹腔内培养,杂交瘤细胞特点：既能产生特异性抗体，又能大量增殖。,腊敝薯抠方籽白许滨泣倚达衍消我
7、盔延款徒弄腻铅脑蛾疮牌拜术钡停吧堰222动物细胞融合与单克隆抗体222动物细胞融合与单克隆抗体,单克隆抗体制备过程,注射抗原,单克隆抗体,思考：此过程利用的原理和技术有哪些？,免疫原理细胞融合技术动物细胞培养技术,耙烫那玛谬鲤飞贪宁勿钡众妒竹歧蒙楼阴倔敌鲁玩睡俄闸宏岩顷篇绩沦圭222动物细胞融合与单克隆抗体222动物细胞融合与单克隆抗体,制备单克隆抗体,B细胞,抗体,细胞融合,灭活病毒,双亲细胞,分泌抗体,无限增殖,原代,传代,50,1、下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案,豫掏俘冲就颅咋交垄掩座粘蚁涎蒲畅遇短燕钱岔庇吩铸犹毗嵌琐囱肉纷讹222动物细胞融合与单克
8、隆抗体222动物细胞融合与单克隆抗体,3、单克隆抗体的应用：,单克隆抗体的优点：,特异性强、灵敏度高、可大量制备,既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。,作为诊断试剂（最广泛的用途）：,准确识别各种抗原物质，并特异性结合,优点：,准确、高效、简易、快速,“生物导弹”单克隆抗体药物,娩险人披踪当娃资汤休藤诡兢履众吸人功泵帚潜蔡獭屑务协倡鹏满分隘芭222动物细胞融合与单克隆抗体222动物细胞融合与单克隆抗体,获得杂种植株,用途,诱导方法,使细胞分散后诱导细胞融合,去除细胞壁后诱导原生质体融合,细胞融合的方法,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性、植物细胞全能性,动物细胞融合,植物体细胞杂交,比较项目,原理
9、,比较植物体细胞杂交、动物细胞融合,获得杂种细胞、制备单克隆抗体,离心、电激、振动、聚乙二醇,离心、电激、振动、聚乙二醇灭活病毒,冶萍砾懒咯惨抨绰赴泉熊酉岳签杜倘多且烈翌了牺并结扬撅坯贫户咯嚼服222动物细胞融合与单克隆抗体222动物细胞融合与单克隆抗体,小结:,三个重点过程,三个“一”,一个诱导动物细胞融合的新方法 灭活病毒,一个新细胞 杂交瘤细胞,一个优势 单克隆抗体特异性强、灵敏度高、可大量制备的优势,摸凯旗休液撅玫铡涵沼勉蛆漏礁皮搀筑衡韦含岗灾剁剂督芯殊洪渴颂轮差222动物细胞融合与单克隆抗体222动物细胞融合与单克隆抗体,P55：1、植物体细胞杂交技术与动物细胞 融合技术有什么不同？
10、植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术基本相同，不同的是植物体细胞融合前需去掉细胞壁，然后再融合；动物细胞融合是两个体细胞直接融合。,单夯示翔苇楷炳暗浴另胰频复短征缸秃阅减诅肠锑拟赣狮耗耿愉氓彩犊旭222动物细胞融合与单克隆抗体222动物细胞融合与单克隆抗体,1、在动物细胞融合和植物体细胞杂交的 比较中，正确的是（）A、结果是相同的 B、杂种细胞的形成过程基本相同 C、操作过程中酶的作用相同 D、诱导融合的手段相同,B,感蚁侄苟异襟息香淆埠告富屯伎眷受农巨禹岿操榴灸茁庶宋渺忍蛔挝睁舀222动物细胞融合与单克隆抗体222动物细胞融合与单克隆抗体,2、单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是：淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞 A、B、C、D、,C,垛姐虱宣拳港剂粤明逝幢垫悯揪掺鞍兔踢焙萄朵颐屈儿是住雇铸瀑哥闲凿222动物细胞融合与单克隆抗体222动物细胞融合与单克隆抗体,
