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1、病原微生物学实验指导,实验教学中心成 静,实验一 细菌的基本形态与特殊结构,实验目的：1、掌握革兰染色法和细菌的基本形态2、熟悉细菌涂片的制备3、掌握细菌特殊结构观察4、掌握显微镜油镜的使用和保护,实验内容,1、临床微生物学实验室规则2、实验室意外的紧急处理办法3、实验时的注意事项4、细菌形态学检查：革兰染色和细菌基本形态观察 特殊结构观察,临床微生物学实验室规则,1、进入实验室必须穿白大衣，离室时脱下反折，必要时戴口罩操作。2、不必要物品勿带入实验室，必要的物品应放在指定区域。3、实验室内禁止饮食、抽烟，不得高声谈笑或随意走动。4、用过的有菌器材必须放在指定位置，小心处理传染材料、培养物和污
2、染物。5、避免任何有菌材料的溅出，如不慎污染工作台、人、衣服、地面等，应及时报告老师并处理。6、实验结束后物归原处，用消毒液浸泡、洗手，打扫卫生的同学清洁和消毒桌面、地面，并将实验器材送到准备室和消毒间，关闭水电门窗后离开实验室。,实验室意外的紧急处理办法,1、皮肤破损2、烧伤3、化学药品腐蚀伤4、菌液误入口中5、菌液流洒桌面6、火警,实验时的注意事项,一、严格遵循实验指导二、认真完成实验操作三、充分利用参考资料,细菌形态学检查,革兰染色法和细菌的基本形态,器材和试剂：菌种：金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌培养基：普通琼脂平板试剂：革兰染液其他：载玻片、生理盐水、酒精灯、火柴等,革兰染色法和细菌的基
3、本形态,细菌涂片的制作 涂片 干燥 固定,革兰染色法,方法1、初染:将结晶紫染液加在制好的涂片上，染色1分钟，用细水冲洗，甩去积水。2、媒染：加卢戈碘液，染1分钟，用细水冲洗，甩去积水。3、脱色：加95%酒精数滴，轻摇玻片数秒，使均匀脱色，至无紫色淌下，用细水冲洗，甩去积水。4、复染：加稀释复红染1分钟，用细水冲洗，甩去积水。用吸水纸吸干后，在涂片上滴加镜油，置油镜下检查。,革兰染色法,结果观察（油镜下观察，放大1000倍）：1、细菌的基本形态及大小：球菌、杆菌、弧菌2、细菌的排列方式：散在、葡萄状、链状、成双、四叠、八叠3、细菌的染色性：阳性呈紫色、阴性呈红色4、细菌的特殊结构：荚膜、芽孢，不能看到鞭毛。,大肠杆菌,金葡菌,霍乱弧菌,链球菌,革兰阴性双球菌,革兰染色法,思考题：1、原理2、意义3、注意事项,特殊结构观察,芽孢：破伤风杆菌（革兰染色法）荚膜：肺炎双球菌（革兰染色法）鞭毛：变形杆菌（镀银染色法）,破伤风芽孢,肺炎双球菌荚膜,变形杆菌周鞭毛鞭毛染色法,实验小结,1、实验报告要求2、思考题写到实验报告里,
